Evaluation of different IL-17-secreting T lymphocyte and regulatory T cell subsets in chronically-HCV infected patients

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-07T15:13:30Z No. of bitstreams: 1 Fabio Christiane de Oliveira Felix Cachem Tese completa.pdf: 2599294 bytes, checksum: cdc214924856bae820d1cd395b8d7711 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-07T15:13:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabio Christiane de Oliveira Felix Cachem Tese completa.pdf: 2599294 bytes, checksum: cdc214924856bae820d1cd395b8d7711 (MD5) Previous issue date: 2018-05-24 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Chronic hepatitis C (CHC) is often associated with liver fibrosis, which can lead to cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Many studies have suggested that immunological activity in response to HCV antigens is strongly related to liver fibrosis. The role of different IL-17 secreting CD4+ (Th17) and CD8+ (Tc17) T cells in CHCis not fully understood. In our study, elevated plasma levels of IL-1β, IL-6 and IL-17 were positively correlated with fibrosis and alanine transaminase (ALT) rates in patients with CHC. In addition, these cytokines, secreted by peripheral blood mononuclear cell (PBMC) cultures in response to core antigen from virus, were also correlated to advanced liver injury. While the percentage of IL-17 producing Th17/Tc17 cells in association with IFN-γ or IL-21 was higher in patients with lower liver damage, accumulation of single IL-17-producing T lymphocytes was correlated with liver fibrosis. Interestingly, core protein favored the expansion of Th17/Tc17 cell subtypes related to disease progression, identified by production of IL-17 alone or IL-17 in association with IL-6. Further, although the percentage of Tregs FoxP3+CD25+CD4+) was higher in CHC patients with more advanced disease, the proportions of both TregsCD39+or Treg17 (IL-17+ IL-10 +) subsets were significantly lower in these individuals. Addition of HCV core protein to the PBMC cultures elevated the percentage of CD39-Tregs cells. In addition, the percentage of exhausted (PD-1+ CD28+) and senescent (CD28-CD57+) T cells were not only higher in patients with advanced hepatic fibrosis, but also their proportion were elevated by core antigen. Finally, we believe that the presence of a persistent and pro-fibrotic inflammatory state is facilitated by an elevated bacterial translocation, since, in the present study, plasma levels of sCD14 were not only higher in patients with worse prognosis, but their concentrations were directly correlated with the systemic levels of IL-1β, IL-6 and IL-17, as well as the percentage of Th17 / Tc17 cells negatives for IL-21 and IFN-γ. In summary, although preliminary, our results suggest that the expansion of different Th17 / Tc17 and Tregs cell subsets may influence the evolution of liver disease in patients with CHC, and reveals that the core antigen may exert adverse effects by amplifying the imbalance among these different subtypes of these T cells. In addition, inflammatory events favoring the expansion of different Th17/Tc17 cells implicated in hepatic fibrosis may be favored by greater intestinal microbial translocation. A hepatite C crônica (HCC) é frequentemente associada à fibrose hepática, o que pode levar a cirrose e ao carcinoma hepatocelular. Muitos estudos têm sugerido que a atividade imunológica em resposta aos antígenos do HCV está fortemente relacionada à fibrose hepática. O papel de diferentes células T CD4+ (Th17) e CD8+ (Tc17) secretoras da IL-17 na HCC não está completamente esclarecido. Em nosso estudo, níveis plasmáticos elevados de IL-1β, IL-6 e IL-17 foram positivamente correlacionados com a fibrose e também com as taxas de alanina transaminase (ALT) nos pacientes com HCC. Além disso, essas citocinas, secretadas por culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) em resposta ao antígeno core viral, também foram correlacionadas à lesão hepática avançada. Enquanto a percentagem de células Th17/Tc17 produtoras de IL-17 em associação com o IFN-γ ou com IL-21 foi maior nos pacientes com menor dano hepático, acúmulo desses linfócitos capazes de produzir apenas IL-17 foi correlacionada à fibrose do fígado. De forma interessante, a proteína core favoreceu a expansão de subtipos de células Th17/Tc17 relacionadas ao avanço da doença, identificadas pela produção apenas de IL-17 ou IL-17 em associação com IL-6. Ademais, apesar do percentual das células Tregs (CD4+FoxP3+CD25+) ter sido maior nos pacientes HCC mais avançada, as proporções tanto dos subtipos TregsCD39+ou Treg17 (IL-17+IL-10+) foram significativamente inferiores nesses indivíduos. A adição da proteína core do HCV às culturas de PBMC elevou a percentagem das células Tregs CD39-. Ademais, uma maior percentagem de células T exauridas (PD-1+CD28+) e senescentes (CD28- CD57+) não apenas foram maiores nos pacientes com fibrose hepática acentuada, como também a proporção desses linfócitos foram elevados após adição do antígeno core. Finalmente, acreditamos que a presença de um estado inflamatório persistente e pró-fibrótico é facilitado pela maior translocação bacteriana, desde que, nos presentes estudos, os níveis plasmáticos de sCD14 não apenas foram maiores nos pacientes com pior prognóstico, como também suas concentrações foram diretamente correlacionadas aos níveis sistêmicos de IL-1β, IL-6 e IL-17, assim como ao percentual de células Th17/Tc17 negativas para IL-21 e IFN-γ. Em resumo, apesar de preliminares, nossos resultados sugerem que a expansão de diferentes subtipos de células Th17/Tc17 e de Tregs pode influenciar a evolução da doença hepática nos pacientes com HCC, e revela que o antígeno core pode exercer efeitos adversos por amplificar o desequilíbrio entre esses diferentes subtipos de células T. Ademais, eventos inflamatórios que favorecem a expansão de subtipos de células Th17/Tc17 implicados na fibrose hepática podem ser favorecidos pela maior translocação microbiana intestinal.