Detección de Clorpirifos en Leche usando un Biosensor Enzimático Amperométrico basado en Acetilcolinesterasa

Resumen Este trabajo explora el uso de un biosensor enzimático amperométrico, como una herramienta de análisis capaz de determinar la concentración de clorpirifos en leche cruda de vaca, comparado en paralelo con los resultados obtenidos con la técnica de cromatografía de gases. Se utilizó como elemento biológico la enzima acetilcolinesterasa, la cual fue inmovilizada sobre electrodos de diferente material de tipo pantalla impresa (screen printed) mediante el método de union cruzada (cross linking). Se determinó las constantes cinéticas de la enzima tanto libre como inmovilizada. Se realizó la validación de la técnica para la cuantificación de clorpirifos mediante cromatografía de gases, varios parámetros de optimización fueron valorados para el uso del biosensor y se realizó la validación de este como herramienta para detectar clorpirifos en leche. Este trabajo concluye que el biosensor amperométrico es una herramienta útil para la determinación cualitativa de clorpirifos en leche en tiempo real. Abstract This work explores the use of an enzymatic amperometric biosensor, as an analysis method capable of determining the concentration of chlorpyrifos in raw cow's milk, compared in simultaneous runs with the results obtained with the gas chromatography technique. The enzyme acetylcholinesterase was used as a biological element, which was immobilized on electrodes of different material of the screen-printed type by the cross- linking method. The kinetic constants of the enzyme, free and immobilized, were determined. Validation of the technique for the quantification of chlorpyrifos by gas chromatography was performed, several optimization parameters were evaluated for the use of the biosensor and the validation of this as a tool to detect chlorpyrifos in milk was done. This paper concludes that the amperometric biosensor is a useful tool for the qualitative determination of chlorpyrifos in milk in real time.