Busca de novos ligantes para o PPARy utilizando uma abordagem biofísica e celular

Orientador: Ana Carolina Migliorini Figueira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O diabetes tipo 2 atinge pelo menos 15% da população mundial e 6% da população brasileira, sendo caracterizado como parte do conjunto de patologias de efeitos associados, característicos da Síndrome Metabólica. O PPAR? regula a transcrição de genes relacionados ao metabolismo de lipídeos, controle de inflamação e produção de insulina, sendo um dos alvos diretos desta síndrome. Após observações de que a sensibilização à insulina é desencadeada não pela ativação direta do PPAR?, mas pelo impedimento da fosforilação de um de seus resíduos, a Ser273, postulou-se que um bom modulador deste receptor seria uma molécula que apresentasse baixa ativação do receptor e impedisse a fosforilação da Ser273. Atualmente, este receptor é modulado por fármacos como a rosiglitazona e a pioglitazona, que estão disponíveis no mercado, mas que têm seu uso questionado, devido aos seus efeitos colaterais. Neste trabalho buscamos, através da utilização de um conjunto de metodologias, novos compostos que modulem de forma seletiva o receptor nuclear PPAR?, proporcionando sensibilização à insulina, auxiliando no tratamento de diabetes tipo 2. Para tanto, padronizamos um conjunto de metodologias que fossem capazes de definir os efeitos desejados na busca de novos moduladores de PPAR?, através de ensaios de estabilidade estrutural, ensaios celulares, testes de ativação/repressão dos receptores e ensaios de afinidade a ligantes. Mais ainda, tentamos elucidar as mudanças estruturais provocadas pelos melhores compostos encontrados, por estudos de biologia estrutural. Com isso, encontramos alguns compostos promissores para o planejamento racional de fármacos no combate à diabetes, os quais, atualmente, constituem uma das classes mais procurada para a prática médica Abstract: Type 2 diabetes affects at least 15% of world population and 6% or Brazil¿s population, being featured as part of the set of pathologies of associated effects, characteristic of the metabolic syndrome. The PPAR? regulates the gene transcription related to the lipids metabolism, control of inflammation and insulin production, being one the direct targets of this syndrome. After observations that the insulin sensitization is unleashed not by the direct activation of PPAR?, but due to the prevention of the phosphorylation of one of its residues, a Ser273, it was positing that a good modulator of this receptor would be a molecule that can present low activation of the receptor and that could keep Ser273 from phosphorylating. Currently this receptor is modulated by drugs such as rosiglitazone and pioglitazone, which are both available on the market, but which have their use questioned due to it¿s collateral effects. In this work, through utilizing a set of methodologies, we look for new compounds that can modulate selectively the nuclear receptor PPAR?, providing sensitization to insulin, supporting treatment of type 2 diabetes. To do so, we standardized a set of methodologies that can be capable of defining the desired effects on the research of new modulators for PPAR?, through structural stability tests, cellular tests, activation/suppression of nuclear receptors tests and affinity to ligands. Furthermore, we try to clarify the structural changes caused by the best compounds, through protein crystallography studies and structural biology. This way, we were able to achieve promising compounds for drug rational planning in order to treat diabetes, which currently, are one the medical practice most wanted class Mestrado Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde Mestra em Ciências CAPES CNPQ 48025/2012-5