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The development of extruded products with higher nutritional quality and pleasant taste is challenging for the food industry. Therefore, this paper aims to develop an extruded breakfast cereal made of cassava and stevia leaves pretreated with ethanol and provide its chemical and sensorial characterization. We made three breakfast cereal formulas using granulated tapioca flakes and between 0-2% stevia leaves. We determined the moisture, ash, and protein content following the method described by AOAC (2005) and lipid content according to the Goldfish method. To estimate the carbohydrate level, we deducted the sum of all the other values from 100. We evaluated the sensory acceptance through a 9-points hedonic score. Adding stevia leaves to the tapioca breakfast cereal represented a significant increase in chemical composition, increasing the protein level between the formulas. Only ashes and lipids statistically did not differ between the 1%-stevia formula and control. All the formulas were well accepted on the sensory test, and there were no significant differences between the score given to each since all of them achieved from 5.71 to 5.82 for flavor, 5.29 to 6.29 for texture, and 5.53 to 6.29 for global evaluation. The breakfast cereal added of 2% of stevia leaves obtained the lowest percent score at the rejection region and the highest protein content, which is promising in the breakfast cereal production. Desarrollar productos extruidos con mayor calidad nutricional y con un sabor agradable es un reto para la industria alimentaria. Así, el objetivo de este trabajo es desarrollar un cereal de desayuno extruido a base de yuca y hojas de stevia pretratadas con etanol y caracterizarlo química y sensorialmente. Se elaboraron tres formulaciones de cereales para el desayuno utilizando tapioca granulada y hojas de stevia al 0-2%. Las determinaciones de contenido de humedad, cenizas y proteínas se realizaron mediante la metodología de AOAC (2005) y la de lípidos mediante el método Goldfish. El contenido de carbohidratos se estimó sustrayendo de 100 la suma de los resultados anteriores. La aceptación sensorial se valoró mediante una escala hedónica de nueve puntos. La incorporación de stevia en los cereales representó un aumento significativo en la composición centesimal de los extruidos, elevando el contenido de proteínas entre las formulaciones. Solamente los contenidos de cenizas y lípidos no difirieron estadísticamente entre la formulación con 1% de stevia y el control. Todas las formulaciones fueron bien aceptadas sensorialmente y no hubo diferencias significativas entre los grados atribuidos a los cereales, obteniendo todos valores entre 5,71 y 5,82 para el sabor, 5,29 y 6,29 para la textura y 5,53 y 6,29 para la evaluación global. El cereal preparado con la adición de un 2% de hojas de stevia obtuve los porcentajes más bajos en la región de rechazo y el contenido más alto de proteínas, lo que demuestra que es prometedor para la producción de cereales de desayuno. Desenvolver produtos extrusados com maior qualidade nutricional e que tenham sabor agradável é um desafio para a indústria de alimentos. Assim, o objetivo deste trabalho é desenvolver um cereal matinal extrusado à base de mandioca e de folhas de estévia pré-tratadas com etanol e caracterizá-lo química e sensorialmente. Foram produzidas três formulações de cereais matinais utilizando tapioca granulada e de 0-2% de folhas de estévia. As determinações de umidade, cinzas e proteínas foram realizadas de acordo com o método descrito pela AOAC (2005) e a de lipídeos pelo método de Goldfish. O teor de carboidratos foi estimado subtraindo-se de 100 o somatório dos resultados anteriores. A aceitação sensorial foi avaliada por meio de escala hedônica de nove pontos. A incorporação de folhas de estévia nos cereais matinais de tapioca representou um aumento significativo na composição centesimal dos extrusados, elevando o teor de proteínas entre as formulações. Apenas os teores de cinzas e lipídeos não diferiram estatisticamente entre a formulação com 1% de estévia e o controle. Todas as formulações foram bem aceitas sensorialmente e não houve diferenças significativas entre as notas atribuídas aos cereais matinais, todos obtendo valores entre 5,71 e 5,82 para o sabor, 5,29 e 6,29 para a textura e 5,53 e 6,29 para a avaliação global. O cereal matinal elaborado com adição de 2% de folhas de estévia obteve os menores percentuais na região de rejeição e o maior teor de proteínas, se mostrando promissor para a produção de cereais matinais.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Sociais, Departamento de Antropologia, Programa de Pós-graduação em Antropologia Social, 2020. No final do século XIX e início do século XX, o naturalista ítalo-suíço Moisés Bertoni, radicado no Paraguai, descreve em boletins científicos informações sobre uma planta de folhas doces, sobre a qual ouviu falar por meio de indígenas da região oriental paraguaia. Essa planta foi chamada de Stevia rebaudiana, e despertou o interesse, já antevisto por Bertoni, na sua aplicação na indústria de edulcorantes, ao longo do século XX. No período entre as décadas de 1950 e 1970, que coincidiu com o final do período de decadência dos ervais de extração de erva-mate, localizados em ambos os lados da fronteira entre Brasil e Paraguai, os primeiros produtores paraguaios conseguiram realizar plantios comerciais da planta, possibilitando a sua propagação para outros lugares. Após isso, na década de 1970, imigrantes japoneses que se instalaram no lado brasileiro da fronteira com o Paraguai adquiriram uma grande quantidade de mudas, as quais foram transplantadas para o Japão. Nas décadas seguintes, foram produzidas variedades melhoradas de estévia, aliadas a uma série de estudos e experimentos científico-tecnológicos, culminando, no século XXI, com a produção de edulcorantes com alto valor de mercado. Atualmente, a estévia alimenta uma indústria bilionária em todo o mundo. No entanto, existe uma história pouco contada sobre esse caso de sucesso da estévia como uma mercadoria mundial, e essa é a história sobre os conhecimentos tradicionais dos Kaiowa, Guarani e Paĩ Tavyterã, indígenas que habitam ambos os lados das fronteiras entre Brasil e Paraguai, na altura dos estados do Mato Grosso do Sul, e do Departamento de Amambay, respectivamente. Essa tese visa, por um lado, contar a história de como a estévia tornou-se, de uma planta utilizada por esses indígenas para diversos fins - dentre estes como forma de proteção e de produção de afecções desejadas nos corpos de jovens (meninos e meninas) na época da puberdade -, em uma mercadoria de alcance mundial. Por outro lado, a tese busca refletir sobre as diferenças entre as práticas de conhecimento que são performadas, de um lado, pelos indígenas, e de outro, pela ciência e tecnologia, e os seus efeitos na geração de valor (tanto no sentido do que é bom e desejável para a vida, quanto no sentido econômico, da medida do grau em que os objetos são desejados, medido com base no que os outros estão dispostos a desistir para obtê-los, quanto no sentido estruturalista de diferença significativa). Importante também, para essa reflexão, as condições de possibilidades conformadas por meio de fluxos de materiais, em processos de colonização e mudança da paisagem, para que determinadas práticas de conhecimento sejam mais viáveis, desejáveis, tidas como mais racionais do que outras. O processo histórico de colonização interna e do desmatamento de florestas seguido da abertura de propriedades privadas na forma de fazendas sobre os territórios indígenas Kaiowa, Guarani e Paĩ Tavyterã, em meados do século XX, no sul do MS e na área fronteiriça do Paraguai, junto do confinamento dos indígenas em pequenas reservas, tiveram um papel importante de limitação dos processos de ontogênese que conformam o que costuma-se chamar de conhecimentos tradicionais Kaiowa, Guarani e Paĩ Tavyterã. Por fim, reflete-se sobre os efeitos, tanto do ponto de vista das políticas públicas quanto do próprio fazer etnográfico de se chamar uma série de práticas de “conhecimento”, principalmente no que diz respeito a torná-las disponíveis, atribuindo-se a elas um “valor de troca”, sem deixar de lado outros aspectos da crítica marxiana sobre o fetichismo da mercadoria e que podem ser pensado a partir dos efeitos dos fluxos de materiais provocado no processo de colonização interna no sul do MS e leste do Paraguai, e da expansão de propriedades privadas sobre os territórios indígenas. At the end of the 19th century and the beginning of the 20th, the Italian-Swiss naturalist Moisés Bertoni, based in Paraguay, described information in scientific bulletins about a sweet leafy plant, which he heard about through indigenous people in the eastern Paraguayan region. This plant was called Stevia rebaudiana, and aroused the interest, already foreseen by Bertoni, in its application in the sweetener industry, throughout the 20th century. In the period between the 1950s and 1970s, which coincided with the end of the decay period for the extraction of yerba mate herbs, located on both sides of the border between Brazil and Paraguay, the first paraguayan producers managed to carry out commercial plantings of the plant , allowing its spread to other places. After that, in the 1970s, Japanese immigrants who settled on the Brazilian side of the border with Paraguay acquired a large number of seedlings, which were transplanted to Japan. In the following decades, improved varieties of stevia were produced, combined with a series of scientific and technological studies and experiments, culminating, in the 21st century, with the production of sweeteners with high market value. Currently, stevia feeds a billion dollar industry worldwide. However, there is a little-told story about this success story of stevia as a world commodity, and this is the story about the traditional knowledge of the Kaiowa, Guarani and Paĩ Tavyterã, indigenous people who live on both sides of the borders between Brazil and Paraguay, at the states of Mato Grosso do Sul, and the Department of Amambay, respectively. This thesis aims, on the one hand, to tell the story of how stevia became, of a plant used by these indigenous people for various purposes, among them as a way of protecting from unwanted and producing desired changes in the bodies of young people (boys and girls ) at the time of puberty, in a worldwide commodity. On the other hand, the thesis seeks to reflect on the differences between knowledge practices that are performed, on the one hand, by indigenous people, and on the other, by science and technology, and their effects on the generation of value (both in the sense of what it is good and desirable for life; as in the economic sense of the measure of the degree that objects are desired, measured based on what others are willing to give up to obtain them; as in the structuralist sense of significant difference). Also important, for this reflection, are the conditions of possibilities conformed by means of material flows, in processes of colonization and landscape change, so that certain knowledge practices are more viable, desirable, considered more rational than others. The historical process of internal colonization and deforestation followed by the opening of private properties in the form of farms over the indigenous territories of the Kaiowa, Guarani and Paĩ Tavyterã, in the mid-twentieth century, in the south of MS and in the border area of Paraguay, along with the confinement of the indigenous people in small reserves, played an important role in limiting the processes of ontogenesis that make up what is usually called the Kaiowa, Guarani and Paĩ Tavyterã traditional knowledge. Finally, it reflects on the effects, both from the point of view of public policies and the ethnographic work itself of calling a series of practices by the tag of “knowledge”, mainly with regard to making them available, attributing to them an “exchange value”, without neglecting other aspects of the Marxian criticism of commodity fetishism and which can be thought of based on the effects of material flows caused in the process of internal colonization in southern MS and eastern Paraguay, and the expansion of private properties over indigenous territories. Upe Síglo 19 paha, síglo 20 ñepyrúme, Moisés Bertóni, arandu Italia ha Suiza ñemoñare oikóva Paraguái retãme, omombe’u kutia arandu rupive peteĩ pohã ka’aguy hogue re’ẽva reko, omombe’u va’ekue chupe avakuéra oikóva kuarahy resẽkotyo – Región Oriental – tetã Paraguáipe. Ko ka’a, guaraníme ojeheróva ka’ahe’ẽ ha’e ombohéra stevia rebaudiana ha pya’e omonambi pu’ã umi asukáre omba’apovakuérape, oha’arõ haguéicha voi karai Bertóni. Péicha ojehu upe síglo 20 pukukue. Ha upe 1950 ha 1970 pa’ũme, ikangyve jave ohóvo ka’a ñemono’õ pe Brasil ha Paraguái retã ojoajuhápe, Paraguáipegua ñemitỹhára oñotỹ ñepyrũ upe ka’a he’ẽ ha upéicha rupi isarambi ypy ambue tetãre. Upe riréma, upe 1970 pa’ũme, Japón-guakuéra oñemohenda va’ekue Brasil retãgotyo, Paraguái retãgui oñemboja’ohápe, ojogua hetaiterei ka’ahe’ẽ ra’y ha oguerahauka hikuái Japón-pe. Upe rireve jeýma, oñemomenda ambue ka’áre ha ojejapo pe stevia imbarete ha iporãvéva rehegua. Péicha oiko ojejapo rupi heta estúdio hu’ãva síglo 21-pema, upéicha rupi tuicha ojupi asuka osẽva ka’ahe’ẽgui repy. Ko’agaitérõ pe stevia oiporúva indústria-kuéra omongu’e 1000 millones dólares ko mundo tuichakue javeve. Katu upeichavére oĩ mombe’upyrã oñeguerokañýva ko mba’eguasu hepyetéva rehegua; noñemombe’úi ko ka’ahe’ẽ jeporu oñepyrũhague Kaiowa, Guarani ha Paĩ Tavyterã kuéra oikóva, jovaive, Paraguái ha Brasil retã ojoajuhápe, Mato Grosso do Sul ha Amambay departamento-pe. Ko haipy omopyrendáva che rembiapo guasu, peteĩhaguivo omombe’use mba’éichapa ko stevia, ka’amirĩ, oiporúva avakuéra heta mba’erã; umíva pa’ũme mba’éichapa oñangareko térã ombojehuta kunuminguéra retepýpe mba’asy (taha’épa kuña térã kuimba’e ohasa jave hikukái mitã rekógui, kakuaa rekópe) ha oiko chugui peteĩ mba’e repy guasu, arapy tuichakue javeve ojeporúva. Péva ari, ko haipy ogueroamindu’u mba’éichapa oiporu imba’ekuaa umi avakuéra ha mba’éichapa avei oiporu okaygua hi’arandu ha tembiporu pyahu ombojehu haguã mba’eporupyrã; taha’épa ou porã térã ouvaíva yvyporakuéra rekovépe guarã (taha’épa akarapu’arã ha avei pe mba’epota katuete tekotevẽhápe peteĩva ohejarei ikatu haguã ambuevakuéra ohupyty ha ombyaty heta). Avei ko haipy ogueroamindu’u ojehuva’ekue ojeitypávo ka’aguy ha oñemoĩ hendaguépe vaka retã ha temitỹ. Upekuévo tuicha iñambue hague umi tenda ha ipokavẽ hague heta mba’e oiporúva Kaiowa, Guarani ha Paĩ Tavyterã, upe síglo 20 mbytérupi. Umi mba’e ojehúvo oñemomba’e guasuve okaygua arandu ha oñemomba’e rei avakuéra rembikuaa. Ipahaitévo, ko haipy oñamindu’u opa ko’ã ojehu va’ekuépa mba’éicha opyvoi raka’e, taha’e Estado rembiapo, térã antropólogo-kuéra omongu’éva tembiapóre, avaretãnguéra rupi omono’õ jave opa “tembikuaa” rehegua1.

Orientador: Prof. Dr. Eliezer Rodrigues de Souto Coorientador: Prof. Dr. Dauri José Tessmann Dissertação (mestrado em agronomia) - Universidade Estadual de Maringá, 2019 RESUMO: A Stevia (Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni) pertence a família Asteraceae e é uma planta originária da América do Sul. A Stevia vem ganhando cada vez mais espaço no mercado devido ao seu poder adoçante, que além de ser maior do que a própria sacarose é isento de calorias, carboidratos e com índice glicêmico zero. Sabe se que a germinação da Stevia através de sementes é baixa e pouco se sabe a respeito de fungos associados à mesma. Tendo em vista essa escassez de trabalhos associados à essas variáveis o presente trabalho objetivou buscar condições eficazes para o teste de sanidade da semente, definindo temperatura(20, 25 e 28°C) e período de incubação (5, 7 e 10 dias pós semeadura) ideais para avaliação, bem como, avaliar a incidência dos fungos encontrados e verificar a transmissão para plântulas e possíveis interferências no vigor e germinação das mesmas, com e sem assepsia, a partir da inoculação dos fungos identificados como mais importante no lote trabalhado.Foi observado a presença dos fungos Alternariaalternata,Bipolaris sp., Fusarium sp., Cladosporium sp., Phytomices sp. e Phoma sp., entretanto apenas Alternaria alternata, Bipolaris sp. e Fusarium sp. foram discutidos e submetidos a análise estatística. De maneira geral, a melhor condição observada foi em incubação feita a 20ºC, entre 7 e 10 dias de incubação. A assepsia realizada no teste de sanidade com as sementes inoculadas apontaram redução significativa na incidência dos fungos avaliados, apontando que o fungo havia apenas contaminado a semente. Em relação ao vigor das sementes foi observado diferença significativa apenas em sementes inoculadas com Fusarium sp. quando houve assepsia. No teste de germinação, concluiu-se que a inoculação dos fungos afetou negativamente a germinação apenas de sementes inoculadas com Fusarium sp.. As maiores taxas de transmissão aconteceram com os fungos A. alternatae Bipolaris sp. com 24 horas de contato da semente com a colônia, sem assepsia ABESTRACT: Stevia (Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni) belongs to the family Asteraceae and is a plant native to South America. Stevia has been gaining more and more space in the market due to its sweetening power, which in addition to being greater than itself sucrose is calorie free, carbohydrate and zero glycemic index. It is known that the germination of Stevia through seeds is low and little is known about fungi associated with it. The objective of this work was to search for effective conditions for the seed health test, defining temperature (20, 25 and 28 ° C) and incubation period (5, 7 and 10 days after sowing) ), as well as to evaluate the incidence of the fungi found and to verify the transmission to seedlings and possible interferences in their vigor and germination, with and without asepsis, from the inoculation of the fungi identified as most important in the lot worked. The presence of fungi Alternaria alternata, Bipolaris sp., Fusarium sp., Cladosporium sp., Phytomices sp. and Phoma sp., however only Alternaria alternata, Bipolaris sp. and Fusarium sp. were discussed and submitted to statistical analysis. In general, the best observed condition was incubation at 20ºC, between 7 and 10 days of incubation. The asepsis performed in the sanity test with the inoculated seeds indicated a significant reduction in the incidence of the evaluated fungi, indicating that the fungus had only contaminated the seed. Regarding seed vigor, a significant difference was observed only in seeds inoculated with Fusarium sp. when there was asepsis. In the germination test, it was concluded that the inoculation of the fungi negatively affected the germination only of seeds inoculated with Fusarium sp.. The highest transmission rates occurred with the fungi A. alternata and Bipolaris sp. with 24 hours contact of the seed with the colony, without asepsis

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Stevia rebaudiana Bertoni (Asteraceae) popularmente conhecida como erva-doce do Paraguai é uma planta perene nativa da Serra de Amambai e ocorre espontaneamente no Paraguai e em regiões adjacentes do Brasil e Argentina. É uma fonte importante de adoçante natural em cujas folhas encontram-se glicosídeos (esteviosídeos e rebaudiosídeos) que podem ser 300 vezes mais doces que a sacarose da cana-de açúcar. As suspeitas de que o consumo dos adoçantes sintéticos tenha efeitos nocivos para a saúde têm ocasionado um aumento na demanda dos edulcorantes naturais, e neste caso a S. rebaudiana tem chamado atenção, pois além de ser um produto natural ainda apresenta propriedades farmacêuticas. Com o rápido aumento do cultivo e comercialização da cultura ocorre o inevitável surgimento de problemas fitossanitários relacionados a doenças fúngicas. Até o momento pouco se sabe sobre os patógenos associados a S. rebaudiana, não apenas no Brasil, mas no mundo todo. Com objetivo de esclarecer e complementar as informações relacionadas aos fungos fitopatogênicos de S. rebaudiana, foi realizado um levantamento dos fungos associados a esta planta no Brasil e no Paraguai visando produzir uma descrição mais completa da sua micobiota. Durante o levantamento foram obtidas amostras da região sul e sudeste do Brasil e do Paraguai. Foram encontrados, descritos (através de morfometria e análises moleculares) e ilustrados doze fungos, dentre os quais dois são aqui reconhecidos como novos taxa, são eles: cinco hifomicetos/formas assexuadas de ascomicetos (Alternaria burnsii, Alternaria novae-guineensis, Cercospora sp., Corynespora cassiicola e Fusarium sp.), cinco celomicetos/formas assexuadas de ascomicetos (Colletotrichum truncatum, Elsinoë sp. nov., Macrophomina phaseolina, Phoma omnivirens e Septoria sp. nov.), uma ferrugem (Aecidium minimum) e um basidiomiceto (Athelia rolfsii). Stevia rebaudiana Bertoni (Asteraceae) commonly known as Paraguay sweet herb is a perennial plant native from the Amambay region and occuring spontaneously in Paraguay and adjacent regions of Brazil and Argentina. It is an important source of natural sweetener with leaves contain glycosides (steviosides and rebaudiosides) that can be 300 times sweeter than sugarcane. The suspected negative health effects of the consumption of synthetic sweeteners have caused an increase in the demand for natural sweeteners. Stevia rebaudiana has attracted much attention an option, because besides being a natural product it has other benefitial pharmaceutical properties. The rapid increase in cultivation and commercialization has been accompanied - inevitably - by the emergence of phytosanitary problems, including fungal diseases. Until now, little is known about the pathogens associated with S. rebaudiana, not only in Brazil, but also worldwide. In order to clarify and complement the information related to phytopathogenic fungi of S. rebaudiana, a survey of fungi associated with this species in Brazil and Paraguay was carried out in order to produce a more complete description of its mycobiota. During the survey, samples were obtained from the southern and southeastern regions of Brazil and from Paraguay. Twelve fungi were collected, described (through morphometry and molecular analysis) and illustrated, are: five ascomycete/hyphomycete asexual morphs (Alternaria burnsii, Alternaria-novae-guineensis, Cercospora sp., Corynespora cassiicola and Fusarium sp.), five ascomycete/coelomycete asexual morphs (Colletotrichum truncatum, Elsinoë sp. nov., Macrophomina phaseolina, Phoma omnivirens and Septoria sp. nov.), a rust fungus (Aecidium minimum) and a basidiomycete (Athelia rolfsii).

Stevia rebaudiana (Bert.). Bertoni is worldwide known and explored by presenting high sweetener power steviol glycosides naturally in its leaves. Among these compounds, the most prominent ones are the stevioside and the rebaudioside A, both have been studied in the last decades also by their antidiabetic properties. However, besides the steviol glycosides, the stevia leaves have been described as phenolic and flavonoids compounds source, with antioxidant and antidiabetic source. Many efforts have been made directed to isolating and characterizing fractions rich in phenolic compounds from stevia leaves of a new seminal and elite variety, Stevia UEM-13, with the purpose of evaluating their potential of use as multi-functional source of phenolic compounds. This study relates the obtainment of a stevia fraction with high phenolic compounds content, which had its centesimal composition determined and also, its main present phenolic and flavonoids were identified, through LCMS analysis. The fraction with potential for fortifying foods was added in a protein isolate obtained from whey (WPI), and the developed supplement was tested for its antioxidant potential and antidiabetic effects.The objective of this study was to determine the composition and antioxidant potential of leaves of a new seminal variety of Stevia rebaudiana (Stevia UEM-13), to determine the levels of steviol glycosides, phenolic compounds, flavonoids and antioxidant capacity of different extracts and fractions obtained from the leaves of Stevia UEM-13 and to evaluate the potential of the fraction with high antioxidant capacity, obtained by fractionation with ethyl acetate, as a fortifier of the antioxidant and antidiabetic activity of whey protein isolate produced by membrane separation processes.The plants of Stevia rebaudiana of the seminal variety UEM 13 grown at NEPRON (UEM) were collected at maximum vegetative growth stage. These shrubs were previously dried in an oven at 60°C and the leaves were subsequently separated from the stems and branches, placed in polyethylene bags, and stored at -18°C before developing different extracts. The chemical reagents were purchased from Sigma-Aldrich. Different extracts and fractions were obtained from these leaves and were analyzed for total glycosides (HPLC), phenolic compounds (Folin) and total flavonoids and antioxidant capacity (DPPH). Aqueous extract of Stevia leaves UEM-13 was obtained by means of an aqueous extraction of a sample of 2.0 g of leaves, added with 250 ml of distilled water and heated to 100 ºC. Samples from the same sheet were also used for extractions with the solvents absolute ethanol and methanol, which were used for extraction in Sohxlet apparatus and maceration (absolute ethanol only). The methanolic extract, due to the higher extraction yield of the compounds of interest, was fractionated with hexane, chloroform, ethyl acetate and isobutanol and the fractions obtained were analyzed. The ethyl acetate fraction (ASF), because it was free of glycosides and with high antioxidant capacity, was analyzed in LCMS/MS and the phenolic and flavonoid compounds were identified, and in addition its proximal composition was determined. ASF was used as a fortifying fraction of a whey protein isolate (ASF was added at 0.2% concentration to the WPI). The WPI obtaining was made in accordance to Milani et al. (2016) with modifications. The whey was concentrated in ultrafiltration system (UF), diafiltration (DF) and (NF). A sample of this concentrated was dried in spray dryer. The UF and DF processes were made in a system with polyethersulfone filtering membranes (10 kD cut off), Koch brand, in spiral configuration, with 50 cm2 area. 12 diafiltration cycles were performed. The nanofiltration was performed in reverse osmosis system, composed by two polyamide membranes with 180D cut off molecular mass (Koch) and 500D (Millipore), both in spiral configuration, with 50 cm2 area each one. The WPI drying was made in a spray dryer atomizer. The MTT test was made in adipose cells to evaluate the ASF fraction cytotoxicity. To test the antidiabetic activity, 4 experimental groups were established, receiving the following supplements daily: 1) WPI - whey protein isolate (100 mg/kg); 2) ASF - stevia fraction (0.2 mg/kg); 3) WPI+ASF - protein isolate of whey fortified with 0.2% of the stevia fraction (100mg/kg); 4) DC- diabetic control; Received only water and feed. A fifth group (C) non-diabetic and non-supplemented was also established. The oral supplementation was performed daily, at 08:00 AM, for a 30 days period, by gavage (the control diabetic animals group received pure water). Fasting and fed blood glucose and body weight were evaluated weekly. After the treatments were evaluated plasma and serum levels of glucose, total cholesterol, HDL cholesterol, triglycerides, fructosamine, AST and ALT. The total antioxidant capacity was also evaluated in the plasma of all groups of animals after treatment. Among the main results of the different extractions made from the Stevia UEM-13 leaves, we can highlight that the methanolic extract presented higher extraction yield of the compounds of interest when compared to the ethanolic extract and therefore it was fractionated with different solvents. The isobotanolic fraction showed a higher content of glycosides (65.3%). The fraction obtained in ethyl acetate presented the highest content of phenolic compounds and flavonoids (524.20 mg galic acid equivalent/g; 380.62 μg quercetin equivalent/g respectively), and also of antioxidant capacity and presented with low glycosides content. the main identified by LC-MS were caffeic acid, quercetin-3-o-glycoside, cyanidin-3-glucoside, kaempferol, quercetin, apigenin, rozmarinic acid, clhologenic acid e dicaffeoylquinic acid. The stevia fraction in ethyl acetate (ASF) was used as a multi-functional source of phenolic compounds in the fortification of the whey protein isolate (WPI) obtained by membranes separation processes. WPI fortified with 0.2% of ASF had its antioxidant activity increased in 80%. WPI fortified with ASF presented more pronounced antidiabetic effects in relation to the WPI unfortified, mainly in the glycemic control of diabetic animals induced by streptozotocin. In vitro and in vivo antioxidant effects found important in stevia fraction, what contributed in an expressive way for fortifying the WPI. This pioneer study shows that the ASF can be used for enriching the WPI antioxidant and antidiabetic properties. The evaluation of extraction and fractionation of this plant using different solvents and methodologies resulted in extracts of different antioxidant capacity, which can be used to enrich the literature and contribute to their application in foods, pharmaceuticals and cosmetics. A diet rich in antioxidants may contribute significantly to prevent degenerative diseases, cardiovascular and metabolic diseases, such as diabetes mellitus. Thus, natural and industrialized foods enriched with flavonoids and phenolic compounds contribute to the reduction of these diseases. The present study showed that ethanol, methanol and ethyl acetate extracts of Stevia rebaudiana leaves (Stevia UEM-13) have a great potential antioxidant and so can be used as possible additives to enhance the functionality of food and beverages. Through membranes separation processes it was possible to obtain from whey the whey proteins isolate (WPI), which had its centesimal composition determined; The stevia fraction, obtained from Stevia UEM 13 variety leaves, with 3.82% yield, exhibited phenolic compounds as main constituents. The main identified phenolic acids and flavonoids in the ASF comply with the data literature. The ASF in the 0.2% concentration promoted increase of 80% in the WPI antioxidant activity. The physiological tests showed that the three supplements (ASF, WPI and WPI+ASF) were beneficial for improving the metabolic control of diabetic mice. The WPI fortified with ASF was the food supplement with expressive functionality, showing that the ASF has potential to be used as a fortifier or an antioxidant and antidiabetic activity enriching of foods or supplements. Stevia rebaudiana (Bert.). Bertoni é mundialmente conhecida e explorada por apresentar naturalmente em suas folhas, glicosídeos de esteviol de alto poder edulcorante. Entre estes compostos, os mais proeminentes são o esteviosídeo e o rebaudiosídeo A, ambos estudados nas últimas décadas também por suas propriedades antidiabéticas. Entretanto, além dos glicosídeos de esteviol, as folhas de estévia foram descritas como fonte de compostos fenólicos e flavonoides. Muitos esforços têm sido feitos para isolar e caracterizar frações ricas em compostos fenólicos de folhas de estévia, de uma nova variedade seminal e de elite, Stevia UEM-13, com o objetivo de avaliar seu potencial de uso como fonte multifuncional de compostos fenólicos. Este estudo relaciona a obtenção de uma fração de Stevia com alto conteúdo de compostos fenólicos, que teve sua composição centesimal determinada e também, seus principais fenólicos e flavonoides presentes foram identificados, por meio da análise LCMS. A fração com potencial para alimentos fortificantes foi adicionada em um isolado proteico obtido a partir de soro de leite (WPI), e o suplemento desenvolvido foi testado quanto aos seus efeitos antioxidantes e antidiabéticos. O objetivo deste estudo foi determinar a composição e o potencial antioxidante de folhas de uma nova seminal variedade de Stevia rebaudiana (Stevia UEM-13), determinar os teores de glicosídeos de esteviol, compostos fenólicos, flavonoides e de capacidade antioxidantes de diferentes extratos e frações obtidos a partir das folhas de Stevia UEM-13; e avaliar o potencial da fração com alta capacidade antioxidante, obtida pelo fracionamento em acetato de etila, como fortificadora ou enriquecedora da atividade antioxidante e antidiabética de isolado proteico do soro do leite (Whey protein) produzido por processos de separação por membranas. As plantas de Stevia rebaudiana da variedade seminal UEM 13 cultivadas em NEPRON (UEM) foram coletadas no de estágio máximo crescimento vegetativo. Estes arbustos foram previamente secos em estufa a 60°C e as folhas foram subsequentemente separadas dos caules e ramos, colocadas em sacos de polietileno e armazenadas a -18°C antes do desenvolvimento dos diferentes extratos. Os reagentes químicos foram adquiridos a Sigma-Aldrich. Diferentes extratos e frações foram obtidos a partir dessas folhas e foram analisados quanto aos teores de glicosídeos totais (CLAE), compostos fenólicos (Folin), flavonoides totais e capacidade antioxidante (DPPH). O Extrato aquoso das folhas de Stevia UEM 13 foi obtido por meio de uma extração aquosa de uma amostra de 2,0 g de folhas, adicionadas de 250 ml de água destiladas e aquecidas a 100 ºC. Amostras das folhas dessa variedade foram ainda usadas para extrações com os solventes etanol absoluto e metanol, os quais foram utilizados para extração em aparelho Sohxlet e maceração (somente etanol absoluto). O extrato metanólico, por apresentar maior rendimento de extração dos compostos de interesse foi fracionado com hexano, clorofórmio, acetato de etila e isobutanol e as frações obtidas foram analisadas. A fração de acetato de etila (ASF), por apresentar-se livre de glicosídeos e com alta capacidade antioxidante foi analisada em LCMS/MS, os compostos fenólicos e flavonoides foram identificados, e além disso sua composição proximal foi determinada. ASF foi usada como fração fortificadora de um isolado proteico do soro do leite (ASF foi adicionada ao WPI na concentração de 0,2%). A obtenção de WPI foi feita de acordo com Milani et al. (2016) com modificações. O soro foi concentrado em sistema de ultrafiltração (UF), diafiltração (DF) e (NF). Uma amostra deste concentrado foi seca em secador por pulverização. Os processos UF e DF foram feitos em um sistema com membranas filtrantes de polietersulfona (corte de 10 kD), marca Koch, em configuração espiral, com área de 50 cm2. Foram realizados 12 ciclos de diafiltração. A nanofiltração foi realizada em sistema de osmose reversa, composta por duas membranas de poliamida com massa molecular de corte 180D (Koch) e 500D (Millipore), ambas em configuração espiral, com área de 50 cm2 cada. A secagem do WPI foi realizada em atomizador secador spray. Um teste de citotoxicidade também foi realizado (teste MTT). Para testar a atividade antidiabética foram estabelecidos 4 grupos experimentais que receberam os seguintes suplementos diariamente: 1) WPI - isolado de proteína de soro de leite (100 mg/kg); 2) ASF - fração de estévia (0,2 mg/kg); 3) WPI + ASF - proteína isolada de soro de leite fortificada com 0,2% da fração de estévia (100 mg/ kg); 4) DC- diabético controle; recebeu apenas água e ração. Um quinto grupo controle (C), não diabético e não suplementado também foi estabelecido. A suplementação oral foi realizada diariamente, às 08:00 horas, por um período de 30 dias, por gavagem esofágica. Semanalmente foram avaliados glicemia de jejum e no estado alimentado, e peso corporal. Após os tratamentos foram avaliadas as taxas plasmáticas e séricas de glicose, colesterol total, colesterol HDL, triglicérides, frutosamina, AST e ALT. A capacidade antioxidante total também foi avaliada no plasma de todos os grupos de animais após o tratamento. Entre os principais resultados das diferentes extrações realizadas a partir das folhas de Stevia UEM-13, podemos destacar que o extrato metanólico apresentou maior rendimento de extração dos compostos de interesse quando comparado ao extrato etanólico e por isso foi fracionado com diferentes solventes. A fração isobotanólica mostrou maior teor de glicosídeos (65,3%). A fração obtida em acetato de etila apresentou o maior conteúdo de compostos fenólicos e flavonoides (524.20 mg equivalente de ácido gálico/g; 380.62 μg equivalente de quercetina/g, respectivamente), e também alta capacidade antioxidante e apresentou-se com baixo teor de glicosídeos. Os principais compostos identificados por LCMS/MS foram o ácido cafeico, quercetina-3-o-glicosídeo, cianidina-3- glicosídeo, kaempferol, quercetina, apigenina, ácido rozmarínico, ácido cloriogênico e ácido dicafeoilquínico. A fração de estevia em acetato de etila (ASF) foi utilizada como fonte multifuncional de compostos fenólicos na fortificação do isolado de proteínas de soro de leite (WPI) obtido por processos de separação de membranas. WPI fortificado com 0,2% de ASF teve sua atividade antioxidante aumentada em 80%. O WPI fortificado com ASF apresentou efeitos antidiabéticos mais pronunciados em relação ao WPI não fortificado, principalmente no controle glicêmico de animais diabéticos induzidos por estreptozotocina. Importantes efeitos antioxidantes in vitro e in vivo foram mostrados pela fração de Stevia ASF, o que contribuiu de forma expressiva para fortificar o WPI. Este estudo pioneiro mostra que a ASF pode ser usada para enriquecer as propriedades antioxidantes e antidiabéticas do WPI. A avaliação da extração e do fracionamento desta planta utilizando diferentes solventes e metodologias, resultou em extratos de diferentes capacidades antioxidantes, que podem ser utilizados para enriquecer a literatura e contribuir para sua aplicação em alimentos, produtos farmacêuticos e cosméticos. Uma dieta rica em antioxidantes pode contribuir significativamente para prevenir doenças degenerativas, doenças cardiovasculares e metabólicas, como o diabetes mellitus. Assim, os alimentos naturais e industrializados enriquecidos com flavonoides e compostos fenólicos contribuem para a redução dessas doenças. O presente estudo mostrou que os extratos de etanol, metanol e acetato de etilo de folhas de Stevia rebaudiana (Stevia UEM-13) possuem um grande potencial antioxidante e podem ser usados como possíveis aditivos para melhorar a funcionalidade de alimentos e bebidas. Por meio dos processos de separação das membranas, foi possível obter a partir do soro do leite, um isolado (WPI) com uma concentração importante de proteínas. A fração Stevia, ASF, obtida com 3,82% de rendimento, exibiu compostos fenólicos como principais constituintes. Os principais ácidos fenólicos e flavonoides identificados na ASF estão de acordo com a literatura. A ASF na concentração de 0,2% promoveu aumento de 80% na atividade antioxidante WPI. Os testes fisiológicos mostraram que os três suplementos (ASF, WPI e WPI + ASF) foram benéficos para melhorar o controle metabólico de ratos diabéticos. O WPI fortificado com ASF foi o suplemento alimentar com maior funcionalidade, mostrando que a ASF tem potencial para ser utilizada como fortificador da atividade antioxidante e antidiabética de alimentos como o WPI, e possivelmente enriquecendo outros alimentos ou suplementos. [70] f

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências dos Alimentos, Florianópolis, 2017. Stevia rebaudiana (Bert.) é uma planta que vem atraindo o interesse da indústria e da comunidade científica nos últimos anos devido aos efeitos do extrato de estévia quanto a sua atividade antioxidante, anti-hiperglicêmica, antimicrobiana e adoçante. Dessa forma, a adição de extrato de S. rebaudiana (Bert.) com o intuito de enriquecer produtos como o iogurte torna-se interessante. Os principais objetivos deste trabalho foram avaliar o comportamento do iogurte incorporado de extrato liofilizado de estévia (FSE) quanto aos aspectos físico-químicos, microbiológicos e ao teor de compostos fenólicos totais (CFT) e atividade antioxidante nos dias 1, 15 e 30 de armazenamento a 4 ± 2 ° C, bem como avaliar a atividade antioxidante através dos métodos FRAP e ABTS e a bioacessibilidade dos compostos fenólicos durante a simulação gastrointestinal in vitro após 30 dias de armazenamento. Foram avaliados iogurtes enriquecidos com 0,25 % e 0,5 % (m/m) de extrato de estévia e um iogurte controle (sem adição de extrato). Tanto a adição quanto a quantidade de FSE adicionado no iogurte contribuíram para o aumento da atividade antioxidante, do teor de CFT, dos parâmetros de cor (a* e b*) e do teor de sólidos totais dos iogurtes. Por outro lado, a acidez, o pH, a sinerese e as contagens de S. thermophilus e L. bulgaricus do produto final não foram significativamente afetadas (p > 0,05). A amostra enriquecida com 0,5 % de FSE apresentou os maiores valores para CFT, ABTS e FRAP. Ao longo do tempo de armazenamento, o teor de de sólidos totais, a sinerese, a cor e o teor de CFT das amostras adicionadas de FSE permaneceram estáveis, enquanto que a atividade antioxidante e o pH diminuíram significativamente. Após a simulação da digestão in vitro, a bioacessibilidade dos compostos fenólicos e a atividade antioxidante dos iogurtes enriquecidos aumentou cerca de 2,5 e 7,5 vezes, respectivamente, em relação às frações não digeridas. Assim, comprova-se que o enriquecimento do iogurte com extrato de estévia aumenta as propriedades antioxidantes e o teor de compostos fenólicos do iogurte, podendo ser uma opção promissora para o desenvolvimento de alimentos funcionais. Abstract : Stevia rebaudiana (Bert.) is a plant that has been attracting the interest of industry and the scientific community in recent years due to the effects of the stevia extract on its antioxidant , antihyperglycemic, antihypertensive, antimicrobial activity and sweetener. In this way, it became interesting to add extracts such as S. rebaudiana (Bert.) in order to enrich products such as yogurt. The main objectives of this work were to evaluate the behavior of the incorporated yogurt of freeze-dried stevia extract (FSE) regarding the physicochemical, microbiological and total phenolic compounds (CFT) and antioxidant activity on days 1,15 and 30 of storage at 4 ± 2 °C, in addition to evaluating the antioxidant activity through the FRAP and ABTS methods and the bioaccessibility of the phenolics during in vitro gastrointestinal simulation at the end of the shelf life (day 30). The yogurts enriched with 0,25 and 0,5 % (w / w) of stevia extract and the control sample (without extract) were evaluated. The incorporation of FSE and the percentage of addition contributed to increase antioxidant activity, CFT, color parameters (increased values for a* and b* and decreased value for L *) and total solids; while the acidity, pH, syneresis and counts of S. thermophilus and L. bulgaricus of the final product were not significantly affected (p> 0,05). The sample enriched with 0.5 % FSE presented the highest values for CFT, ABTS and FRAP. Throughout the storage time, the parameters of total solids, syneresis, color and CFT of the samples added of FSE remained stable, whereas the antioxidant activity and pH decreased significantly. After in vitro digestion simulation, the bioaccessibility of the CFT and the antioxidant activity of the enriched yogurts increased by 2,5 and 7,5 times, respectively, in relation to the undigested fractions. Thus, it is proven that the enrichment of yogurt with stevia extract actually increases the antioxidant properties and the amount of phenolic compounds of the yogurt, being to be a promising option for the development of functional foods.

Orientador: Prof.ª Dr.ª Cecília Edna Mareze da Costa Dissertação (mestrado em Ciências Fisiológicas)--Universidade Estadual de Maringá, 2017 Resumo: A Stevia rebaudiana além de ser uma fonte de adoçantes não calóricos é, também, importante fonte de moléculas bioativas. Este trabalho investigou, primeiramente, o efeito do extrato etanólico (EET) e das frações clorofórmica (FCL) e de acetato de etila (FAE), obtidas das folhas da stevia, na secreção de insulina de ilhotas isoladas de ratos. Os resultados obtidos nestes estudos iniciais e o fato da FAE ser rica em compostos fenólicos, apresentar alto conteúdo protéico e ser praticamente isenta de glicosídeos edulcorantes, determinou que esta fosse a fração selecionada para os testes subsequentes que foram realizados neste trabalho. Este é o primeiro trabalho que avalia os efeitos de uma fração de stevia com tais características na secreção de insulina e possíveis mecanismos, no metabolismo da glicose em hepatócitos isolados e na tolerância à glicose in vivo. Os resultados obtidos com as ilhotas isoladas de ratos normais mostraram que a FAE estimula a secreção de insulina apenas na presença de concentrações altas de glicose e de forma cálcio dependente, por mecanismos não totalmente esclarecidos, mas que parecem envolver canais de potássio sensíveis a ATP e receptores colinérgicos M3 e adrenérgicos a2. No estudo com hepatócitos, isolados de ratos em estado alimentado, foi observado que FAE estimula a glicólise, não interfere na glicogenólise e causa aumento na razão NADH/NAD+. O teste oral de tolerância à glicose mostrou que a FAE melhora a tolerância à glicose Abstract: Stevia rebaudiana, besides being a source of non-caloric sweeteners, is also an important source of bioactive molecules. This work first investigated the effect of ethanolic extract (ETE), chloroform (CLF) and ethyl acetate (EAF) fractions, obtained from stevia leaves, on the insulin secretion of islets isolated from rats. The results obtained from this study and the fact that FAE is rich in phenolic compounds, present high protein content and practically free of sweetening glycosides, determined that this was the fraction selected for the subsequent tests performed in this work. This is the first work to evaluate the effects of a stevia fraction with such characteristics on insulin secretion mechanisms, glucose metabolism in isolated hepatocytes, and in vivo glucose tolerance. The results obtained with islets isolated from normal rats showed that FAE stimulates insulin secretion only in the presence of high glucose and calcium dependent concentrations, by mechanisms not fully understood, but which seem to involve ATP-sensitive potassium channels and M3 cholinergic receptors and a2 adrenergic receptors. In the study with hepatocytes isolated from fed rats, it was observed that FAE stimulates glycolysis, does not interfere with glycogenolysis, and causes an increase in the NADH/NAD+ ratio. The oral glucose tolerance test has shown that FAE improves glucose tolerance

Orientador: Prof. Dr. Cícero Deschamps Coorientadores: Profª. Drª. Erika Amano e Prof. Dr. Volnei Pauletti Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 21/02/2017 Inclui referências Área de concentração: Produção vegetal Resumo: Stevia rebaudiana Bertoni é uma espécie vegetal cuja importância comercial está ligada à produção de metabólitos secundários denominados glicosídeos diterpênicos, moléculas sem valor calórico e com alto potencial adoçante. Dentre os glicosídeos diterpênicos os que ocorrem em maior quantidade e possuem valor comercial mais elevado são o esteviosídeo e rebaudiosídeo A. O objetivo geral do presente estudo foi avaliar a influência de épocas de colheita, espaçamentos e aplicação de doses de fertilizante de liberação controlada nos aspectos fisiológicos e produtivos de um acesso de estévia. Para tal foram realizados dois experimentos, organizados em quatro capítulos. O primeiro capítulo descreve o efeito de diferentes densidades de plantio e épocas de colheita nas características produtivas, fisiológicas e bioquímicas da espécie em condições de campo. Foram testadas três densidades de plantio (166.667; 83.333; e 33.333 plantas ha-1) e três épocas de colheita (antes, no início e a pleno florescimento). A interação entre a densidade de 166.667 plantas ha-1 e a colheita no início do florescimento promoveu maiores produtividades de rebaudiosídeo A (43,22 kg ha-1) e esteviosídeo (73,21 kg ha-1), bem como maior relação rebaudiosídeo A/ esteviosídeo (0,60). O segundo capítulo teve por objetivo avaliar adaptações anatômicas e produção de glicosídeos diterpênicos em segmentos apicais, medianos e basais de plantas cultivadas nas densidades de plantio descritas para o capítulo anterior. A competição entre plantas nas diferentes densidades promoveu alterações estruturais na espessura do limbo foliar e densidade de tricomas tectores e glandulares. Os teores de rebaudiosídeo A e esteviosídeo não demonstraram relação com os caracteres anatômicos avaliados, apresentando tendência de maior acúmulo em folhas da região mediana. A maior disponibilidade de luz no espaçamento menos adensado em interação com a região apical promoveu maiores teores de rebaudiosídeo A (35,59 mg g-1), enquanto que o esteviosídeo mostrou tendência de maior acúmulo na região mediana da planta. No terceiro capítulo, relata-se a resposta nutricional da espécie quando submetida a doses de 0; 62,5; 125; 250; 500 e 1000 mg dm-3 de do fertilizante de liberação controlada (Basacote® Mini 6M), incorporado ao solo em condições de casa de vegetação. O teor médio de nitrogênio nas folhas foi de 23,68 g kg-1. A similaridade nas respostas, especialmente entre magnésio e fósforo, evidenciam um efeito de sinergismo. A diminuição na eficiência de utilização de cálcio e potássio em doses mais elevadas está relacionada ao aumento em seus conteúdos foliares e leve decréscimo no acúmulo de biomassa nessas condições. O quarto capítulo versa sobre o efeito das mesmas doses do fertilizante nos aspectos produtivos de Stevia rebaudiana. As doses de máxima eficiência técnica para produção de esteviosídeo e rebaudiosídeo A foram de 625,04 e 640,17 mg dm-3 do Basacote® Mini 6M, respectivamente. O alto custo dos fertilizantes de liberação controlada faz necessário o estudo da viabilidade econômica para utilização desta tecnologia no cultivo de estévia. Palvras-chave: Basacote®, estévia, esteviosídeo, rebaudiosídeo A, tricomas Abstract: Stevia rebaudiana Bertoni is a plant species whose commercial importance is linked to the production of secondary metabolites called diterpene glycosides, molecules with no calorific value and high sweetening potential. Among the diterpene glycosides, stevioside and rebaudioside A occur in greater quantity and have a higher commercial value. The general objective of the present study was to evaluate the influence of harvesting times, spacing and application of controlled release fertilizer doses on the physiological and productive aspects of a stevia accession. Two experiments were carried out and organized in four chapters. The first chapter aimed to evaluate the effect of different planting densities and harvesting times on the productive, physiological and biochemical characteristics of the species under field conditions. Three planting densities (166667, 83333 and 33333 plants ha-1) and three harvesting times (before, at the onset and at full flowering) were tested. The interaction between the density of 166667 plants ha-1 and harvesting at the onset of flowering promoted higher yields of rebaudioside A (43.22 kg ha-1) and stevioside (73.21 kg ha-1), as well as higher rebaudioside A / stevioside ratio (0.60). The second chapter aimed to evaluate anatomical adaptations and production of diterpene glycosides in apical, median and basal segments of plants grown at the planting densities described for the previous chapter. The competition between plants at different spacings promoted structural changes in leaf limb thickness and density of glandular and non-glandular trichomes. The levels of rebaudioside A and stevioside did not show any relation with the adaptations and anatomical characters evaluated, showing tendency of greater accumulation in leaves of the median region. The greater availability of light in the less densely spaced planting associated with the apical region, promoted higher levels of rebaudioside A (35.59 mg g-1), whereas stevioside showed a tendency of greater accumulation in the median region of the plant. In the third chapter, we report the nutritional response of the species when submitted to doses of 0; 62.5; 125; 250; 500 and 1000 mg dm-3 of the controlled release fertilizer (Basacote® Mini 6M), incorporated into the soil under greenhouse conditions. The average nitrogen content in leaves was 23.68 g kg-1. The similarity in the responses, especially between magnesium and phosphorus, evidences an effect of synergism. The decrease in the calcium and potassium efficiency of utilization in higher doses is related to the increase on its leaf contents and slight decrease of biomass accumulation under these conditions. The fourth chapter describes the effect of the same doses of fertilizer on the productive aspects of Stevia rebaudiana. The maximum technical efficiency doses for stevioside and rebaudioside A were 625.04 and 640.17 mg dm-3 of Basacote® Mini 6M, respectively. The high cost of controlled release fertilizers makes it necessary to study the economic feasibility of using this technology in stevia cultivation. Key words: Basacote®, rebaudioside A, stevia, stevioside, trichomes.

A major concern about public health is the control of obesity. The search for new natural sweeteners, as an alternative to synthetic compounds like cyclamates or aspartame, brought Stevia rebaudiana (Compositae), a sweet plant native to South America, to the attention of the scientific community. S. rebaudiana has been produced mainly for its stevioside compounds but it contains other metabolites with potential therapeutic benefits such as alkaloids, hydroxycinnamic acids, oligosaccharides or essential oils. The characterization of the chemical profile of micropropagated plants, as well as greenhouse and field grown plants, is important to ensure the quality of the plants to supply to Stevia growers. Multiplication rate and fresh weight were determined for plants micropropagated in MS media A with sucrose (20g.L-1) and without growth regulators and MS media B with kinetin (0.5mg.L-1) and sucrose (20g.L-1). Apart from spontaneous rooting rate determination, induction of plant rooting by auxin shock, using IBA (2mg.mL-1), was also evaluated. Acclimatization in greenhouse was performed with hydro atomization nozzles working every 10 minutes. Plants on the field were fertilized by a nutrient solution with N, P2O5, K2O and B. In vitro multiplication rate was 300% per month, fresh weigh after a 4 week subculture was 0.9g. Spontaneous rooting rate was less than 4% after 4 months but induced rooting achieved 30% of plants with developed root system after 1 week and 70% after 2 weeks. Acclimatization rate was 100% after 2 weeks. Acclimatization was performed in greenhouse with 360º hidroatomizing spires working each 10 minutes and the acclimation rate in the greenhouse was of 100% for both medium after 2 weeks. There were extraction of essential oils with Clevenger apparatus for Yield purposes with average yield values below 0.6 %. In Clevenger, six samples were from Vilariça region and two from micro propagation, one was MS medium without growth regulators and the other was MS medium with 0.5 mg/L kinetin. In LN the extractions from four different sources, that are represented in figure 6. The essential oil identification was between 75,5 and 83% for the three samples and the results are not very different in the compounds. Volatiles identification revealed identical composition in all samples, with α-pinene (11-31%), bicyclogermacrene (5 19%), trans-β-farnesene (7-15%), β-elemene (6-10%) and β-caryophyllene (3-10%) as major compounds. Cultivated Stevia shows the higher value in the sequiterpenes hydrocarbons (54,4%), oxygen-contaning monoterpenes (3,2%) and oxygen-contaning sequiterpenes (7,1%). In vitro Stevia Media A and B the value are only very different in monoterpene hydrocarbons and other compounds, but the other value are very similar or exactly the same. In general cultivated and greenhouse. Stevia have higher values for sequiterpenes and the in vitro Stevia have higher values for monoterpenes. The authors are grateful to strategic project PRODER nº 46025 - Gestão Sustentável da Produção de Plantas Aromáticas e Medicinais, and PRODER nº 46207 - Adaptação cultural de hortelã-vulgar e Stévia. This study was partially funded also by FCT, under UID/AMB/50017/2013. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:26:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-13. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:45:45Z : No. of bitstreams: 1 000846969.pdf: 1209822 bytes, checksum: f6c6e10493f32be41e7b2221b8071921 (MD5) Com o aumento no interesse por produtos naturais o estudo de plantas medicinais nativas tornou-se relevante quanto aos componentes fitoquímicos e as atividades biológicas desconhecidas, em contraste com plantas nativas da Europa, que já foram exaustivamente estudadas. O presente estudo foi dividido em três artigos, a temática dos dois primeiros artigos foi a caracterização bioquímica de espécies nativas do gênero Nectandra. Durante um ano foram realizadas coletas, no meio de cada estação do ano, de folhas e cascas das espécies Nectandra lanceolata, Nectandra grandiflora e Nectandra megapotânica, na Fazenda experimental Edgárdia e Fazenda Lageado pertencentes ao Campus Botucatu - Unesp, situadas no município de Botucatu, São Paulo. O primeiro artigo objetivou avaliar a efeito da sazonalidade nos teores de compostos fenólicos e na atividade antioxidante em folhas e cascas de Nectandras. Os resultados evidenciaram que a época de coleta influenciou a presença de compostos fenólicos nas espécies nas diferentes partes da planta, dando-se um maior destaque para a espécie N. megapotâmica. Assim como, para a atividade antioxidante, cuja espécie em evidência foi N. lanceolata. O segundo artigo avaliou a influência da sazonalidade no teor, caracterização química e atividade antimicrobiana frente à cepas de Escherichia coli sp. e Staphylococcus aureus sp. Os resultados deste estudo mostraram que as espécies N. grandiflora e N. lanceolata apresentaram muita semelhança em seus compostos voláteis durante o ano, diferentemente da N. megapotâmica. As espécies N. megapotâmica e N. lanceolata se mostraram promissoras quanto à atividade antibacteriana. O terceiro artigo, realizado durante o estágio de Doutorado Sanduiche em Padova, visou avaliar o efeito das diferentes doses de macronutrientes (NPK) no ... The growing of the interest in natural products, the study about native medicinal plants has been relevant as the phytochemical constituents and biological activities, in contrast to Europe plants, which have been extensively studied. This study was divided into three articles, the theme of the first two articles was the biochemical characterization of native species of Nectandra genre. For a year have been collected, in the middle of each season, leaves and bark of the species Nectandra lanceolata, Nectandra grandiflora and Nectandra megapotâmica in the Edgardia Farm and Lageado Farm belonging to the Campus Botucatu - UNESP, located in Botucatu, Sao Paulo. The first article aimed to evaluate the effect of seasonality in phenolic content and antioxidant activity in leaves and barck of Nectandras. The results showed that the sampling time influenced the presence of phenolic compounds in the species in different parts of the plant, giving greater prominence to the species N. megapotamica. As for the antioxidant activity whose species was evidence N. lanceolata. The second article assessed the influence of seasonality in content, chemical and antimicrobial activity of strains of Escherichia coli sp. and Staphylococcus aureus sp. The results of this study showed that species N. grandiflora and N. lanceolata showed a lot of similarity in their volatile compounds during the year, differently of N. megapotamica. The species N. megapotamica and N. lanceolata proved promising on the antibacterial activity. The third article, accomplished during Sanduiche Doctoral stage in Padova, aimed to evaluate the effect of different doses of macronutrients (NPK) on the yield and quality of Stevia rebaudiana Berth. The experiment was conducted during the summer season in Italy in greenhouse, with a factorial split-splot 3 x 3 x3. The most ...

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Stevia rebaudiana is a perennial plant, native to South America; it has natural sweeteners (steviol glycosides) on their leaves free of calories, very sweet and could be replaced by sucrose without presenting problems to diabetic people diet. Stevia cultivation is widespread all over the world under different weather conditions and the environmental factors could affect the stevia yield. The aims of this study were to evaluate dry weight and sweetener concentration in Stevia rebaudiana leaves during different periods in the year to determinate the best time for harvesting and to verify the influence of environmental conditions in the sweeteners yield. The first trial was carried out during 2012/2013 agricultural year. In total 120 plants were selected and divided in six groups with 20 plants each. Twelve harvests were performed and the higher yield was reached in December at the first harvest for groups 3, 4 and 2 (292.4; 285.2 and 206.7 g m-2, respectively). The sweetener concentrations have differentiated between the date of the harvest and the compounds analysed. The highest concentrations of stevioside (12.16% and 11.36%) and rebaudioside C (2.95% e 1.95%) were found during the harvest in January while the sweetener rebaudioside A, the highest concentrations were 7.01%; 6.16% and 6.15% in December, February and March, respectively. The heighest stevioside concentrations (per cent) (12.16% and 11.36%) and rebaudioside C (2.95% and 1.95%) were found to the harvest done in January, whereas to rebaudioside A, the heighest concentration were in December (7.01%); February (6.16%) and March (6.15%). Photoperiod has influenced the number of days for each harvest as well as the sweetener concentration on the leaves. The second trial seven genotypes were tested by plants already established on the field. The higher yield of dry mass was found during the harvest in March and the sweetener concentrations have decreased to the second harvest comparing to the first one. The highest sweetener concentrations of stevioside in the first harvest were with the genotypes C1, C4 and C8 (11.24; 11.14 and 10.32%, respectively) and genotype C6 has presented the highest rebaudioside A and C concentrations (8.94 and 1.96% respectively). Originária da América do Sul, Stevia rebaudiana é uma planta arbustiva perene que possui edulcorantes naturais (glicosídeos de esteviol) com alto poder adoçante em suas folhas, livre de calorias, podendo substituir a sacarose sem apresentar problemas na dieta de pessoas diabéticas. O cultivo de estévia é difundido em muitos países e os fatores climáticos podem influenciar significativamente o resultado de produtividade desta cultura. Os objetivos deste estudo foram avaliar massa seca e concetração de edulcorantes em folhas de estévia (Stevia rebaudiana) em diferentes períodos do ano para determinar a melhor época para a colheita e, verificar a influência dos fatores climáticos na quantidade dos edulcorantes. Os experimentos foram realizados nos anos agrícolas 2011/2012 e 2012/2013. No primeiro experimento 120 plantas foram divididas em seis grupos de 20 plantas cada. Doze cortes foram realizados, sendo a maior produtividade alcançada no mês de dezembro nos primeiros cortes dos grupos 3, 4 e 2 (292,4; 285,2 e 206,7 g m-2, respectivamente). A concentração dos edulcorantes nas folhas de estévia variou entre os períodos dos cortes e entre os compostos analisados. As concentrações mais altas de esteviosídeo (12,16% e 11,36%) e rebaudiosídeo C (2,95% e 1,95%) foram nas colheitas realizadas em janeiro, enquanto que para o rebaudiosídeo A (7,01%; 6,16% e 6,15%), as maiores porcentagens foram alcançadas nos meses de dezembro, fevereiro e março. O fotoperíodo influenciou o número de dias para o corte realizado bem como a concentração de edulcorantes nas folhas. No segundo experimento foram testados sete genótipos selecionados a partir de plantas já estabelecidas. A maior produtividade de massa seca foi encontrada no corte realizado no mês de março e, as concentrações dos edulcorantes diminuíram no segundo corte em todos os genótipos. As porcentagens mais altas de esteviosídeo no primeiro corte foram nos genótipos C1, C4 e C8 (11,24; 11,14 e 10,32%, respectivamente) e, o genótipo C6 apresentou as maiores concentrações de rebaudiosídeo A e C (8,94 e 1,96% respectivamente).

Orientador : Prof. Dr. Bras Heleno de Oliveira Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Química. Defesa: Curitiba, 2007 Inclui bibliografia

Orientador: Sylvio Luis Honorio Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola Resumo: A Stevia rebaudiana, um arbusto que tem na produção de esteviosídeos seu principal produto de interesse, foi objeto deste trabalho. Considerando sua cadeia produtiva, existem lacunas que necessitam pesquisas, tanto no aspecto agronômico, como o emprego de espécies fúngicas micorrízicas, quanto procedimentos pós-colheita, dos quais a secagem é um dos fatores. O presente trabalho teve como objetivos, identificar uma espécie de fungo micorrízico arbuscular eficiente e sua relação com o desenvolvimento e concentração de esteviosídeos em plantas de estévia, cultivadas em campo, hidroponia e aeroponia, selecionar substrato adequado para o desenvolvimento da colonização micorrízica, avaliar sistemas de secagem no teor de esteviosídeos e determinar as isotermas de sorção da estévia. Para seleção de fungo micorrízico foram testadas sete espécies, sendo cinco de um banco de culturas e duas isoladas da própria cultura da estévia. O ensaio foi conduzido em casa de vegetação em vasos com solo esterilizado e cinco repetições. Foram determinados a massa seca total da parte aérea e de folhas, teor e quantidade acumulada de esteviosídeos nas folhas e colonização micorrízica. Para seleção de substratos, foram testados nove produtos comerciais, utilizando-se como planta indicadora uma gramínea (Brachiaria humidicola) e como parâmetro avaliado a taxa de colonização fúngica no sistema radicular. Plantas de estévia inoculadas ou não com o fungo micorrízico Glomus intraradices foram cultivadas em três sistemas distintos, campo, aeroponia e hidroponia. Foram realizadas três colheitas em épocas distintas e determinada a massa da matéria seca total da parte aérea e de folhas, teor e acúmulo de esteviosídeos nas folhas e colonização micorrízica. Foram testados três processos de secagem, ao sol, secador a gás e estufa elétrica com circulação forçada de ar, à temperatura de 45oC. Os processos foram avaliados em função do teor de esteviosídeos nas folhas. A determinação da umidade de equilíbrio nas folhas de estévia foi realizada nas temperaturas de 30 e 45oC e, as isotermas de sorção foram tratadas com os modelos matemáticos de BET, BET linear, Peleg, GAB, Halsey, Langmuir, Oswin, Henderson e Chung e Pfost. A espécie Glomus intraradices foi a mais eficiente para o desenvolvimento da estévia e acumulação de esteviosídeos. O substrato Rendmax Citrus sem adubação propiciou as melhores condições para a colonização micorrízica nas raízes da gramínea. Dentre os sistemas de cultivo estudados a hidroponia mostrou-se o menos eficiente para o cultivo de estévia. Em aeroponia obteve-se maior produtividade em termos de matéria seca da parte aérea, enquanto no campo maior quantidade acumulada de esteviosídeos. Não se observou diferença entre a secagem na estufa e no secador para qualquer das épocas de colheita. O teor de esteviosídeos nas folhas de plantas secadas ao sol foi sempre inferior, com perda de até 20% em relação aos outros dois sistemas. Os modelos que apresentaram melhor ajuste, nas temperaturas de 30 e 45oC, foram GAB e HALSEY. O modelo BET LINEAR também mostrou bom ajuste, mas somente para a temperatura de 45oC Abstract: Stevia rebaudiana, a shrub mostly interesting for its production of steviosides, was the object of this work. In regard to its productive chain, further researches must be done, not only in agronomical aspects, but also in the utilization of mycorrhizal fungal species, as well as in the post-harvest processes, namely the drying one. The present work aimed at the identification of an efficient arbuscular mycorrhizal fungal species and its influence in the development and concentration of steviosides in stevia plants grown in hydroponic and aeroponic systems; to select an adequate substrate for the development of mycorrhizal fungi; to evaluate drying systems in steviosides rates and to determine stevia?s isotherms of sorption. For the mycorrhizal fungi selection seven species were tested, five from a germplasm bank and two were isolated from their own stevia culture. Five assays in pots with sterilized soil were carried out in a greenhouse. The total dry mass of the aerial parts and of the leaves, the rate and accumulated quantity of steviosides in the leaves as well as the mycorrhizal colonization were determined. Nine commercial substrates were tested for the rate of colonization of the root system of an indicating gramineous plant (Brachiaria humidicola). Stevia plants that were inoculated (or not) with the mycorrhizal fungus Glomus intraradices were cultivated in three different growing systems, field, aeroponic and hydroponic. Three harvests were carried out in different periods and the total dry mass of the branch and leaves sections, contents and accumulated steviosides in the leaves and mycorrhizal colonization were determined. Three processes for drying leaves were tested: by sunlight, gas dryer and electrical stove with forced air circulation, at 45oC. The processes were evaluated in relation to the steviosides rate of the leaves. The equilibrium moisture content for stevia leaves was done at 30oC and 45oC, while the isotherms of sorption were tested for the best fit by mathematical models of BET, BET linear, Peleg, Gab, Halsey, Langmuir, Oswin, Henderson and Chung and Pfost. The Glomus intraradices species was the most efficient for the stevia development and accumulation of steviosides. The Rendmax Citrus substrate without manure rendered the best conditions for the mycorrhizal colonization in the gramineous roots. Among the growing systems studied, hydroponics turned out to be the least efficient for stevia cultivation. Aeroponics brought the highest production in terms of dry mass from the aerial parts, while in the field a larger accumulated quantity of steviosides was obtained. No difference was observed between the stove and gas drying processes at any of the harvesting periods. The steviosides rate from the leaves dried by sunlight was always inferior, coming to a loss of 20% in relation to the others. The best fit models were GAB and HALSEY. The BET LINEAR fitted by 45ºC Doutorado Tecnologia Pós-Colheita Doutor em Engenharia Agrícola

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:21:16Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:44:30Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-21244492047.pdf: 753335 bytes, checksum: 9bf9b40b3531b3fb19ef088dce7d2e9b (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:21:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-02-01 The microorganism Sclerotinia was isolated from roots of Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni in plantations in the northwest of Parana and submitted to the cultivation in the presence of extracts and vegetable balsams of Tarragon (Artemisia draconculus), Thyme (Thymus vulgaris), Manjerona (Origanum majorona), Mint citrata (Mintpiperita var. citrata), Purple Basil (Ocimum basilicum L.), Andiroba (Carapa guanensis) and Copaíba (Copaifera reticulata Ducke). The first five oils were extracted by steam drags, after the drying of the vegetable in greenhouse with circulation of air at 45°C. The last two were used in natura. A suspension (100ìl) of fungus previously cultivated, was added to each plate. The results show that after 7 days of incubation the thyme oils 10ìl, purple basil 25ìl, manjerona 25ìl, mint citrata 50ìl, tarragon 50ìl were capable to inhibit the growth of Sclerotinia, while the andiroba oil only reached this result with 200ìl. The copaiba balsam, even in the concentration of 500ìl, was unable to inhibit the growth of the microorganism. Núcleo de Pesquisa em Produtos Naturais Departamento de Bioquímica Universidade Estadual de Maringá - UEM, Av. Colombo 5790, CEP 87020-900- Maringá - PR Departamento de Botânica Universidade Estadual Paulista - UNESP, CEP 18618-000 - Botucatu - SP Departamento de Botânica Universidade Estadual Paulista - UNESP, CEP 18618-000 - Botucatu - SP

Anexos Orientador: Brás Heleno de Oliveira Dissertação(mestrado)- Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Exatas. Curso de Pós-Graduação em Química Inclui bibliografia Resumo: Este trabalho teve como finalidade a obtenção de compostos orgânicos com possível atividade reguladora de crescimento vegetal. Para isso foram utilizados diterpenóides tetracíclicos naturais como material de partida e os produtos finais foram obtidos mediante transformações orgânicas clássicas e também por biotransformações. Para determinar a atividade reguladora vegetal dos produtos obtidos, estes foram submetidos a um ensaio com sementes de alface, com o intuito de verificar o crescimento do hipocótilo. Os resultados foram determinados por técnicas espectroscópicas, tais como IV, RMN¹ H e 13C. Palavras-chave: Diterpenóides; Biotransformação de Diterpenos; Biotransformação do esteviol; Regulador de crescimento vegetal. Abstract: This work had the objective of obtaining organic compounds with plant growth regulator properties. Natural tetracyclic diterpenoids were used as starting materials and the products were obtained by classical organic reactions or by biotransformations. The structural determinations were based on spectroscopical analysis. In order to determine the plant growth regulator activity, the compounds were submited to the lettuce hypocotyl assay. Key words, diterpenoids; stevioside; steviol; biotransformation, plant growth regulator.

Conduziu-se experimento objetivando descrever sintomas visuais de deficiências de macronutrientes em estévia (Stevia rebaudiana) e avaliar seus efeitos no crescimento, composição química e produção de esteviosídeo. Os sintomas foram: clorose generalizada, com -N; folhas verde-escuras, com -P; folhas com clorose, bronzeamento e necrose, com -K; necrose de ápices, com -Ca; clorose e necrose foliar, em "V" invertido, com -Mg e folhas verde-pálidas e menores, com -S. As deficiências de N, K e Mg reduziram o crescimento das folhas e a parte comercializável da planta, enquanto que a deficiência de Mg promoveu acentuada redução no desenvolvimento do sistema radicular. As deficiências de N, P, K e S diminuíram a relação entre matéria seca da parte aérea e das raízes, enquanto a deficiência de Mg aumentou-a. Todas as deficiências causaram a diminuição na absorção de macronutrientes, exceto a de Ca, que reduziu somente a absorção de Ca, e a de K, que não alterou as absorções de Mg e S. A composição química dos cinco últimos pares de folhas totalmente expandidas representou bem o estado nutricional da planta. As deficiências de K, Ca e S reduziram somente o teor de esteviosídeo, enquanto todas as deficiências, exceto a de P, diminuíram o conteúdo de esteviosídeo. This experiment was carried out to describe visual symptoms of macronutrients deficiencies in Stevia rebaudiana, and the effects of these deficiencies on growth, chemical composition and stevioside production. The symptoms were: yellowing with -N; dark green leaves with -P; clorotic, mottled, and necrotic leaves, with -K; apical necrosis, with -Ca; leaves with clorosis and necrosis in inverted "V" shape, with -Mg, and small pale green leaves, with -S. N, K, and Mg deficiencies reduced the leaf growth, therefore the plant marketable part. Mg deficiency caused greater reduction on the development of the radicular system. N, P, K, and S deficiencies decreasead the shoot:root dry weigth ratio, while Mg deficiency increased it. All deficiencies decreased the absorption of macronutrients, except of Ca, which reduced only the absorption of Ca, and K, that did not affect the absorption of Mg and S. The chemical content of the last five fully expanded leaf pairs showed good correlation with the plant nutritional status. The deficiencies of K, Ca, and S decreased the concentration of stevioside while all deficiencies, except of P, decreased the stevioside content.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:52:58Z No. of bitstreams: 0 Made available in DSpace on 2013-08-22T18:52:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-05-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:44:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-05-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:23:38Z No. of bitstreams: 0 Made available in DSpace on 2014-05-20T13:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-05-01 O extrato de folhas de estévia (Stevia rebaudiana Bertoni) é o único edulcorante utilizado na substituição da sacarose, que pode ser produzido totalmente no Brasil. O objetivo deste estudo foi determinar os comportamentos de características temporais dos estímulos doce e amargo da estevia em doçuras equivalentes a soluções de sacarose (DESS) a 3 e 10%. As curvas tempo-intensidade (T-I) para cada substância foram coletadas utilizando-se o programa Sistema de Coleta de Dados Tempo-Intensidade - SCDTI para Windows, onde os provadores registravam com auxílio do mouse a percepção de cada estímulo solicitado em função do tempo, para cada amostra. Os parâmetros das curvas T-I coletados foram: tempo de intensidade máxima (TImax), intensidade máxima (Imax), tempo onde a intensidade máxima começa a declinar (Td), tempo de platô (Platô), área sob a curva (Área) e tempo total de duração do estímulo (Ttot). Os parâmetros Td, Ttot, Área e Platô das curvas T-I para o estímulo doce nos dois níveis de doçura foram significativamente superiores para estévia, enquanto TImax e Imax foram significativamente menores (p£0,05), sendo que as diferenças entre os valores para as duas substâncias foram muito maiores a DESS a 10%. A sacarose não apresentou nenhum registro para o estímulo amargo tanto a 3 como a 10%, enquanto a estévia apresentou curvas T-I características, com intensidade e o tempo total de duração dependente da concentração. The extract of stevia leaves (Stevia rebaudiana Bertoni) is the only sweetener utilized in sucrose substitution which can be produced totally in Brazil. The objective of this study, was determine the temporal characteristic of sweet and bitter taste of stevia and compare with sucrose at 3 and 10% in the same equi-sweet. The time-intensity curves (T-I) for each substance were collected through the software Sistema de Coleta de Dados Tempo-Intensidade - SCDTI for Windows, where the judges recorded through of mouse the perception of each stimuli inside function of time, for each sample. The parameters of T-I curves collected were: time for intensity maxim (TImax), intensity maxim (Imax), time of decay (Td), time of plato (Platô), area under curve (Area) and total time of stimuli duration (Ttot). The parameters Td, Ttot, Area e Plato of T-I curves, for stimuli sweet in both sweetness level, were significativelly superior for stevia, while Timax e Imax were significativelly inferior (p£0,05), at differences between value for both substances were superior DESS at 10%. Sucrose didn t present any record for simuli bitter as 3 as 10%, while stevia presented a characteristic T-I curve with intensity and total time of stimuli duration dependent of concentration. Universidade Estadual Paulista Universidade Estadual de Campinas Universidade Estadual Paulista

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:52:57Z No. of bitstreams: 0 Made available in DSpace on 2013-08-22T18:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:44:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:23:38Z No. of bitstreams: 0 Made available in DSpace on 2014-05-20T13:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1999-01-01 O extrato de folhas de estévia (Stévia rebaudiana Bertoni) é o único edulcorante utilizado na substituição da sacarose, que pode ser produzido totalmente no Brasil. Este trabalho objetivou determinar o comportamento de características temporais dos estímulos doce e amargo do extrato de estévia em doçuras equivalentes a soluções de sacarose (DESS) a 3 e 10%. As curvas tempo-intensidade (T-I) para cada substância foram coletadas utilizando-se o programa Sistema de Coleta de Dados Tempo-Intensidade - SCDTI para Windows, onde os provadores registravam com auxílio do mouse a percepção de cada estímulo solicitado em função do tempo, para cada amostra. Os parâmetros das curvas T-I determinados foram: tempo de intensidade máxima (TImax), intensidade máxima (Imax), tempo onde a intensidade máxima começa a declinar (Td), tempo de platô (Platô), área sob a curva (Área) e tempo total de duração do estímulo (Ttot). Os parâmetros Td, Ttot, Área e Platô das curvas T-I para o estímulo doce nos dois níveis de doçura significativamente foram superiores para o extrato de estévia, enquanto TImax e Imax foram significativamente menores (p£ 0,05). As diferenças entre os valores de sacarose e extrato de estévia foram muito maiores a DESS a 10%. A sacarose não apresentou nenhum registro para o estímulo amargo tanto a 3 como a 10%, enquanto a estévia apresentou curvas T-I características, com intensidade e o tempo total de duração dependente da concentração. The extract of stevia leaves (Stévia rebaudiana Bertoni) is the only sweetener utilized in sucrose substitution which can be totally produced in Brazil. The objective of this study, was determine the temporal characteristics of sweet and bitter taste of extract of stevia and compare then with those of sucrose at 3 and 10% in the same equi-sweet. The time-intensity curves (T-I) for each substance were made with the software Sistema de Coleta de Dados Tempo-Intensidade - SCDTI for Windows. The judges registered the perception of each stimuli as function of time for each sample using the mouse. The parameters of T-I curves collected were: Time for intensity maxim (TImax), intensity maxim (Imax), time of decay (Td), time of platô (Platô), area under curve (Area) and total time of stimuli duration (Ttot) were determined in T-I curves. The parameters Td, Ttot, Área e Platô of T-I curves, for stimuli sweet in both sweetness level, were significativelly superior for stevia, while TImax e Imax were significativelly inferior (p£ 0,05), at differences between value for both substances were superior DESS at 10%. Sucrose didn t present any record for simuli bitter in 3 or 10%, while stevia presented a characteristic T-I curve with intensity and total time of stimuli duration dependent on concentration. Universidade Estadual Paulista Universidade de Campinas Universidade Estadual Paulista

Dentre os edulcorantes presentes nas folhas da Stevia rebaudiana Bertoni destacam-se pela quantidade presente, o esteviosídeo e o rebaudiosídeo A. O esteviosídeo, em maior quantidade, tem sua aplicação industrial restrita em alguns segmentos, devido ao seu sabor amargo residual e sua baixa solubilidade. Avaliou-se a influência do rebaudiosídeo A na solubilidade e no sabor do esteviosídeo. Observou-se que um adoçante composto com no mínimo 12,5% de rebaudiosídeo A na massa total é solúvel em água e se mantém estável. O sabor amargo residual diminui a me dida que aumenta o teor de rebaudiosídeo A na mistura de adoçantes. The rebaudioside A and stevioside are sweeteners present in large quantity in the Stevia rebaudiana Bertoni leaves. The stevioside has a less application in food indrustries, because your lower solubility and bitter flavour. The influence of rebaudioside A in the solubility and flavour of stevioside were testing. The stability and solubility of the sweetener in water was achieved when the composition of rebaudioside A had the minimum value of the 12,5%. The bitter flavour decrease when the concentration of rebaudioside A increase in the sweetener mixture.

Orientador: Bras Heleno de Oliveira Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Parana Resumo: 0 estudo descrito nesta disserta~ao refere-se a sintese de compostos derivados do esteviosideo. 0 esteviosideo e urn glicosideo extraido da Stevia rebaudiana, fornecido pela Esteviafarma Inga Industrial S.A.. Da hidr6lise enzimatica deste composto foi obtido o esteviol, urn diterpeno acido tetraciclico com esqueleto caurenico, do qual foram obtidos alguns derivados. A bibliografia revisada mostrou que muitos diterpenos tetraciclicos naturais apresentam efeitos biol6gicos. Poucos foram os trabalhos encontrados de sintese de compostos semelhantes aos naturais na tentativa de reproduzir os seus efeitos. 0 trabalho teve como objetivo, portanto, a prepara~ao de alguns compostos com esqueleto caurenico, os quais supomos que possam apresentar atividades biol6gicas semelhantes aos modelos naturais descritos na literatura. Abstract: The studies discribed in this thesis refers to organic synthesis of stevioside. The steviside, a glucoside extracted from Stevia rebaudiana, was suplied by Steviafarma Inga Industrial S.A.. The enzymatic hydrolysis gave steviol, an acid tetraciclic kaurenic diterpenoid, from wich some derivatives were obtained. The bibliografic survey showed that many tetraciclic diterpenoids have important biological activity. A few papers were found on the synthesis of similar compounds. This work, therefore, had the objective to prepare some compounds with kaurenic skeleton whose we suppose will show biological activities similar to the models showed in the literature.

Orientador : Gil M. Felipe Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A 25 °C, os aquênios de Stevia rebaudiana Bert. são fotoblásticos positivos. Luzes verde e azul não afetaram a germinação, a qual era promovida por luz vermelha e inibida por vermelho extremo. Choques de vermelho extremo reverteram o efeito promotor de vermelho. O efeito promotor de vermelho não foi revertido pela luz azul. Em temperatura constante, sob luz branca, a melhor porcentagem de germinação ocorreu a 25 °C. As temperaturas de 5 e 40 °C inibiram totalmente a germinação. O efeito de temperaturas alternadas foi verificado em aquênios mantidos no escuro. Nenhum dos pares de temperaturas utilizados promoveu a germinação de Stevia no escuro. Ácido abscísico inibiu a germinação de aquênios mantidos em luz. Em aquênios mantidos no escuro constante, a germinação foi provida por ácido giberélico na concentração de 50 mg/l. Etrel e 6 benzil adenina em concentrações baixas não afetaram a germinação, enquanto que ácido indol-3-acético na concentração de 1 a 10 mg/l inibiu a germinação no escuro (em relação ao controle). A germinação a 25 ° C em luz branca foi sempre ao redor de 40 a 60 por cento. Pela clarificação dos aquênios foi demonstrado que apenas 40 a 60 dos aquênios escuros eram férteis... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: Achenes of Stevia rebaudiana have been shown to exhibit a positive photoblastic reaction at 25 °C. Germination is not affected by blue or green lights, but is promoted by red light and inhibited by far red light. Exposure to far red reverses the promotive effect of red light, whilst blue light has no such action. Under white light at constant temperature maximum germination rate occurs at 25 °C, and germination is completely inhibited at 5 °C and 40 °C. the effect of a varying temperature was investigated by maintaining achenes in darkness and comparing germination in a series of diurnal temperature ranges. None of these treatments promoted germination. Exposure to short periods of 45 °and likewise did not promote germination. It was established that abscisic acid inhibits germination in light whilst gibberellic acid at 50 mg/1 promoted germination in darkeness. Ethrel and 6-Benzyladenine at low concentrations did not affect germination but IAA at concentrations of 1 - 10 mg/l inhibited germination in darkness. Germination under white light at 25 °C was always of the order 40 - 60%. It was subsequently established by using a clearing-squash technique that only 40 - 60% of achenes have fully formed embryos, whilst the remainder are inviable due to mal-formation of the embryo... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations Mestrado Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Gil Martins Felippe Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Esta tese trata do levantamento das espécies nativas da série Multiaristatae do gênero Stevia Cav. O estudo taxonômico foi realizado de forma a determinar os mapas de distribuição do material examinando destas espécies no Brasil, a obter as características particulares de cada espécie e elaboras uma chave de identificação com o propósito de mostrar as iterrelações de Stevia rebaudiana (Bert.) com as espécies brasileiras deste gêneros. Paralelamente a esta revisão morfogeográfica, foi estudada a biologia de reprodução de S. rebaudiana e os resultados obtidos com três lotes de diferentes estoques foram comparados. Este estudo mostro que: 1) plantas dos três lotes são similares nas características morfológicas e reprodutivas;2) a técnica de diafanização permitiu acompanhar o desenvolvimento da flor e formação do fruto; 3) as flores apresentem-se protândricas e com as características típicas das tribo Eupatoriene; 4)os grãos de polém são normais, uniformes, tricolporados, trinucleados e com taxas de viabilidade ao redor de 80%, germinando ¿in vitro¿ em soluções de sacarose; 5) a técnica de omasculação, junto com o programa de polinizações manuais controladas mostram que a espécie é alógama e incapaz de autofertilização após autopolização manual.; 6) a observação da resenha de tubos polínicos ao lado das polinizações cruzadas e alguns caracteres morfológicos indicam a presença de autoincompatibilidade do tipo esporofítico em S. rebaudiana. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: This thesis deals with a survey of the native species of Stevia Cav., series Multiaristatae. The taxonomic study was done in order to estimate species distributions within Brazil, based on herbarium material, to show the particular characteristics of each species, and to elaborate an identification key with the purpose of showing relationships between Stevia rabaudiana (Bert.) Bert. With the Brazillian species of the genum. In addition to this morphogeographical review, the reptoductive biology of S. rebaudiana was studied and the results obtained with three groups of plants from different stocks were compared. This study showed this:1) plants from the three groups are similar in morphological and reproductive characteristics 2)the clearing squash technique used here allowes one to follow the development of flower and fruit; 3) the flower are protandrous and with tipical Eupatorieae features; 4) the pollen grains are normal, uniform, tricolporate, trinucleate and with 80% viability germinating ¿in vitro¿ in sucrose solutions; 5)the emasculation technique, as well as manual controlled pollinations show that the species has alogamy and inability of self-fertilization after self-pollination; 6) the sporophytic self-incompatibility system is indicated the lack of pollen tube formation on the stigema, the results of the pollination and some morphological features ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations Mestrado Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Jacques Robert Metivier Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Stevia rebaudiana Bert. contém um diterpeno tetracíclico ligado a três moléculas de glicose, o esteviosídeo, que e 300 vezes mais doce que a sacarose e apresenta, portanto, importância econômica. O esteviosídeo de extratos de plantas é rapidamente separado e quantificado através de cromatografia sobre camada delgada em desenvolvimento bidimensional, eluição em água com perdas insignificantes e ensaio colorimétrico com antrona contra padrão de esteviosídeo ou glicose. Os solventes utilizados nos desenvolvi mentos em duas dimensões são: butanol:acetato de etila:isopropano: água(35:100:60:30) e acetato de etila:ácido acético:água(8:4:1) ,que propiciam o deslocamento do esteviosídeo em Rf 0,56 e 0,12, respectivamente. O emprego de glicose como padrão é possível devido ã existência de razão constante entre as densidades ópticas de quantidades iguais de glicose e esteviosídeo que está relacionada com os pesos moleculares destas substâncias. No crescimento de folhas são distinguidas duas fases: uma fase inicial de expansão rápida, principalmente pela entrada de água, em que o material permanece constante, e uma segunda fase, após atingidos 10cm2 de área foliar, na qual material seco e conteúdo protéico aumentam devido ã concomitante fixação de carbono na folha. Os conteúdos absolutos e relativos de proteína e açúcares solúveis totais mostram padrões de mudanças diferentes durante a ontogenia, resultado de suas diferentes funções no tecido foliar jovem. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: Stevia rebaudiana Bert. contains a tetracyclic diterpene glycoside, stevioside, which is three hundred times sweeter than sucrose. As such this compound is of potential economic interest. Stevioside from plant extracts may be rapidly isolated and quantified through bi-dimensional thin layer chromatography.Isolated samples may be eluted in water, with insignificant losses and then assayed colorimetrically by the anthrone method against stevioside or glucose standarts. The solvents employed for chromatography are butanol:ethyl acetate:isopropanol:water(35:100: 60:30) in the first dimension and ethyl acetate:acetic acid:water(8:4:1) in the second. In this system stevioside is located at Rf 0,56 and 0,12 in the first and second dimensions respectively. When assaying stevioside, glucose may be employed as a standard due to the optical densitities of equal quantities of these substances bearing a constant ratio reiated to their molecular weights. Two phases are distinguishable during leaf growth:firstly,a rapid expansion phase in which dry weight remains constant and growth is due mainly to the entry of water, followed by the second phase(beyond leaf areas of 10 cm2) in which dry matter and protein contents increase due to concomitant carbon fixation in the leaf. The absolute and relative levels of proteins and sugars show different patterns of development during ontogeny reflecting their divergent functions in young leaf tissue. ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations Mestrado Fisiologia Vegetal Mestre em Biologia Funcional e Molecular