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Introduction et but de l’étude Une exposition à la citrulline (CIT) pendant 24 h d’explants de tissu adipeux blanc intra-abdominal (WAT) issus de rats en surpoids par un régime hyperlipidique (HFD) provoque la libération des acides gras et stimule la bêta oxydation [1] . Des mécanismes de « brunisation » du WAT, augmentant la thermogenèse sans frisson et la dépense énergétique ont été décrits. Celle-ci implique l’induction de la protéine découplante (UCP1), longtemps considérée comme spécifique du tissu adipeux brun. Nous avons étudié l’effet potentiel de la CIT sur l’induction de l’UCP1 dans des explants de WAT rétropéritonéal (RET) et péri-épididymaire (EPI). Matériel et méthodes Les explants de WAT issus de rats Sprague-Dawley de quatre mois, ayant été maintenus pendant deux mois soit sous régime standard (CD, n = 7), soit HFD ( n = 7), ont été exposés à 2,5 mmoles/L de citrulline pendant 8 h ou 24 h. Les ARN totaux et les protéines ont été préparés. L’expression d’UCP1 et celle de son ARNm ont été étudiées par western blot et par RT-qPCR. Les niveaux d’expression des ARNm des deux principaux régulateurs de l’expression du gène UCP1 , le récepteur activé par les proliférateurs de péroxysomes alpha (PPARα) et le PPARγ-coactivateur-1-α (PGC-1α), ont aussi été analysés par RT-qPCR. Résultats et analyse statistique Dans les explants des tissus RET et EPI de rats HFD, l’expression de l’ARNm UCP1 et celle de sa protéine sont diminuées respectivement de 45–55 % et de 40–50 % ( p < 0,01) par rapport à celle des explants CD [2] . À la suite de l’exposition des explants des deux tissus à la CIT pendant 24 h, l’expression de l’ARNm UCP1 et celle de la protéine UCP1 sont augmentées respectivement de 3,5–6 fois ( p < 0,01) et de 1,5–2 fois ( p < 0,05), quel que soit le régime initial [2] . L’expression des ARNm PPARα et PGC-1α est aussi induite par la CIT dans les explants des deux tissus respectivement de 3,2–6 fois et 2,2–5,5 fois ( p < 0,01), quel que soit le régime initial. Conclusion La CIT induit très rapidement l’expression d’UCP1 et de deux des principaux régulateurs de l’expression de son gène, dans des explants de WAT. La stimulation de l’expression d’UCP1 sous l’effet de CIT, conduirait à la « brunisation » du WAT comme médiatrice de dépense énergétique permettant de lutter contre le surpoids induit par un régime riche en lipides. Ces résultats identifient un nouveau mécanisme d’action bénéfique de la CIT sur la santé. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Introduction et but de l’étude Les amines aromatiques (AA) sont une classe importante de cancérigènes, caractérisées comme contaminants alimentaires. Ils sont notamment produits involontairement au cours de combustions (cuissons…) en parallèle d’autres composés toxiques comme le benzo(a)pyrène (BaP). Leurs effets biologiques (cancérogenèse) dépendent de leur transformation en métabolites réactifs. Ils peuvent toutefois être biotransformés en dérivés N-acétylés par les N-acétyl transférases. Ces derniers métabolites sont généralement considérés comme moins toxiques. Quelques études montrent que certaines AA semblent activer la voie du récepteur Ah (ou AhR, un récepteur de polluants et un activateur transcriptionnel d’enzymes du métabolisme des polluants, permettant l’élimination de ceux-ci). Le but de notre étude est de caractériser l’effet biologique de plusieurs AA et de leurs dérivés acétylés sur la voie du AhR, en conjugaison avec un ligand classique de ce récepteur, le BaP, un co-contaminant des AA. Matériel et méthodes Trois lignées cellulaires sont utilisées au cours de cette étude. La lignée d’hépatocarcinome humaine HepG2, la lignée HepG2 modifiée de manière stable (CYP1A1-XRE-Luc) exprimant une luciférase secrétée sous la dépendance d’un promoteur activé par le AhR et la lignée d’épithélium pulmonaire humaine NCI-H292. Trois couples d’amines sont utilisés : 2-Aminofluorène acétylé ou non (2-AF/2-AFA), 2-Naphtylamine acétylée ou non (2-NA/2-NAA) et 4-aminobiphenyl acétylé ou non (4-ABP/4-ABPA). L’ensemble des cellules ont été traitées à différents temps (0–48 h) et avec différentes doses d’AA (0–25 μ M) et/ou de BaP (5 μ M). Les paramètres suivants ont été mesurés : viabilité cellulaire (test WST-1), activité de la voie AhR (mesure de l’activité lucif érase de la lignée HepG2 CYP1A1-XRE-Luc), expression des gènes cibles du AhR (mesure de l’expression de l’ARN messager du CYP1A1), activité de l’enzyme CYP1A1 (mesure de l’activité EROD pour Ethoxyre-sorufin-O-Deethylase). Résultats et Analyse statistique Nous mettons en évidence une activation de la voie AhR par certaines AA mais de manière surprenante, une modulation de cette activation par la N-acétylation. En effet, alors que le couple 4-ABP/4-ABPA est inactif, le 2-NA et le 2-AFA sont des activateurs puissants de la voie alors que le 2-NAA et le 2-AF sont beaucoup moins actifs voire inactifs. En présence du BaP, la voie AhR est activée; les co-traitements avec les AA et leurs métabolites, conduisent à des synergies ou des antagonismes, également en fonction du statut d’acétylation de l’AA 1 . Conclusion Nos travaux montrent pour la première fois que la métabolisation des AA conduit à la production ou à l’inactivation de ligands du AhR. L’activation de la voie AhR conduit à l’expression de nombreuses enzymes du métabolisme des xénobiotiques (dont le CYP1A1) qui impactent le métabolisme des AA, conduisant dans certains cas à la production de dérivés plus mutagènes (AA O-acé-tylés). Nos travaux ont donc un intérêt en santé publique à la fois par l’identification de nouveaux ligands du AhR et par la perspective de travaux permettant de mieux comprendre en cancérogenèse, l’effet des AA et des cocktails les contenant (par exemple avec le BaP également m&#2 [ABSTRACT FROM AUTHOR]