Cryoconservation d'embryons somatiques et zygotiques de caféier (Coffea arabica, C. canephora et arabusta)

On recherche la possibilité de conserver des embryons zygotiques et clonaux (somatiques) dans de l'azote liquide ("LN"; à -196¼c). Tout d'abord, plusieurs prétraitements destinés à éviter les dégâts dûs au froid ont été essayés à la fois sur les embryons somatiques et zygotiques de C. arabica var. catimor et C. canephora var. Robusta. Ces génotypes ont été choisis pour leur bonne capacité embryogène. Les cultures sont initiées en plaçant des sections foliaires de 1.5 cm2 sur un milieu d'induction. Les embryons somatiques apparaissent après 10 semaines. Trois protocoles de cryoconservation ont été essayés. Les traitements ont consisté en, d'une part, une congélation rapide par immersion directe dans LN, ou, d'autre part en une congélation lente à des rythmes de 0.5, 0.8 ou 1¼c/mn jusqu'à -40¼c avant immersion dans LN. Les échantillons ont été soit décongelés lentement pendant 30mn, soit rapidement par trempage dans un bain-marie à 40¼c. Les embryons ont survécu à la congélation, mais n'ont pas germé directement. Au contraire, ils produisent des cals embryogènes, puis des embryons somatiques. Les embryons de Robusta ont montré le meilleur pourcentage de survie (71 %)