FTIR-spektroskopische Untersuchungen zum Ras GTPase Mechanismus

Ras-Proteine sind kleine intrazelluläre Regulatorproteine, die zur Superfamilie der kleinen GTPasen gehören. Das primäre Ziel dieser Arbeit war es, die Hydrolysemechanismen von verschiedenen Ras-Isoformen und -Mutanten mit ATR-FTIR-Spektroskopie und zeitaufgelöster Transmissions-FTIR-Spektroskopie aufzuklären. Die onkogenen Ras-Mutanten G12V, G13V und Q61A, sowie die Off-Mutante Y32A und der Komplex aus K16A mit dem GEF SOS wurden in dieser Arbeit untersucht. Für G12V und G13V wurden Veränderungen der Phosphatschwingungen und eventuell am Magnesiumion beobachtet. Des Weiteren wurden Messungen mit Aluminiumfluorid an Ras durchgeführt, um das Analogon des Übergangszustandes beobachten zu können, wobei Spektren für Ras mit und ohne RasGAP gewonnen wurden. Für die Isoform KRas 4B wurden der Hydrolysemechanismus und das Verhalten auf einer negativ geladenen Lipidmembran beobachtet. Der Hydrolysemechanismus von immobilisierten NRas-Proteinen auf einer Lipidmembran wurde ebenfalls untersucht.