Purification and electrophoretic characterization of growth hormone binding protein (GHBP) in human, cancer and pregnancy sera: evidence of the presence of prolactin bíncling protein (PRLBP)

Control of cytokine activity is provided in certain cases by the generation of soluble forms of the receptor, which mainly function as binding proteins, although some other agonistic properties have been described. The objective of the present study was to identify the growth hormone binding protein (GHBP) and the prolactin binding protein (PRLBP) in human serum. GHBP was partially purified by a new method using Sepharose-immobilized hGH and separated and detected by electrophoresis and immunotransference (Western blot) using an antibody against the GH receptor. We found that human serum GHBP is a complex mixture of proteins with molecular weights in the range of 27 to 62 kDa, structurally related to the receptor and whose origin is still unknown. Sera from breast cancer patients and pregnant subjects showed the same protein profile although the levels were lower than the normal ones. those in pregnant subjects being the lowest. A 150 kDa protein, which dissociates into two subunits of 50 and 30 kDa, was identified by an anti-PRL receptor antibody, consistent with previous reports. According to the molecular weight and the lack of hGH binding activity observed, it is likely that the protein is nota soluble form of the receptor but rnight be an anti-idiotipic antibody in human serum. No differences in the protein profile were observed in the three sera investigated. The results suggest the presence of a prolactin binding protein, related to the receptor and whose origin awaits further studies.
Una de las formas de regulación de la actividad de ciertas citocinas es la generación de formas solubles del receptor, las cuales actúan principalmente como proteínas de unión, aunque también se les han atribuido funciones de carácter agonista. El objetivo de este trabajo fue el de establecer la presencia de proteinas de unión a hormona de crecimiento (GHBP) y prolactina (PRLBP) en suero humano. La GHBP se purificó parcialmente mediante un nuevo método empleando hormona humana de crecimieiito (GH, growth hormone) humana inmovilizada sobre Sepharosa y su separación y detección se realizó por medio de electroforesis e inmunotransferencia (Western blot), utilizando un anticuerpo dirigido contra el receptor de GH. Los resultados mostraron que la GHBP de suero humano es una mezcla compleja de proteínas con pesos en el rango de 27 a 62 kDa, relacionadas estructuralmente con el receptor de GH y cuyo origen está por determinarse. El suero proveniente de pacientes con cáncer de seno en estados 3 y 4, así como el de embarazo, mostró el mismo perfil de proteínas aunque sus niveles fueron en todos los casos inferiores a la normalidad, siendo los más bajos los de embarazo. En cuanto a la PRLBP, mediante anticuerpos antirreceptor, se identificó una proteina sérica de 150 kDa disociable en dos subunidades de pesos 50 y 30 kDa, consistente con lo informado por otros autores. De acuerdo con el peso establecido y a su incapacidad para unir hGH, se concluyó que no es una forma soluble del receptor y se sugiere que puede ser un anticuerpo antiidiotípico presente en suero humano. No se encontraron diferencias en el perfil ni en el contenido de la PRLBP en los tres tipos de suero analizados. Los resultados obtenidos ponen en evidencia la existencia de una proteina de unión a prolactina relacionada con el receptor de PRL y cuyo origen en humanos está por establecerse.