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Das molekulare Chaperon Hsp90 ist in der Zelle an der Stabilisierung labiler Proteine sowie an der Reifung von Signaltransduktionskinasen und Transkriptionsfaktoren beteiligt. Dabei interagiert es mit mehreren Cochaperonen, um Substratproteine im Ablauf eines komplexen Zyklus geordnet zu ihrer Funktionsfähigkeit zu bringen. In der Bäckerhefe S. cerevisiae ist das Cns1 eines dieser Cochaperone. In dieser Arbeit wurde die Interaktion von Cns1 mit Ssa1 und Hsp90 charakterisiert. Cns1 bindet an Ssa1 und Hsp90 und stimuliert die ATPase von Ssa1. Die N-terminale Domäne von Cns1 ist sowohl für diese Funktion, als auch zur Erhaltung der Lebensfähigkeit der Hefe nötig. In einem zweiten Projekt wurde die Funktion des geladenen N-M Domänenlinkers von Hsp90 untersucht. Dieser kommt nur in eukaryotischen Hsp90 Proteinen vor. Seine Deletion ist letal und hat eine drastische Verringerung der Chaperonaktivität und der Regulierbarkeit von Hsp90 zur Folge., In the cell, the molecular chaperone Hsp90 governs the folding of unstable proteins, such as signal transduction kinases and transcription factors. To fulfill this task, it interacts with several cochaperones in a folding cycle. In baker’s yeast, Cns1 is one of these cochaperones. This work describes the interaction of Cns1 with Ssa1 and Hsp90. Cns1 stimulates the ATPase activity of Ssa1. The N-terminal domain of Cns1 is crucial for this effect and for the viability in yeast. In a second project, the charged N-M domain linker of Hsp90 is characterized. This linker can only be found in eucaryotic Hsp90. Its deletion is lethal and is accompanied with a drastically reduced chaperone activity and cochaperone-mediated regulability.

Das molekulare Chaperon Hsp90 ist in der Zelle an der Stabilisierung labiler Proteine sowie an der Reifung von Signaltransduktionskinasen und Transkriptionsfaktoren beteiligt. Dabei interagiert es mit mehreren Cochaperonen, um Substratproteine im Ablauf eines komplexen Zyklus geordnet zu ihrer Funktionsfähigkeit zu bringen. In der Bäckerhefe S. cerevisiae ist das Cns1 eines dieser Cochaperone. In dieser Arbeit wurde die Interaktion von Cns1 mit Ssa1 und Hsp90 charakterisiert. Cns1 bindet an Ssa1 und Hsp90 und stimuliert die ATPase von Ssa1. Die N-terminale Domäne von Cns1 ist sowohl für diese Funktion, als auch zur Erhaltung der Lebensfähigkeit der Hefe nötig. In einem zweiten Projekt wurde die Funktion des geladenen N-M Domänenlinkers von Hsp90 untersucht. Dieser kommt nur in eukaryotischen Hsp90 Proteinen vor. Seine Deletion ist letal und hat eine drastische Verringerung der Chaperonaktivität und der Regulierbarkeit von Hsp90 zur Folge., In the cell, the molecular chaperone Hsp90 governs the folding of unstable proteins, such as signal transduction kinases and transcription factors. To fulfill this task, it interacts with several cochaperones in a folding cycle. In baker’s yeast, Cns1 is one of these cochaperones. This work describes the interaction of Cns1 with Ssa1 and Hsp90. Cns1 stimulates the ATPase activity of Ssa1. The N-terminal domain of Cns1 is crucial for this effect and for the viability in yeast. In a second project, the charged N-M domain linker of Hsp90 is characterized. This linker can only be found in eucaryotic Hsp90. Its deletion is lethal and is accompanied with a drastically reduced chaperone activity and cochaperone-mediated regulability.

Both mammalian cells and yeast cells possess a chaperone network composed of Hsp70, Hsp90, Hop/Sti1, Hsp40 and p23/Sba1. During the multichaperone cycle, substrate proteins of Hsp90 must be transferred from Hsp70 to Hsp90 in order to mature and aquire their active form. Formation of a complex between Hsp70 and Hsp90 is facilitated by the adaptor protein Hop/Sti1. In the frame of this work, the adaptor protein Hop/Sti1 was characterized and important functional parts of the protein could be elucidated. in vivo assays in both the yeast S. cerevisiae and human HeLa cells revealed relevant segments of Hop/Sti1 for the activation of the human glucocorticoid receptor and v-Src kinase. Based on the aquired data, a new model is proposed for the function of Hop/Sti1 domains., Sowohl Säugetierzellen als auch Hefezellen besitzen ein Chaperonnetzwerk bestehend aus Hsp70, Hsp90, Hop/Sti1, Hsp40 und p23/Sba1. Subtstratproteine von Hsp90 müssen während des Multichaperonzyklus von Hsp70 auf Hsp90 übertragen werden um ihre gereifte und aktive Struktur zu erlangen. Die Komplexbildung von Hsp70 und Hsp90 wird durch das Adapterprotein Hop/Sti1 vereinfacht. Im Rahmen dieser Arbeit wurde das Adapterprotein Hop/Sti1 charakterisiert und bedeutende funktionelle Teile des Proteins wurden aufgeklärt. In vivo Untersuchungen sowohl in der Hefe S. cerevisiae als auch in humanen HeLa Zellen deckten Abschnitte von Hop/Sti1 auf, welche entscheidend sind für die Aktivierung des humanen Glukokortikoidrezeptors oder der v-Src Kinase. Basierend auf den erhaltenen Ergebnissen wird ein neues Modell für die Wirkung von Hop/Sti1 vorgeschlagen.