Caracterización y viabilidad de la fracción vascular estromal de la bola de grasa de Bichat asociada a plasma pobre en plaquetas - una opción para tratamientos estéticos

Bichectomy is a procedure that consists of removing the anterior portion of the Bichat adipose body (apBAB). The cell group obtained after processing through enzymatic digestion of this tissue is called the stromal vascular fraction (SVF). The nature of the cells that make up the SVF qualifies this product for a wide range of clinical applications, especially in procedures to stimulate renewal and repair, including the aesthetic purposes of rejuvenation in the face. However, the use of this living biological material is directly related to the proper handling and transport, from its collection, processing and return for clinical application. This study aimed to characterize the SVF obtained from apBAB, and also to verify whether autologous platelet-poor plasma (PPP) is efficient in maintaining cell viability, and can be a means of transport to its mediated clinical application. Three patients with indication for having a bichectomy participated in the study. Before removing the apBAB, venous blood collection was performed to obtain the PPP. The bilateral apBAB collected was sent to the Cell Processing Center Curityba Biotech and submitted to the protocol for separation of cells from its matrix. In the end, the SVF was divided into aliquots that were packed in syringes and in culture plates and evaluated for cell viability at times 0, 24 and 48 h. Cell viability and the characterization of cells present in SVF were evaluated by means of immunophenotyping by flow cytometry and by light microscopy. A sample was kept in a culture bottle until it reached 7x106 cells to prove the presence of mesenchymal stem cells capable of remaining in standard culture. The viability presented in the PPP medium remained constant and with a viability of 70% in up to 48 h. In addition, the sample analyzed by immunophenotyping confirmed the existence of: mesenchymal and hematopoietic stem cells, endothelial cells and T cells. La bichectomía es un procedimiento que consiste en extirpar la porción anterior del cuerpo adiposo de Bichat (paCAB). El grupo celular obtenido tras el procesamiento mediante digestión enzimática de este tejido se denomina fracción vascular estromal (FVE). La naturaleza de las células que componen la FVE califica este producto para una amplia gama de aplicaciones clínicas, especialmente en procedimientos para estimular la renovación y reparación, incluidos los fines estéticos de rejuvenecimiento del rostro. Sin embargo, el uso de este material biológico vivo está directamente relacionado con el correcto manejo y transporte, desde su recolección, procesamiento y retorno para su aplicación clínica. Este estudio tuvo como objetivo caracterizar el FVE obtenido de paCAB, y también verificar si el plasma autólogo pobre en plaquetas (PPP) es eficiente para mantener la viabilidad celular, y puede ser un medio de transporte para su aplicación clínica mediada. Participaron en el estudio tres pacientes con indicación de bichectomía. Antes de retirar el paCAB, se realizó una extracción de sangre venosa para obtener el PPP. El paCAB bilateral recolectado fue enviado al Centro de Procesamiento Celular Curityba Biotech y sometido al protocolo de separación de células de su matriz. Al final, la FEVI se dividió en alícuotas que se empaquetaron en jeringas y en placas de cultivo y se evaluó la viabilidad celular en los tiempos 0, 24 y 48 h. La viabilidad celular y la caracterización de las células presentes en la FEV se evaluaron mediante inmunofenotipificación por citometría de flujo y microscopía óptica. Se mantuvo una muestra en una botella de cultivo hasta que alcanzó 7x106 células para demostrar la presencia de células madre mesenquimales capaces de permanecer en cultivo estándar. La viabilidad presentada en el medio PPP se mantuvo constante y con una viabilidad del 70% hasta en 48 h. Además, la muestra analizada por inmunofenotipificación confirmó la existencia de: células madre mesenquimales y hematopoyéticas, células endoteliales y células T. A bichectomia é um procedimento que se constitui na remoção da porção anterior do corpo adiposo de Bichat (paCAB). O extrato celular obtido após o processamento por meio de digestão enzimática desse tecido é chamado de fração vascular estromal (FVE). A natureza das células que compõem a FVE qualifica esse produto para uma ampla gama de aplicações clínicas, especialmente em procedimentos de estímulo à renovação e à reparação tecidual, incluindo-se os fins estéticos de rejuvenescimento em face. Entretanto, o aproveitamento desse material biológico vivo está diretamente relacionado ao seu adequado manejo e transporte, desde sua coleta, processamento e envio para aplicação clínica. Este trabalho teve como objetivo caracterizar a FVE obtida a partir da paCAB, e também verificar se o plasma pobre em plaqueta (PPP) autólogo é eficiente na manutenção da viabilidade celular, podendo ser uma opção de meio para transporte até sua aplicação clínica mediata. Três pacientes com indicação da realização de bichectomia participaram da pesquisa. Antes da remoção da paCAB foi realizada a coleta sanguínea venosa para a obtenção do PPP. A paCAB bilateral coletada foi enviada para o Centro de Processamento Celular Curityba Biotech e submetida ao protocolo para desagregar as células da matriz extracelular. Ao final, a FVE foi fracionada em alíquotas que foram acondicionadas em seringas e em placas de cultivo, e impostas a ensaios para se avaliar a viabilidade celular nos tempos 0, 24 e 48 h. A viabilidade celular e a caracterização das células presentes na FVE foram avaliadas por microscopia de luz e imunofenotipagem por citometria de fluxo. Uma amostra foi mantida em garrafa de cultivo até atingir 7x106 células. Após, foram impostas a comprovação da presença de células-tronco mesenquimais (CTM) capazes de se manter em cultivo padrão. A amostra analisada por imunofenotipagem confirmou a existência das seguintes células: células-tronco mesenquimais e hematopoiéticas, células endoteliais e células T.