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Tese de Doutoramento em Ciências (Área do Conhecimento em Biologia), Plantas do gênero Hyptis distribuídas por regiões tropicais e subtropicais apresentam grande utilização na medicina tradicional para tratamento de distúrbios gastrointestinais, infecções na pele, úlceras, inflamação, dores, câncer, problemas respiratórios, gripe, cãibras, malária, secreções nos brônquios, febre e infecções por microrganismos. Mesmo com toda a demanda para fins medicinais, faltam estudos que comprovem cientificamente seus benefícios à saúde humana. O objetivo desta Tese foi avaliar a atividade antimicrobiana, antioxidante, citotóxica, citoprotetora e anti-inflamatória in vitro de extratos de folhas de Hyptis marrubioides (Hm), Hyptis pectinata (Hp) e Hyptis suaveolens (Hs) oriundas do cerrado brasileiro, bem como determinar seu perfil fitoquímico. Além disso, culturas de células em suspensão (CCS) destas espécies foram estabelecidas, eliciadas com estressores bióticos e abióticos e avaliadas quanto à produção de ácido rosmarínico (AR). A presença de ácidos fenólicos nos extratos foi confirmada por HPLC-DAD, bem como a presença de flavonóis e flavonas. CCS de Hs eliciadas com MeJ e de Hm eliciadas com MeJ e AS demostraram um significativo aumento de AR quando comparadas ao controle. Nos ensaios antioxidantes os extratos atingiram EC50 a diferentes concentrações e, portanto, apresentaram potencial antioxidante para as diferentes metodologias utilizadas. Nos ensaios antimicrobianos, verificou-se atividade antibiótica frente as cepas S. aureus (ATCC® 25923TM), S. aureus (ATCC® 29213TM), E. coli (ATCC® 10536TM), S. Cholerasuis (ATCC® 10708TM), P. aeruginosa (ATCC® 9027TM) e P. aeruginosa (ATCC® 27853TM) o que corrobora a utilização destas plantas na medicina tradicional. Os extratos também, indicaram efeitos não citotóxicos e ação antioxidante ao protegerem as células HepG2 de danos induzidos por insultos oxidativos, em condições de co-tratamento e pré-tratamento. Constatou-se que os extratos à concentração de 100μg/ml atuaram no controle da produção de EROs induzidos por t-BHP garantindo o efeito citoprotetor. Os extratos de Hp e Hs promoveram a inibição da produção de NO em células BV2 sem prejuízo da viabilidade demostrando uma possível ação anti-inflamatória. As informações contidas neste trabalho proporcionam auxílio para futuros estudos que busquem compreender a relação entre os metabólitos secundários presentes nos extratos e os mecanismos implícitos a suas potencialidades antioxidante, anti-inflamatória e citoprotetora., Hyptis plants distributed in tropical and subtropical regions are widely used in traditional medicine to treat gastrointestinal disorders, skin infections, ulcers, inflammation, pain, cancer, respiratory problems, influenza, cramps, malaria, bronchial secretions, fever and infections by microorganisms. Even with all the demand for medicinal purposes, studies that scientifically prove its benefits to human health are lacking. The aim of this thesis was to evaluate the in vitro antimicrobial, antioxidant, cytotoxic, cytoprotective and anti-inflammatory activity of extracts of Hyptis marrubioides (Hm), Hyptis pectinata (Hp) and Hyptis suaveolens (Hs) from the Brazilian Cerrado as well as to determine your phytochemical profile. In addition, suspension cell cultures (SCC) of these species were established, elicited with biotic and abiotic stressors and evaluated for rosmarinic acid (AR) production. The presence of phenolic acids in extracts was confirmed by HPLC-DAD, as well as the presence of flavonols and flavones. SCC of Hs elicited with MeJ and of the Hm elicited with MeJ and AS showed a significant increase in AR when compared to the control. In the antioxidant assays the extracts reached EC50 at different concentrations and, therefore, presented antioxidant potential for the different methodologies used. In the antimicrobial assays, antibiotic activity was verified against S. aureus (ATCC® 25923TM), S. aureus (ATCC® 29213TM), E. coli (ATCC® 10536TM) strains. , S. Cholerasuis (ATCC® 10708TM), P. aeruginosa (ATCC® 9027TM) and P. aeruginosa (ATCC® 27853TM) which corroborates the use of these plants in traditional medicine. The extracts also indicated non-cytotoxic effects and antioxidant action while protecting HepG2 cells from damage induced by oxidative insults under cotreatment and pretreatment conditions. It was found that extracts at 100μg / ml concentration controlled the production of t-BHP-induced ROS guaranteeing the cytoprotective effect. The extracts of Hp and Hs promoted the inhibition of NO production in BV2 cells without impairing viability showing a possible antiinflammatory action. The information contained in this work provides help for future studies that seek to understand the relationship between the secondary metabolites present in the extracts and the mechanisms implicit to their antioxidant, anti-inflammatory and cytoprotective potentialities.

Dissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em Plantas, O mercado de cosméticos é sem dúvida um mercado em ascensão e muito lucrativo. Os consumidores estão cada vez mais exigentes e as indústrias de cosméticos investem cada vez mais no desenvolvimento de novos produtos. Os cosméticos produzidos com extratos de plantas estão se destacando por representarem produtos naturais, sustentáveis, puros, saudáveis, seguros e eficientes. O Diospyros kaki, uma planta rica em compostos fitoquímicos, tem sido descrito por ter um efeito benéfico sobre a pele, nomeadamente por apresentar atividades antioxidante, anti-inflamatória, antialérgica, foto-protetora e antirrugas, além de clareamento, redução de eritema, prevenção de dermatites e redução de sebo. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo a produção de cremes utilizando subprodutos do Diospyros kaki, como extratos de folhas verdes, de folhas vermelhas e de resíduo alcoólico (biomassa da fermentação alcoólica da produção de vinagre de dióspiro). Diferentes extratos foram produzidos e analisados qualitativamente através da técnica de HPLC-DAD, onde foram identificados vários polifenóis como a quercetina, o kaempferol, catequinas, a procianidina, derivados do ácido clorogénico e derivados glicosilados da luteína, em consonância com o já referido na literatura. Realizaram-se ensaios bioquímicos conhecidos, como DPPH, ICA, radical superóxido e óxido nítrico para avaliação da atividade antioxidante in vitro dos extratos. Os extratos de folhas vermelhas e folhas verdes apresentaram atividade antioxidante significante nestes ensaios. Realizaram-se ainda ensaios de citotoxicidade e citoproteção contra insultos oxidativos recorrendo à avaliação da viabilidade celular (ensaio MTT), com as linhas celulares de fibroblastos L929 e queratinócitos HaCaT. Os ensaios de citoproteção indicaram que o três extratos possuem capacidade de proteger as células dos efeitos do insulto oxidativo, com efeitos citoprotetores mais potentes para os dois extratos de folhas. Adicionalmente foi efetuado o ensaio em fibroblastos L929 para avaliação quantitativa das espécies reativas de oxigénio (ERO) recorrendo ao marcador diclorofluoresceína diacetato (DCFDA). Verificou-se que os extratos de folhas verdes e de resíduo alcoólico reduziram significativamente o nível de ERO intracelular. Por fim, foram preparados cremes com extratos de folhas verdes (fvd) e de folhas vermelhas (fvm). Estes cremes foram avaliados em voluntários para observar os efeitos imediatos da sua aplicação tendo sido avaliados os seguintes parâmetros na pele: formação de eritema através do Mexameter, perda transepidérmica de água (TEWL) através do Tewameter e variação do conteúdo aquoso do estrato córneo através do Corneometer. Os cremes apresentaram bons resultados na pele, pois não indicaram a formação de eritema, melhoraram a hidratação da pele de seca para suficientemente hidratada e não apresentaram aumento na TEWL., Cosmetics is undoubtedly a growing and very profitable market. Consumers are increasingly demanding, and the cosmetics industries are investing more in new products development. Cosmetics with plant extracts are standing out for representing natural, sustainable, pure, healthy, safe and efficient products. Diospyros kaki, a rich in phytochemicals plant, has been described for with beneficial effects on the skin, namely with antioxidant, anti-inflammatory, anti-allergic, photo-protective and anti-wrinkle activities, in addition to whitening skin, erythema reduction, dermatitis prevention, and sebum reduction. In this context, this work aimed to produce creams using by-products of Diospyros kaki, such as extracts of green leaves, red leaves and alcoholic residue (from the fruit alcoholic fermentation in the persimmon vinegar production). Different extracts were produced. They analysed qualitatively using the HPLC-DAD. Several polyphenols, such as quercetin, kaempferol, catechins, procyanidin, chlorogenic acid derivatives, and lutein glycosylated derivatives, were identified in line with has been already mentioned in the literature. Recognized biochemical assays were carried out, such as DPPH, ICA, superoxide radical and nitric oxide, in order to evaluate the in vitro antioxidant activity of the extracts. Both extracts (of red leaves and green leaves) showed significant antioxidant activity in these assays. Cytotoxicity and cytoprotection assays against oxidative insults were also carried out using cell viability assessment (MTT assay), using L929 fibroblast and HaCaT keratinocyte cell lines. Cytoprotection tests indicated that the three extracts have the capacity to protect cells from the effects of the oxidative insult, with pronounced potent cytoprotective effects for the leaf extracts. In addition, the L929 fibroblasts assay was performed for the quantitative evaluation of reactive oxygen species (ROS) using the dichlorofluorescein diacetate marker. It was observed that either the green leaves or alcoholic residue extracts significantly reduced the intracellular ROS level. Finally, creams were prepared with both green and red leaves extracts. These creams were evaluated in volunteers to examine the immediate effects of their application. The following parameters on the skin having been evaluated: erythema formation (through Mexameter), transepidermal water loss - TEWL (through Tewameter) and the water content of the stratum corneum (through the Corneometer). The creams showed good results on the skin, as they did not lead to erythema formation; instead, they improved the hydration of dry skin to sufficiently hydrated and did not show an increase in TEWL.

Estragole is an aromatic organic compound belonging to the class of phenylpropanoids derived from cinnamic aldehydes present in essential oils of plant species such as Ravensara anisata (madeira), Ocimum basilicum (manjericão/alfavaca) and Croton zehntneri (canelinha). Pharmacological studies report its anti-inflammatory, antioxidant and vasorelaxant activity. This study aimed to evaluate acute non-clinical toxicity, gastroprotective activity and related mechanisms of action. The assay was considered significant when p

Úlceras gástricas afetam pessoas no mundo todo e a recorrência desta patologia tem levado à busca de agentes que promovam sua erradicação. Apesar da tão conhecida utilização da alantoína em produtos cosméticos, seu efeito ainda não foi estudado sobre a úlcera gástrica. Dessa forma, o presente trabalho objetivou explorar os mecanismos farmacológicos associados à eficácia da alantoína contra as injúrias teciduais causadas por diferentes agentes. A atividade gastroprotetora deste composto foi avaliada em diferentes modelos experimentais de úlceras gástricas induzidas por etanol, etanol acidificado e ligadura pilórica. Todos os protocolos experimentais foram aprovados pela CEUA/UFG, protocolo n 064/15. Para tanto, foram utilizados camundongos albinos Swiss fêmeas (30 – 35 g), mantidos à 23  2C e ciclo claro/escuro de 12 h, com acesso livre a água e ração. Os animais foram mantidos com restrição de alimentos sólidos 16 h antes das sessões experimentais, com acesso livre a água glicosada (5%). Os estômagos dos animais foram utilizados para quantificação dos níveis de glutationa reduzida (GSH), permeabilidade vascular gástrica, citocinas pró-inflamatórias (TNF- e IL-1), muco gástrico, PGE2, além da atividade da enzima mieloperoxidase (MPO). As lesões gástricas foram examinadas macroscopicamente, e procederam-se análises histopatológicas em microscopia de luz e eletrônica de transmissão (M.E.T.). Os resultados mostraram que o tratamento com alantoína na dose de 60 mg/kg por via oral reduziu a formação de lesão gástrica em todos os modelos experimentais e o tratamento por via intraduodenal revelou atividade antissecretória ácida. O tratamento com alantoína foi capaz de preservar os níveis de GSH e diminuiu a permeabilidade vascular gástrica, atividade da MPO e os níveis de citocinas pró-inflamatórias. O tratamento com alantoína preservou o muco aderido à mucosa gástrica, assim como os níveis de PGE2. As análises microscópicas e ultraestruturais revelaram que a alantoína manteve a integridade tecidual e preveniu as alterações morfológicas induzidas por etanol nas células. Em conjunto, os resultados do presente trabalho trazem evidências de que alantoína possui papel gastroprotetor em camundongos através de mecanismos antioxidantes, citoprotetores e antissecretório ácido. Gastric ulcer affects people worldwide and the recurrence have fueled for new therapeutic strategies. Despite the well-known use of allantoin in cosmetic products, it effect has never been studied in gastric ulcer. In this way, the presente work aimed explore the pharmacological pathways associated with the allantoin efficacy against commonly harmful agents that cause injuries to the stomach. The gastroprotective activity of this compound was evaluate in diferent experimental models induced by ethanol, ethanol acidity and pylorus ligature. All the experimental protocols were approved by CEUA/UFG, protocol n. 064/15. Female albino Swiss mice (30-35g) were used in the experiments. They were maintained at 23  2C and 12 h light/dark cycle, with free access to food and water. Animals were fasted 16 h before the experimental sessions with free access to glucose water (5%). The stomach of mice were used to quantification of reduced gluthatione (GSH), gastric vascular permeability, pro-inflammatory cytokines (TNF- e IL-1), gastric mucus, PGE2 levels and the myeloperoxidase (MPO) activity. The gastric lesions were examined macroscopically and histopatological analysis in light microscopy and eletronic microscopic transmission were carried out. The results showed that allantoin at dose of 60 mg/kg (p.o.) decreased the formation of gastric lesion in all the experimental models and the intraduodenal treatment revealed the antisecretory action. The treatment with allantoin preserved the GSH levels and decreased the gastric vascular permeability, MPO activity and pro-inflammatory cytokines levels. The treatment with allantoin preserved the gastric adhered mucus as well as the PGE2 levels. Microscopic and ultrastructural analysis revealed that allantoin maintained tissue integrity and prevented morphological changes in cells caused by ethanol. Altogether, the results of present work brings evidences that allantoin possesses gastroprotective activity through anti-oxidative, antisecretory, and cytoprotective mechanisms. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-03-28T21:04:52Z No. of bitstreams: 1 FernandoFreitasdeLima.pdf: 10700728 bytes, checksum: 4d71744c36ac2a5c0b7db8e90b5c7be9 (MD5) Made available in DSpace on 2019-03-28T21:04:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandoFreitasdeLima.pdf: 10700728 bytes, checksum: 4d71744c36ac2a5c0b7db8e90b5c7be9 (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT) A Attalea phalerata Mart. ex Spreng. (bacuri ou acuri, Arecaceae) é utilizada na medicina popular. O óleo do fruto é utilizado para o tratamento cosmético anticaspa e contra queda de cabelos, em forma oral para o tratamento de congestão pulmonar e antiinflamatório para articulações. Este trabalho descreve o estudo cromatográfico dos carotenoides e ácidos graxos presentes no óleo da polpa de frutos de A. phaleratae sua atividade antioxidante, bem como a avaliação da toxicidade aguda, subaguda e genética (citotoxicidade, genotoxicidade e clastogenicidade), atividade anti-inflamatória in vitro/in vivo, antiproliferativa e citoprotetora in vitro. Após avaliação por cromatografia, o óleo apresentou como carotenoides majoritários α-caroteno, ȕ-caroteno e ζ-caroteno, e ácidos graxos insaturados. Na atividade antioxidante pelo sistema ȕ-caroteno/ácido linoleico, esses carotenoides podem ter apresentado influência direta na atividade, que foi de 47,33% de inibição de oxidação após exposição de 120 min aos radicais peróxido linoleico formados. A avaliação da toxicidade aguda não apresentou alteração macroscópica e no peso dos órgãos nas ratas avaliadas e comprovou que a DL50 do óleo é maior que 2000 mg/kg. No teste de toxicidade subaguda, o óleo apresentou baixa toxicidade nas doses de 125 mg/kg, 250 mg/kg, 500 mg/kg e 1000 mg/kg após exposição de 28 dias consecutivos. Os parâmetros bioquímicos e hematológicos não apresentaram alteração negativa quando comparados com os valores de referência na literatura, porém, valores de glicemia, colesterol e triglicérides foram reduzidos em alguns grupos tratados com o óleo de A. phalerata. As análises histopatológicas na toxicidade subaguda não mostraram quaisquer alterações que indiquem sinais de toxicidade nos tecidos dos órgãos avaliados. A toxicidade genética serviu para avaliar os possíveis efeitos citotóxicos, genotóxicos e mutagênicos (clastogênicos) do óleo da polpa. Os experimentos de citotoxicidade in vitro demonstraram que o óleo não apresenta toxicidade frente aos náuplios de Artemia salinae em células avaliadas pelo método de MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina). O ensaio de cometa demonstrou que o óleo não é genotóxico e o ensaio de micronúcleo confirmou a ausência de citotoxicidade e clastogenicidade. Ao avaliarmos a atividade anti-inflamatória do óleo pelos métodos in vitro, os resultados demonstraram que o óleo em dose de 1 mg/mL apresenta capacidade de inibição do óxido nítrico produzido pelos macrófagos, induz os macrófagos ao espraiamento e em dose de 10 µg/mL é um inibidor não seletivo da COX. Nos modelos in vivo, o óleo na dose de 700 mg/kg reduziu significativamente o edema de pata e impediu a migração leucocitária pelo modelo de pleurisia. O óleo apresentou-se inativo frente as células de carcinoma de rim e de próstata, porém nas doses 250 μg/mL e 500 μg/mL desenvolveu capacidade citoprotetora contra a Doxorrubicina. Após os experimentos realizados, concluímos que o óleo pode ser considerado seguro para o consumo nas doses testadas e é um promissor anti-inflamatório natural devido à presença de compostos bioativos e atividade antioxidante. Attaleaphalerata Mart. ex Spreng. (bacuri or acuri, Arecaceae) is used in folk medicine. The fruit oil is used in anti-dandruff treatment and against hair loss, orally for the treatment of pulmonary congestion and as an anti-inflammatory for joints. This work describes the chromatographic study of carotenoids and fatty acids present in A. phaleratafruit pulp oil and its antioxidant activity, as well as the evaluation of acute, subacute and genetic toxicity (cytotoxicity, genotoxicity and clastogenicity), in vitro/in vivoanti-inflammatory activity, and in vitroantiproliferative and cytoprotective. The oil presented α-carotene, ȕ-carotene and ζ-carotene, and unsaturated fatty acids as major compounds after evaluation by chromatography. In the ȕ-carotene/linoleic acid system, these carotenoids may have had a direct influence on the activity, which was 47.33% inhibition of oxidation after 120 min exposure to linoleic peroxide radicals formed. The acute toxicity assessment did not show any macroscopic or organ weight alteration in rats evaluated and the LD50 of A. phalerataoil was established as greater than 2000 mg/kg. In the subacute toxicity test, the oil presented low toxicity at the doses of 125 mg/kg, 250 mg/kg, 500 mg/kg and 1000 mg/kg after 28-day exposure. The biochemical and hematological parameters did not present any negative changes when compared to the normal range for the species according to the literature, however glycemia, cholesterol and triglyceride values were reduced in some groups treated with A. phalerata oil. Histopathological analysis in the subacute toxicity experiment did not present any changes that indicate signs of toxicity in all organs evaluated. Genetic toxicity served to evaluate the possible cytotoxic, genotoxic and mutagenic (clastogenic) effects of pulp oil. In vitrocytotoxicity experiments demonstrated that the oil had no toxicity against Artemia salinanauplii and in cells evaluated by the MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2yl) -2,5-diphenyl tetrazoline bromide) method. The comet assay demonstrated that the oil is not genotoxic and the micronucleus assay confirmed the absence of cytotoxicity and clastogenicity. When we evaluated the anti-inflammatory activity of the oil through in vitro methods, the results demonstrated that the oil at a dose of 1 mg/mL has the ability to inhibit nitric oxide produced by macrophages, induces macrophage spreading and is a non-selective COX inhibitor at a dose of 10 μg/mL. In in vivomodels, the oil at the dose of 700 mg/kg significantly reduced paw edema and prevented leukocyte migration by the pleurisy model. The oil was inactive against kidney and prostate carcinoma cells. However, at 250 μg/mL and 500 μg/mL, it developed cytoprotective capacity against Doxorubicin. After the experiments, we conclude that the oil can be considered safe for consumption at the doses tested and is a promising natural anti-inflammatory due to the presence of bioactive compounds and antioxidant activity.

Orientador: Prof. Dr. Carlos Alberto Silva Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, 2014. Os peptideos potenciadores de bradicinina (BPPs) presentes na fracao de baixo peso molecular (FBP) do veneno da serpente Bothropoides jararaca (Bj) foram os primeiros inibidores da enzima conversora de angiotensina descritos. Recentes estudos demonstram que estes peptideos promovem a ativacao da enzima argininosuccinato sintetase, aumentando a disponibilidade de L-arginina e consequentemente a sintese de oxido nitrico, poliaminas e agmatina, essenciais para o crescimento, diferenciacao celular e neuroprotecao. Considerando os possiveis efeitos farmacologicos da FBP, o presente estudo tem como objetivo avaliar a atividade citoprotetora da FBP do veneno da serpente Bj em cultura primaria de celulas do hipocampo. Os resultados sugerem que a FBP nao e citotoxica nas condicoes experimentais avaliadas. Evidencias demonstram que as celulas tratadas com FBP 0,1 ¿Êg/mL e posteriormente com peroxido de hidrogenio H2O2 50¿ÊM apresentam maior viabilidade e menor expressao de caspase 3 clivada que as celulas tratadas apenas com H2O2 50¿ÊM, tambem e possivel observar que as celulas previamente tratadas com FBP apresentam morfologia normal, caracterizada pela presenca de neuritos, ja as celulas tratadas apenas com H2O2 50¿ÊM apresentam morfologia compativel com processos de morte celular. Em sintese os resultados sugerem que a FBP apresenta atividade citoprotetora contra o estresse oxidativo promovido por H2O2 50¿ÊM. O presente estudo abre novas perspectivas da aplicacao dos BPPs presentes na FBP da Bj para o desenvolvimento de novas pesquisas na area de neurociencia, com foco no desenvolvimento de farmacos aplicados ao tratamento de doencas neurodegenerativas. The bradykinin potentiating peptides (BPPs) in the low molecular weight fraction (LMWF) from the venom of the Bothropoides jararaca (Bj) were the first angiotensin-converting enzyme inhibitors described. Recent studies have demonstrated that these peptides promote the activation of the enzyme argininosuccinate synthetase, increasing the availability of L-arginine and therefore the synthesis of agmatine, nitric oxide, polyamines essential for the growth, cell differentiation and neuroprotection. Considering the possible pharmacological effects of the LMWF, the present study aims to evaluate the cytoprotective activity of LMWF from Bj in primary cultured hippocampal cells. The results suggest that the LMWF is not cytotoxic in all experimental conditions. Evidence has shown that cells treated with LMWF 0.1 ìg/mL and then with hydrogen peroxide H2O2 (50ìM) show higher viability and lower expression of cleaved caspase 3 cells than the treated just with H2O2 (50ìM). Is also observed that cells pretreated with LMWF have normal morphology characterized by the presence of neurites, cells treated with H2O2 (50ìM) showed morphology compatible with cell death processes. In summary the results suggest that LMWF has cytoprotective activity against oxidative stress caused by H2O2 (50ìM). This study opens new perspectives of application of BPPs present in the LMWF from Bj for the development of new research in neuroscience, focusing on the development of drugs applied to the treatment of neurodegenerative diseases.

O estômago dos equinos tem particularidades anatômicas e fisiológicas que facilitam a ocorrência de alterações inflamatórias, degenerativas e obstrutivas, além de sensibilidade frente a mudanças de condições externas. A superfície da mucosa gástrica é coberta por epitélio tanto escamoso como glandular, com mecanismos de proteção deficiente e eficiente, respectivamente. Na rotina clínica, são frequentes prevalências e incidências aumentadas de lesões derivadas de processos locais ou sistêmicos. The equine stomach has anatomical and physiological peculiarities that facilitate the production of inflammatory, degenerative and obstructive disorders, besides being sensitive to external factors changes. The gastric surface is covered by squamous epithelium and glandular epithelium with poor and efficient mechanisms of protection respectively. In clinical practice, increased prevalence and incidence are common due to local and remote processes.

Os agrotóxicos são amplamente utilizados na agricultura e, atualmente, fazem parte do grupo de agentes químicos que podem levar à perda auditiva. A identificação de drogas que, associadas aos ototóxicos, possam atuar como otoprotetores é objeto de estudo. OBJETIVO: Analisar a existência de efeito otoprotetor do extrato de Ginkgo biloba aos possíveis danos cocleares causados pelo agrotóxico do grupo dos organofosforados - metamidofós, avaliando-se as alterações anatômicas por meio da microscopia eletrônica de superfície. MATERIAL E MÉTODO: Estudo experimental prospectivo utilizando 21 cobaias, que sofreram ação da administração de soro fisiológico, agrotóxico e ginkgo biloba isoladamente e associadas, durante sete dias consecutivos. Após, as cócleas foram removidas e avaliadas anatomicamente pela microscopia eletrônica de varredura. RESULTADOS: As cobaias submetidas ao agrotóxico apresentaram alterações morfológicas cocleares, com lesões nas três espiras analisadas na microscopia eletrônica, intensificadas de acordo com a dosagem recebida do agente. As cobaias tratadas com agrotóxico e Ginkgo biloba apresentaram uma manutenção da arquitetura ciliar nas células ciliadas externas em todas as espiras da cóclea. CONCLUSÃO: O extrato de Ginkgo biloba, por sua ação antioxidante, atuou como fator otoprotetor à ototoxicidade pelo agrotóxico em cobaias. Pesticides are widely used in agriculture, despite the risk of hearing loss related to the exposure to their chemical components. This study looks into protective drugs to counteract the ototoxicity of pesticides. OBJECTIVE: This study aims to analyze the effect ginkgo biloba extract may have in protecting against possible cochlear damage caused by organophosphate pesticides (methamidophos). Anatomic changes are assessed through surface and electron microscopy. MATERIALS AND METHODS: This is a prospective experimental study. Twenty-one guinea pigs were given saline solution, pesticide, and ginkgo biloba alone or combined for seven consecutive days. Then their cochleas were removed and examined in a scanning electron microscope. RESULTS: Pesticide-exposed guinea pigs had morphological alterations in their cochleas and injuries in the three turns analyzed through electron microscopy. Injury intensity varied according to the dosages of the agents given to the test subjects. Guinea pigs treated with pesticide and ginkgo biloba maintained the architecture of their outer hair cells in all cochlear turns. CONCLUSION: The antioxidant properties found in the ginkgo biloba extract protected guinea pigs from pesticide ototoxicity.

Made available in DSpace on 2017-07-21T19:59:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simoni Marineia Braatz.pdf: 10395189 bytes, checksum: 4c6c59c43b05d7cdd5092ae73a0d7737 (MD5) Previous issue date: 2010-02-22 Surinam cherry leaves are popularly used as an alternative treatment for diabetes mellitus. They are rich in phenolic compounds which have antioxidant properties. Besides, it is well known that reactive species influence in the progression of diabetes. The aim of this study was to evaluate the antioxidant, cytotoxic and cytoprotective activity of the crude leaf extracts of Eugenia uniflora L. and some major components of the extracts, quercetin (QE) and myricetin (MI); and the effect of these substances on the functionality of RINm5f cells. The methodologies performed were: Folin- Ciocalteau method, MTT reduction, DPPH method, hematoxylin-eosin stain, radioimmunoassay and Western Blot analyses. The total phenolic content obtained for the extracts was 440.27 g/mL and 37.83Yg/mL catechin equivalent/mg of aqueous extract (AE) and ethanol extract (EE), respectively. In the DPPH essay, the IC50 of AE was 321.50 g/mL, MI was 152.63 g/mL and QE was 110.278 g/mL. The EE didn’t show significant antioxidant activity. The AE and the EE are not cytotoxic in the concentrations between 12.5 - 75 g/mL and 31.25 - 500Yg/mL, respectively. QE and MI are not cytotoxic in the concentrations between 3.13 – .25 g/mL and 3.13 – 12.5 g/mL, respectively. Most of the compounds didn’t interfere in insulin secretion, except for EE, which increased at least 3 times insulin secretion and MI which decreased insulin secretion in its lower concentration tested. Hydrogen peroxide (H2O2) induced a reduction of 33% of cell viability in acute assay and 45% in chronic assay. The AE had a cytoprotective effect mainly in the chronic assay and in its higher concentrations. The EE had a similar effect only when chronically tested. QE showed a dose-dependent result (6.5 > 3.13 g/mL) in the acute assay and prevented 100% of the damage caused by H2O2 in the chronic assay. One possible cytoprotective mechanism for these compounds and extracts is the inhibition of the activation of NF-κB. Besides that, H2O2 altered intercellular adhesion with intense modification of cellular morphology. The cells presented a round shape, with the formation of folds in the membrane and reduction of cytoplasm basophily. Both extracts and isolated compounds also prevented changes in morphology caused by H2O2, suggesting prevention of lipid peroxidation. There was no variation in the expression of the proteins superoxide dismutase (SOD), Bax, disulfide isomerase (PDI) and GRP94 (glucoseregulated protein), however, the increased protein content of GRP78 was an indicative of reticular stress. These results are an evidence that Eugenia uniflora L. can be used as an alternative treatment for diabetes mellitus. Folhas de pitanga são popularmente utilizadas no tratamento alternativo do diabetes mellitus. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antioxidante, citotóxica e citoprotetora dos extratos brutos das folhas de Eugenia uniflora L. e de compostos encontrados nos extratos: quercetina (QE) e miricetina (MI), além do efeito destes sobre a funcionalidade de células RINm5f. As metodologias utilizadas foram: Folin-Ciocalteau, redução do MTT, captura do DPPH, coloração por hematoxilina e eosina, radioimunoensaio e Western Blot. O conteúdo total de fenóis obtido nos extratos foi 440,27 g/mL e 37,83 g/mL equivalentes de catequina/mg de extrato aquoso (EA) e alcoólico (EE), respectivamente. No ensaio de captura do DPPH, o EA apresentou um IC50 de 321,50 g/mL, a MI de 152,63 g/mL e a QE de 110,278 g/mL. O EE não apresentou significativa atividade antioxidante. O EA e o EE não apresentaram citotoxicidade nas concentrações entre 12,5 - 75 g/mL e 31,25 - 500 g/mL, respectivamente. Já a QE e MI são mais citotóxicas, apresentando viabilidade celular superior a 90% entre 3,13 - 6,25 g/mL e 3,13 - 12,5 g/mL, respectivamente. Quanto à funcionalidade celular, o EA e a QE não interferiram na secreção de insulina. A MI causou redução na secreção de insulina na concentração de 3,13 g/mL enquanto o EE aumentou mais de 3 vezes a secreção deste hormônio. O peróxido de hidrogênio (H2O2) reduziu, em média, 33% da viabilidade das células no ensaio agudo e 45% no ensaio crônico. O EA promoveu citoproteção principalmente no ensaio crônico e nas maiores concentrações testadas. Já o EE apresentou citoproteção apenas quando incubado cronicamente. A QE apresentou resultado dose-dependente (6,5 > 3,13 g/mL) no ensaio agudo e preveniu 100% dos danos causados pelo H2O2 no ensaio crônico. Um possível mecanismo de ação relacionado com a proteção dos extratos e compostos isolados é o bloqueio da ativação do NF-κB pelo H2O2. Além disso, o H2O2 alterou a adesão intercelular com intensa modificação na morfologia destas. As células apresentaram formato mais arredondado, com formação de pregas na membrana e redução da basofilia citoplasmática. Os extratos e compostos isolados preveniram alterações na morfologia causadas por H2O2, sugerindo prevenção da peroxidação lipídica. Não houve variação na concentração protéica da superóxido dismutase (SOD), BAX, dissulfito isomerase (PDI) e GRP94 (proteína regulada por glicose), entretanto houve aumetno da concentração da proteína GRP78 indicando estresse reticular. Os resultados apresentados são um indicativo de que a E. uniflora L. possa ser usada no tratamento alternativo do diabetes mellitus.

A ototoxicidade ainda é um desafio para medicina. A descoberta dos mecanismos endógenos autoprotetores das células ciliadas externas associados a métodos de avaliação funcional e ultra-estrutural das mesmas abriu nova perspectiva no entendimento e controle destes mecanismos. OBJETIVO: O trabalho objetivou determinar se subdoses de gentamicina protegia contra ototoxicidade da amicacina baseado nestes mecanismos e determinar se a amplitude das emissões otoacústicas teria correlação com grau de integridade das células ciliadas. MATERIAL E MÉTODO: Estudo experimental. Utilizando 31 cobaias, administrou-se soro fisiológico, gentamicina e amicacina, isoladamente e associadas, via intramuscular, por 12, 30 e 42 dias. Pesquisa de emissões otoacústicas foi realizada no início e final do experimento, comparado com estudo da integridade coclear, por microscopia eletrônica. RESULTADOS: Subdoses de gentamicina não protegeram a orelha interna contra toxicidade da amicacina; diminuições da amplitude das emissões otoacústicas apresentaram forte correlação com aumento de lesões das células ciliadas. CONCLUSÃO: Os achados contribuem para o entendimento dos mecanismos de ototoxicidade e otoproteção da orelha interna. A determinação da correlação entre amplitude de emissões e integridade celular tem grande importância no acompanhamento das lesões de células ciliadas, com possível aplicação no monitoramento de ototoxicidade por drogas em humanos. Ototoxicity is still a challenge to medicine. The discovery of self-protecting endogenous mechanisms of the outer hair cells associated with their functional and ultra-structural assessment methods has opened new horizons in the understanding and controlling of these mechanisms. AIM: this paper aimed at establishing whether or not underdoses of gentamicin could protect the inner ear against the harmful effects of amikacin, based on these protection mechanisms and determine if the otoacoustic emission amplitudes could be associated with the level of hair cell integrity. MATERIALS AND METHODS: Experimental study. We used 31 guinea pigs. They were injected with saline solution, gentamicin and amikacin, alone and in combinations -intramuscular injections - during 12, 30 and 42 days. The otoacoustic emissions were recorded in the beginning and at the end of the experiment, comparing it with the cochlear integrity study carried out by electron microscopy. RESULTS: gentamicin underdoses did not protect the inner ear against amikacin toxicity; the reduction in otoacoustic emissions was strongly associated with an increase in hair cell lesions. CONCLUSION: these findings help understand inner ear otoprotection and ototoxicity. Establishing the correlation between the emissions amplitude an cell integrity plays an important role in the follow up of hair cell damage, with possible monitoring of ototoxicity caused by drugs in humans.