Prečišćavanje i optimizovanje pululanaze iz soja Bacillus paralicheniformis 9945a u hidrolizi sirovog kukuruznog skroba

Hidroliza sirovog skroba predstavlja najveću prekretnicu u industriji prerade skroba zbog značajnog smanjenja energetskih troškova u odnosu na klasičnu enzimsku ili kiselu hidrolizu koja podrazumeva dugotrajnu želatinizaciju na visokim temperaturama. Mnogi organizmi su proizvođači enzima koji mogu hidrolizovati skrob ispod temeprature želatinizacije, ali su iz industrijske perspektive mikroorganizmi od najvećeg značaja zbog vremenske i cenovne efikasnosti proizvodnje. Enzimi koji mogu hidrolizovati sirovi skrob su takođe lukrativni jer omogućavaju upotrebu nekonvencionalnih izvora skroba za direktnu hidrolizu. Pululanaza je potencijalni okidač velikih promena trenutnih strategija za obradu skroba te postoji velika potražnja za ovim enzimom širom sveta sa širenjem njegove upotrebe u različitim industrijama u kojima se ova sirovina koristi. Divlji tipovi mikroba u normalnim uslovima ne proizvode dovoljno enzima kako bi zadovoljili zahteve biotehnoloških procesa, ali se problem rešava kloniranjem odgovarajućih gena i njihovom ekspresijom u domaćinu radi povećanja prinosa, odnosno ekonomičnosti procesa. Bakterijske ćelije Escherichia coli često se koriste kao ekspresioni sistem u laboratorijskoj i industrijskoj praksi zbog lakoće manipulisanja genomom i kulturama ove vrste, kao i zbog niske cene supstrata potrebnih za njihov rast, dok se Bacillus paralicheniformis 9445a, gram pozitivna, fakultativno anaerobna, štapićasta bakterija, pokazao kao dobar proizvođač pululanaze visoke aktivnosti i stabilnosti. Cilj ovog rada je optimizacija aktivnosti pululanaze iz ovog soja radi efikasnije hidrolize sirovog skroba.