Cotransfer of antibiotic resistance genes and a hylEfm -containing virulence plasmid in Enterococcus faecium

El gen hyl Efm (que codifica una supuesta hialuronidasa) se ha encontrado casi exclusivamente en aislados clínicos de Enterococcus faecium y, recientemente, se ha demostrado que se encuentra en un plásmido que aumenta la capacidad de las cepas de E. faecium para colonizar el tracto gastrointestinal. En este trabajo, los resultados de los experimentos de apareamiento entre cepas de E. faecium que contienen hylz Efm pertenecientes al grupo clonal 17 y aisladas en los Estados Unidos y Colombia indicaron que el hyl EfmEl gen de estas cepas también se transporta en plásmidos grandes (> 145 kb) que mostramos que se transfieren fácilmente de cepas clínicas a huéspedes de E. faecium. También se observó cotransferencia de resistencia a vancomicina y resistencia de alto nivel (HLR) a aminoglucósidos (gentamicina y estreptomicina) y eritromicina. El grupo de genes vanA y los determinantes de resistencia a la gentamicina estaban genéticamente vinculados a hyl Efm , mientras que erm (B) y ant (6) -I, que confieren resistencia a macrólido-lincosamida-estreptogramina B y HLR a estreptomicina, respectivamente, no lo estaban. Un hyl EfmEl transconjugante positivo resultante de un apareamiento entre una cepa de endocarditis bien caracterizada [TX0016 (DO)] y un derivado de una cepa fecal de E. faecium de un voluntario humano sano (TX1330RF) exhibió una mayor virulencia en un modelo de peritonitis de ratón. Estos resultados indican que las cepas de E. faecium utilizan una estrategia que implica el reclutamiento en la misma unidad genética de genes de resistencia a antibióticos y determinantes que aumentan la capacidad de producir enfermedades. Nuestros hallazgos indican que la adquisición de los plásmidos hyl Efm puede explicar, al menos en parte, la reciente aparición exitosa de algunas cepas de E. faecium como patógenos nosocomiales. The hylEfm gene (encoding a putative hyaluronidase) has been found almost exclusively in Enterococcus faecium clinical isolates, and recently, it was shown to be on a plasmid which increased the ability of E. faecium strains to colonize the gastrointestinal tract. In this work, the results of mating experiments between hylzEfm-containing strains of E. faecium belonging to clonal cluster 17 and isolated in the United States and Colombia indicated that the hylEfm gene of these strains is also carried on large plasmids (>145 kb) which we showed transfer readily from clinical strains to E. faecium hosts. Cotransfer of resistance to vancomycin and high-level resistance (HLR) to aminoglycosides (gentamicin and streptomycin) and erythromycin was also observed. The vanA gene cluster and gentamicin resistance determinants were genetically linked to hylEfm, whereas erm(B) and ant(6)-I, conferring macrolide-lincosamide-streptogramin B resistance and HLR to streptomycin, respectively, were not. A hylEfm-positive transconjugant resulting from a mating between a well-characterized endocarditis strain [TX0016 (DO)] and a derivative of a fecal strain of E. faecium from a healthy human volunteer (TX1330RF) exhibited increased virulence in a mouse peritonitis model. These results indicate that E. faecium strains use a strategy which involves the recruitment into the same genetic unit of antibiotic resistance genes and determinants that increase the ability to produce disease. Our findings indicate that the acquisition of the hylEfm plasmids may explain, at least in part, the recent successful emergence of some E. faecium strains as nosocomial pathogens.