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As doenças causadas pelos nemátodes fitoparasitas permanecem uma considerável limitação á produção agrícola global. Um crescente número substâncias activas, utilizadas em formulações nematicidas comerciais, têm sido proibidas por políticas comuns de gestão de pragas, devido a preocupações ambientais e de saúde humana. Muitas vezes, os pesticidas de substituição demonstram uma menor eficiência no campo, o que se reflete num decréscimo do rendimento e da produtividade agrícola. O desenvolvimento de novos biopesticidas de alta eficiência para o combate de pragas e doenças das culturas é urgente e permitirá dar resposta adequada à crescente necessidade de produtos agrícolas, respeitando as novas políticas ambientais. As co-culturas planta-nemátode permitem uma despistagem simultânea da eficiência nematodicida de um composto e da sua influência nos tecidos vegetais do hospedeiro, num sistema facilmente acessível que simula a infecção natural. O laboratório de Nematologia do INIAV encontra-se a desenvolver estes sistemas e foram já obtidos resultados preliminares para as co-culturas de Solanum lycopersicum com o nemátode Meloidogyne ethiopica e S. tuberosum com Globodera pallida. Em ensaios futuros outros nemátodes fitoparasitas serão avaliados, como os nemátodes das lesões da raíz (Pratylenchus penetrans) em raízes transgénicas de batata e do nemátode da madeira do pinheiro (Bursaphelenchus xylophilus) em rebentos in vitro de pinheiro (Pinus sp.)., Revista de Ciências Agrárias, Vol. 45 N.º 4 (2022)

The diseases caused by plant parasitic nematodes are still a serious constraint to modern global crop production. An increasing number of active compounds in commercial nematicidal formulations is being banned from use by common policies of pest management. Farmer communities report a low efficiency for the replacement pesticides, which reflects on crop yield and productivity. Novel sustainable biopesticides are urgently needed to cope with global food demands while respecting the most recent environmental policies. Plant-nematode co-cultures offer a stable biotechnological screening tool able to assess the active compound’s nematicidal activity and its effect on host tissues, simultaneously, in an easily accessible system that simulates natural infection. These systems are being developed and optimized at the Nematology laboratory of INIAV. Preliminary results were obtained for co-cultures of Solanum lycopersicum with the nematode Meloidogyne ethiopica and S. tuberosum with Globodera pallida. Future studies will target other plant parasitic nematodes, e.g., the root lesion nematodes (Pratylenchus penetrans) in transgenic roots of potato and the pinewood nematode (Bursaphelenchus xylophilus) on in vitro pine shoots (Pinus sp.)., As doenças causadas pelos nemátodes fitoparasitas permanecem uma considerável limitação á produção agrícola global. Um crescente número substâncias activas, utilizadas em formulações nematicidas comerciais, têm sido proibidas por políticas comuns de gestão de pragas, devido a preocupações ambientais e de saúde humana. Muitas vezes, os pesticidas de substituição demonstram uma menor eficiência no campo, o que se reflete num decréscimo do rendimento e da produtividade agrícola. O desenvolvimento de novos biopesticidas de alta eficiência para o combate de pragas e doenças das culturas é urgente e permitirá dar resposta adequada à crescente necessidade de produtos agrícolas, respeitando as novas políticas ambientais. As co-culturas planta-nemátode permitem uma despistagem simultânea da eficiência nematodicida de um composto e da sua influência nos tecidos vegetais do hospedeiro, num sistema facilmente acessível que simula a infecção natural. O laboratório de Nematologia do INIAV encontra-se a desenvolver estes sistemas e foram já obtidos resultados preliminares para as co-culturas de Solanum lycopersicum com o nemátode Meloidogyne ethiopica e S. tuberosum com Globodera pallida. Em ensaios futuros outros nemátodes fitoparasitas serão avaliados, como os nemátodes das lesões da raíz (Pratylenchus penetrans) em raízes transgénicas de batata e do nemátode da madeira do pinheiro (Bursaphelenchus xylophilus) em rebentos in vitro de pinheiro (Pinus sp.).

Potato cyst nematodes (PCN), Globodera rostochiensis and G. pallida, are a serious threat to potato crops worldwide. Due to the risk these two species pose, a national survey was implemented starting in 2010 aiming to know the presence and distribution of these quarantine nematodes in Portugal. This fact has led to an increasing demand to accurately identify the PCN species present in the fields. Usually, the identification is based on morphology followed by molecular analysis. Considering there is at least one laboratory in the EU certified for morphological identification of PCN, the aim of this study was to look into the possibility of using only morphological diagnostic characters for routine purposes. Forty cysts of Globodera were used, for morphological and molecular analyses. Morphological analysis allowed the identification of 23 cysts as G. rostochiensis and 17 cysts as G. pallida and the molecular results revealed that 9 cysts were G. rostochiensis and 31 cysts were G. pallida. Thus, morphological and molecular analyses matched 65%, concluding that in our routine analyses only an initial morphological approach followed by molecular methods enables a reliable identification of PCN species. So, it is recommended to combine both methods. PCR can be ruled out only if the purpose is to detect Globodera nematodes, which is the case of the seed potato fields where the presence of round-cyst nematodes will interdict the seed production., Os nemátodes de quisto da batateira (NQB), Globodera rostochiensis e G. pallida, são uma ameaça para a cultura da batata a nível mundial. Devido ao risco que estas duas espécies representam, foi implementado um programa de prospeção nacional a partir de 2010 com o objectivo de detetar a presença e conhecer a distribuição destes nemátodes de quarentena em Portugal. Este facto intensificou a necessidade de determinar com precisão as espécies de NQB presentes nos campos de batata. Geralmente, esta identificação é baseada na avaliação das características morfológicas, confirmada de seguida pela análise molecular. Considerando que existe pelo menos um laboratório na União Europeia certificado para a identificação morfológica de NQB, o objetivo deste estudo foi investigar a possibilidade de identificar estas espécies apenas através das características morfológicas, em análises de rotina. Para as análises morfológicas e moleculares foram utilizados 40 quistos de Globodera sp.. A análise morfológica permitiu identificar 23 quistos como G. rostochiensis e 17 quistos como G. pallida, enquanto que os resultados moleculares para os mesmos quistos permitiram a identificação de 9 quistos como G. rostochiensis e 31 quistos como G. pallida. As análises morfológicas e moleculares apenas coincidiram em 65% dos casos. Concluiu-se que nas nossas análises de rotina apenas a utilização das duas abordagens permite a identificação precisa de espécies de NQB, sendo por isso recomendado combinar sempre os dois métodos. A análise molecular pode ser excluída somente se o objetivo visar a deteção de nemátodes do género Globodera, como é o caso dos campos de batata de semente, onde a presença de qualquer espécie destes nemátodes interditará a produção de semente.

Potato cyst nematodes are a threat to several agricultural crops around the world with some species considered quarantine pests and subjected to strict regulatory measures in many countries. Usually, cysts nematodes co-exist in the soil with other species of plant-parasitic nematodes, so, a time and cost-efficient extraction technique becomes of primary importance. The ideal extraction method should be able to obtain cysts as well as detecting the presence of other motile plant-parasitic nematodes with a potential impact on potato farming (such as Meloidogyne sp. and Pratylenchus sp.). In recent years, studies have been carried out to test the efficiency of various methods of nematode extraction but few results have been published. Therefore, to test if a method that extracts simultaneously cysts and motile nematodes can be used instead of the reference method that extracts cysts only, the efficiency of Cobb’s decanting and sieving technique was compared to Fenwick’s technique. As a result, in the 74 samples evaluated, a greater number of cysts were extracted from 24 samples using Fenwick’s method and from 11 samples employing Cobb’s decanting and sieving technique. The statistics results showed a significance level of 0,05 using Fenwick’s can allowing to conclude that this method is much more efficient than Cobb’s decanting and sieving technique, and confirming it should not be replaced by alternative methods for cysts extraction., Revista de Ciências Agrárias, vol. 41 n.º spe (2018)