Construcción de vectores para la expresión de antígenos de Avibacterium paragallinarum

"Este proyecto cuyo objetivo fue la elaboración de construcciones plasmídicas para expresar heterólogamente algunos polipéptidos de Avpg con potencial antigénico para suplementar a futuras vacunas. Para esto se diseñaron oligonucléotidos que se usaron como iniciadores para amplificar por PCR, diferentes fragmentos de los genes que codifican las proteínas Hemaglutinina, Rtx y OmpA. Los amplificados fueron clonados en el vector pBluescriptII KS (-) y posteriormente subclonados en el vector de expresión pQE30. Los experimentos de expresión se hicieron en E. coli M15, o BL21 pLysS, por inducción con diferentes concentraciones de IPTG, sin observar expresión de nuevas proteínas en SDS-PAGE. El estudio por secuenciación de las construcciones plasmídicas mostró una mutación por deleción en la región (-10) del promotor que dirigiría la expresión en el vector pQE30, para las construcciones de la región uno de hemaglutinina y la región uno de OmpA. Esta mutación también se encontró en pQE31 y pQE32 con la región dos de OmpA (OmpA2)."