Surface Enhanced Raman Scattering-based Tumor Immunoassay Using PS@Ag Nano-probes and Si@Ag Array Substrate

基于Ag包覆聚苯乙烯球（PS@Ag）纳米探针和Ag覆盖硅金字塔结构（Si@Ag）阵列基底构建“三明治”免疫结构，开展表面增强拉曼散射（SERS）特性研究，实现了肝癌肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）的高灵敏、高特异性的检测.通过硝酸银原位还原生成PS@Ag纳米粒子，再依次链接4-巯基苯甲酸（4-MBA）及甲胎蛋白抗体（Anti-AFP）制备得到PS@Ag免疫探针.采用Langmiur-Bloggt膜技术、等离子体刻蚀和湿法刻蚀技术，以PS球阵列为模版，刻蚀大面积硅金字塔结构，再依次沉积Ag膜和链接Anti-AFP制备得到免疫基底.结果表明，基于“三明治”免疫结构的SERS检测方案具有高灵敏度（检测极限为1.75 fg·mL-1）和宽的动态范围（2 fg·mL-1~200 ng·mL-1）.此外，对临床人体血清样品进行SERS免疫检测，得到了与化学免疫发光法一致的结果，而且具有更高的灵敏度，可应用于肝癌的早期检测与诊断.