Lack of influence of estrogen on myosin phosphorylation and post-tetanic potentiation in muscles from young adult C57BL mice

Estrogen influences myosin phosphorylation and post-tetanic potentiation in murine fast muscle. We tested the hypothesis that this influence is mediated by estrogen effects on skeletal myosin light chain kinase (skMLCK) activity. To this end, extensor digitorum longus muscles from female wildtype and skMLCK-absent ([skMLCK.sup.-/-]) mice were grouped as follows: ovariectomized with estrogen (E+), ovariectomized without estrogen (E-), sham surgery, and intact baseline. At 8 weeks of age, the ovariectomized groups were ovariectomized followed by implantation of either a 0.1 mg 17[beta]-estradiol (E+) or placebo pellet (E-). Two weeks later, muscles were isolated and suspended in vitro (25[degrees]C) for determination of regulatory light chain phosphorylation and post-tetanic potentiation. Regulatory light chain phosphorylation was not different across conditions within either genotype although wildtype values were significantly greater than [skMLCK.sup.-/-] values. Consistent with this, the potentiation of concentric twitch force was similar between E+ and E- groups within each genotype but wildtype values were greater than [skMLCK.sup.-/-] values. However, unaltered estradiol levels following ovariectomy, likely due to previously underappreciated confounds of mouse age, development, and growth during estrogen supplementation, prevented direct testing of the hypothesis. Future studies should note the importance of estrous cycles and continuing physiological developments of young adult mice when working with ovarian hormones. Key words: estrogen, myosin phosphorylation, potentiation, murine, fast twitch. Les restrogenes influencent la phosphorylation et la potentialisation post-tetanique de la myosine dans le muscle rapide de souris. Nous avons tente de verifier l'hypothese selon laquelle cette influence est mediee par les effets des restrogenes sur l'activite de la kinase des chaines legeres de la myosine squelettique (skMLCK pour <>). A cette fin, nous avons reuni des muscles extenseurs communs des orteils de souris femelles de type sauvage et avec absence de skMLCK ([skMLCK.sup.-/-]) dans les groupes suivants: ovariectomie avec restrogenes (E+), ovariectomie sans restrogenes (E-), intervention chirurgicale factice et intact au debut de l'etude. Les souris des groupes avec ovariectomie subissaient une ovariectomie a l'age de 8 semaines, suivie de l'implantation d'une pastille de 0,1 mg de 17[beta]-estradiol (E+) ou de placebo (E-). Deux semaines plus tard, les muscles etaient isoles et suspendus in vitro (25[degrees]C) afin d'etablir la phosphorylation de la chaine legere regulatrice et de la potentialisation post-tetanique. La phosphorylation de la chaine legere regulatrice n'etait pas differente d'un groupe a l'autre pour un meme genotype, mais les valeurs etaient nettement plus elevees pour le type sauvage que chez les [skMLCK.sup.-/-]. En accord avec cela, la potentialisation de la force de contraction concentrique etait semblable dans les groupes E+ et E- pour un meme genotype, mais les valeurs etaient plus elevees pour le type sauvage que chez les [skMLCK.sup.-/-]. Cependant, nous n'avons pas pu verifier l'hypothese directement en raison de l'absence de diminution des taux d'restradiol apres ovariectomie, probablement en raison de facteurs confondants sous-evalues quant a l'age, ainsi qu'au developpement et a la croissance des souris pendant la supplementation en restrogenes. Des etudes futures devraient remarquer l'importance du developpement en continu des cycles restraux et de la physiologie des jeunes souris adultes lors d'etudes portant sur les hormones ovariennes. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: restrogenes, phosphorylation de la myosine, potentialisation, murin, contraction rapide.
Introduction A muscle contraction is triggered by an influx of intracellular calcium ([Ca.sup.2+]) from the sarcoplasmic reticulum into the sarcoplasm (Ebashi and Endo 1968). In addition to activating the thin [...]