The use of qualitative and quantitative polymerase chain reactions for diagnosis of cytomegalovirus infections in bone marrow and kidney transplant recipients

The purpose of this work was to test a cytomegalovirus qualitative PCR and a semi-quantitative PCR on the determination of CMV load in leukocytes of bone marrow and kidney transplanted (RT) patients. Thirty three BMT and 35 RT patients participated of the study. The DNA was subjected to a qualitative PCR using primers that amplify part of CMV gB gene. CMV load of positive samples was determined by a semi-quantitative PCR using quantified plasmids inserted with part of the gB gene of CMV as controls. The sensitivity of the test was determined to be 867 plasmid copies/µg DNA. CMV loads between 2,118 and 72,443 copies/µg DNA were observed in 12.1% BMT recipients and between 1,246 and 58,613 copies/µg DNA in 22.9% RT recipients. Further studies are necessary to confirm the usefulness of this CMV semi-quantitative PCR in transplanted patients. O objetivo deste trabalho foi testar uma PCR qualitativa e uma PCR semiquantitativa para CMV para determinar a carga de CMV nos leucócitos de pacientes transplantados de medula óssea e transplantados de rim. Trinta e três pacientes TMO e 35 TR participaram deste estudo. O DNA foi testado pela PCR qualitativa utilizando primers que amplificam parte do gene gB de CMV. As cargas de CMV das amostras positivas foram determinadas pela PCR semi-quantitativa utilizando como controle plasmídios quantificáveis inseridos com parte do gene gB de CMV. A sensibilidade do teste foi de 867 plamídios/µg DNA. Cargas de CMV entre 2.118 e 72.443 copias/µg DNA foram observadas em 12,1% dos TMO entre 1,246 e 58,613 cópias/µg DNA foram observadas em 22,9% dos TR. Futuros estudos, com maiores casuísticas são necessários para confirmar a utilidade desta PCR semiquantitativa para CMV em pacientes transplantados.