Identification d’ul24.5, une nouvelle protéine du virus de l’herpès simplex de type-1 impliquée dans la neuropathogénèse

Le virus de l'herpès simplex (VHS-1) infecte les cellules épithéliales de la muqueuse où celui-ci se réplique. Le virus va ensuite infecter les terminaisons nerveuses et établir sa latence dans les ganglions nerveux sensitifs. Le gène ul24 est conservé dans toute la famille des Herpesviridae et la protéine pUL24 est importante pour une réplication virale efficace et pour la pathogenèse in vivo. Il y a plusieurs transcrits exprimés à partir du gène ul24. La présence d'un site d’initiation interne à l’ORF UL24 dans le cadre de lecture ouvert d’ul24 et d'un codon d’initiation à la traduction ATG plus en aval dans le même cadre de lecture ouvert nous a fait suspecter qu'une autre protéine pourrait être exprimée à partir du locus ul24. Pour tester notre hypothèse, nous avons construit un virus recombinant qui exprime une étiquette d'hémagglutine (HA) à l'extrémité C-terminale de pUL24. L'analyse de l’expression protéique par immunobuvardage de type western a révélé l'expression d'une protéine de 17 kDa qui n'est pas un produit de dégradation de pUL24 pleine longueur. Afin de caractériser le rôle de la protéine nouvellement découverte nommée pUL24.5, nous avons construit un virus mutant codant pour une substitution de la méthionine d'initiation prédite par une valine (M122V). Cette substitution a éliminé l'expression du polypeptide de 17 kDa. Le mutant négatif UL24.5 présentait le même phénotype de réplication in vitro que la souche sauvage parentale. En revanche, l'absence de pUL24.5 au cours de l'infection in vivo a induit la persistance de maladie périoculaire et une augmentation de l'incidence de sévères troubles neurologiques. L'alignement des séquences d'acides aminés des protéines orthologues de pUL24 à travers les herpèsvirus a révélé que le codon d'initiation de la traduction de pUL24.5 est conservée parmi la souche VHS-1 (répertoriées sur NCBI) et, est présente dans de nombreux herpesvirus. Enfin, nous avons utilisé un modèle de cellules épithéliales polarisées