The mitogenome of a Malagasy butterfly Malaza fastuosus (Mabille, 1884) recovered from the holotype collected over 140 years ago adds support for a new subfamily of Hesperiidae (Lepidoptera)

Malaza fastuosus is a lavishly patterned skipper butterfly from a genus that has three described species, all endemic to the mainland of Madagascar. To our knowledge, M. fastuosus has not been collected for nearly 50 years. To evaluate the power of our techniques to recover DNA, we used a single foreleg of an at least 140-year-old holotype specimen from the collection of the Natural History Museum London with no destruction of external morphology to extract DNA and assemble a complete mitogenome from next generation sequencing reads. The resulting 15 540 bp mitogenome contains 13 protein-coding genes, 22 transfer RNA genes, two ribosomal RNA genes, and an A+T rich region, similarly to other Lepidoptera mitogenomes. Here we provide the first mitogenome also for Trapezitinae (Rachelia extrusus). Phylogenetic analysis of available skipper mitogenomes places Malaza outside of Trapezitinae and Barcinae + Hesperiinae, with a possible sister relationship to Heteropterinae. Of these, at least Heteropterinae, Trapezitinae, and almost all Hesperiinae have monocot-feeding caterpillars. Malaza appears to be an evolutionarily highly distinct ancient lineage, morphologically with several unusual hesperiid features. The monotypic subfamily Malazinae Lees & Grishin subfam. nov. (type genus Malaza) is proposed to reflect this morphological and molecular evidence. Key words: next-generation sequencing, phylogeny, Madagascar, ancient DNA, Paul Mabille. Resume : Le Malaza fastuosus est une espece de papillon aux motifs tres colores qui appartient a un genre qui compte trois especes decrites, toutes indigenes de Madagascar. Au meilleur de la connaissance des auteurs, aucun specimen du M. fastuosus n'a ete collecte depuis pres de 50 ans. Pour evaluer la puissance des techniques d'extraction d'ADN, les auteurs ont employe une seule patte avant sur un specimen holotype vieux d'au moins 140 ans, conserve au sein de la collection du Natural History Museum London et qui ne presentait aucun signe morphologique de dommage exterieur, pour extraire de l'ADN et assembler un mitogenome complet a l'aide de sequencage de seconde generation. Le mitogenome obtenu compte 15 540 pb et contient 13 genes codant pour des proteines, 22 genes d'ARN de transfert, deux genes codant pour des ARN ribosomiques et une region riche enA+T, tout comme les autres mitogenomes de lepidopteres. Les auteurs rapportent egalement le premier mitogenome au sein des Trapezitinae (Rachelia extrusus). Une analyse phylogenetique parmi les autres mitogenomes d'hesperides place le genre Malaza a l'exterieur des Trapezitinae et Barcinae + Hesperiinae, mais avec une possible relation proche avec les Heteropterinae. Parmi celles-ci, les Heteropterinae, les Trapezitinae et presque tous les Hesperiinae presentent des chenilles qui se nourrissent de monocotyledones. Le genre Malaza semble former un groupe distinct et ancien sur le plan evolutif, mais qui presente plusieurs caracteristiques morphologiques inhabituelles presentes chez les Hesperiidae. Une sous-famille monotypique, Malazinae Lees & Grishin (genre type Malaza) est propose pour refleter les evidences morphologiques et moleculaires. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : sequencage de seconde generation, phylogenie, Madagascar, ADN ancient, Paul Mabille.
Introduction Its name translated from Malagasy as 'famous', Malaza Mabille, 1904 is probably the most unusual skipper genus from Madagascar. Three Malagasy endemic species of Malaza have been described (Lees [...]