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[ES] La N-acetil-L-glutamato sintasa (NAGS) es un enzima mitocondrial que cataliza la acetilación de L-glutamato utilizando acetil coenzima A, produciendo N-acetil-L-glutamato (NAG), activador esencial del primer enzima del ciclo de la urea, la carbamoil fosfato sintetasa I. El ciclo de la urea es la ruta metabólica que convierte el amonio producido en el catabolismo proteico en urea. Mientras que el amonio es una sustancia tóxica la urea es una molécula inocua que se excreta en la orina. El déficit de N-acetil-L-glutamato sintasa (NAGSD; OMIM #237310) es causado por mutaciones en el gen NAGS (17q21.31). Es el desorden más raro del ciclo de la urea, siendo indistinguible clínicamente del déficit de carbamoil fosfato sintetasa I (CPSID). Existen formas muy severas de NAGSD, que se presentan en el periodo neonatal temprano, y formas menos severas de aparición más tardía. Los síntomas incluyen vómitos recurrentes, alteraciones neurológicas como letargia y convulsiones, con progresión a coma e incluso a la muerte. Puesto que NAGSD y CPSID son clínicamente indistinguibles, su diagnóstico diferencial se basa en la práctica hoy en la identificación de mutaciones en el gen correspondiente. Este diagnóstico diferencial es clave, ya que solo la NAGSD tiene tratamiento sustitutivo eficaz, la administración de N-carbamil-L-glutamato (NCG; denominación farmacéutica, ácido carglúmico), un medicamento huérfano análogo del NAG que es absorbible por vía oral y es resistente a las deacilasas tisulares, y que activa a la CPSI, reemplazando al acetilglutamato. Para establecer correlaciones genotipo-fenotipo es clave producir NAGS de manera recombinante introduciendo a voluntad las mutaciones identificadas en pacientes y estudiar experimentalmente los efectos de estas mutaciones sobre la estabilidad y la funcionalidad de la NAGS. Al no disponer de un sistema que permitiera la producción recombinante y purificación de NAGS humana, enzima muy inestable, el laboratorio del Dr. Rubio usó co, [EN] N-acetyl-L-glutamate synthase (NAGS) is a mitochondrial enzyme that catalyzes the acetylation of L-glutamate using acetyl coenzyme A, producing N-acetyl-L-glutamate (NAG), an essential activator of the first enzyme in the cycle of the urea, carbamoyl phosphate synthetase I. The urea cycle is the metabolic pathway that converts the ammonium produced in protein catabolism into urea. While ammonium is a toxic substance, urea is a harmless molecule that is excreted in the urine. The N-acetyl-L-glutamate synthase deficiency (NAGSD; OMIM # 237310) is caused by mutations in the NAGS gene (17q21.31). It is the rarest disorder of the urea cycle, being clinically indistinguishable from carbamoyl phosphate synthetase I (CPSID) deficiency. There are very severe forms of NAGSD, which occur in the early neonatal period, and less severe forms of later onset. Symptoms include recurrent vomiting, neurological disorders such as lethargy and seizures, with progression to coma and even death. Since NAGSD and CPSID are clinically indistinguishable, their differential diagnosis is based on practice today in the identification of mutations in the corresponding gene. This differential diagnosis is key, since only NAGSD has effective replacement therapy, the administration of N-carbamil-L-glutamate (NCG; pharmaceutical name, carglumic acid), an orphaned NAG analogue drug that is orally absorbable and is resistant to tissue deacylases, and that activates CPSI, replacing acetylglutamate. To establish genotype-phenotype correlations, it is essential to produce NAGS recombinantly by introducing the mutations identified in patients at will and to study experimentally the effects of these mutations on the stability and functionality of NAGS. Not having a system that allowed the recombinant production and purification of human NAGS, a very unstable enzyme, Dr. Rubio's laboratory used as a model a bacterial NAGS, of Pseudomona aeruginosa, in which he introduced some of the clinical mutations d

[ES] La N-acetil-L-glutamato sintasa (NAGS) es un enzima mitocondrial que cataliza la acetilación de L-glutamato utilizando acetil coenzima A, produciendo N-acetil-L-glutamato (NAG), activador esencial del primer enzima del ciclo de la urea, la carbamoil fosfato sintetasa I. El ciclo de la urea es la ruta metabólica que convierte el amonio producido en el catabolismo proteico en urea. Mientras que el amonio es una sustancia tóxica la urea es una molécula inocua que se excreta en la orina. El déficit de N-acetil-L-glutamato sintasa (NAGSD; OMIM #237310) es causado por mutaciones en el gen NAGS (17q21.31). Es el desorden más raro del ciclo de la urea, siendo indistinguible clínicamente del déficit de carbamoil fosfato sintetasa I (CPSID). Existen formas muy severas de NAGSD, que se presentan en el periodo neonatal temprano, y formas menos severas de aparición más tardía. Los síntomas incluyen vómitos recurrentes, alteraciones neurológicas como letargia y convulsiones, con progresión a coma e incluso a la muerte. Puesto que NAGSD y CPSID son clínicamente indistinguibles, su diagnóstico diferencial se basa en la práctica hoy en la identificación de mutaciones en el gen correspondiente. Este diagnóstico diferencial es clave, ya que solo la NAGSD tiene tratamiento sustitutivo eficaz, la administración de N-carbamil-L-glutamato (NCG; denominación farmacéutica, ácido carglúmico), un medicamento huérfano análogo del NAG que es absorbible por vía oral y es resistente a las deacilasas tisulares, y que activa a la CPSI, reemplazando al acetilglutamato. Para establecer correlaciones genotipo-fenotipo es clave producir NAGS de manera recombinante introduciendo a voluntad las mutaciones identificadas en pacientes y estudiar experimentalmente los efectos de estas mutaciones sobre la estabilidad y la funcionalidad de la NAGS. Al no disponer de un sistema que permitiera la producción recombinante y purificación de NAGS humana, enzima muy inestable, el laboratorio del Dr. Rubio usó co, [EN] N-acetyl-L-glutamate synthase (NAGS) is a mitochondrial enzyme that catalyzes the acetylation of L-glutamate using acetyl coenzyme A, producing N-acetyl-L-glutamate (NAG), an essential activator of the first enzyme in the cycle of the urea, carbamoyl phosphate synthetase I. The urea cycle is the metabolic pathway that converts the ammonium produced in protein catabolism into urea. While ammonium is a toxic substance, urea is a harmless molecule that is excreted in the urine. The N-acetyl-L-glutamate synthase deficiency (NAGSD; OMIM # 237310) is caused by mutations in the NAGS gene (17q21.31). It is the rarest disorder of the urea cycle, being clinically indistinguishable from carbamoyl phosphate synthetase I (CPSID) deficiency. There are very severe forms of NAGSD, which occur in the early neonatal period, and less severe forms of later onset. Symptoms include recurrent vomiting, neurological disorders such as lethargy and seizures, with progression to coma and even death. Since NAGSD and CPSID are clinically indistinguishable, their differential diagnosis is based on practice today in the identification of mutations in the corresponding gene. This differential diagnosis is key, since only NAGSD has effective replacement therapy, the administration of N-carbamil-L-glutamate (NCG; pharmaceutical name, carglumic acid), an orphaned NAG analogue drug that is orally absorbable and is resistant to tissue deacylases, and that activates CPSI, replacing acetylglutamate. To establish genotype-phenotype correlations, it is essential to produce NAGS recombinantly by introducing the mutations identified in patients at will and to study experimentally the effects of these mutations on the stability and functionality of NAGS. Not having a system that allowed the recombinant production and purification of human NAGS, a very unstable enzyme, Dr. Rubio's laboratory used as a model a bacterial NAGS, of Pseudomona aeruginosa, in which he introduced some of the clinical mutations d

[ES] La ornitina transcarbamilasa (OTC) es un enzima mitocondrial que cataliza el segundo paso del ciclo de la urea, la reacción entre carbamil fosfato y ornitina para formar citrulina y fosfato. Esta ruta metabólica convierte el amonio derivado del catabolismo proteico, que es altamente tóxico, en urea, molécula inocua que se elimina en la orina. [1] Mutaciones en el gen para OTC (Xp21.1) causan la deficiencia de OTC (OTCD), el error más frecuente del ciclo de la urea. Los síntomas de OTCD se deben a la toxicidad del amonio acumulado y son variables dependiendo de la mutación presente en hemicigosis en los pacientes. Su forma más severa, neonatal temprana, generalmente afecta a varones, manifestándose con irritabilidad, falta de energía y apetito, letargia, convulsiones y coma. Aunque tratable, la OTCD puede conducir a la muerte o al retraso del desarrollo, discapacidad intelectual y daño hepático. Con menos frecuencia, la OTCD se manifiesta tardíamente, generalmente en presentaciones menos graves, tanto en hombres como en mujeres. Sus síntomas pueden incluir episodios de delirio, nivel reducido de conciencia, dolores de cabeza, vómitos, convulsiones y pérdidas prolongadas de conciencia en situaciones de estrés catabólico (parto, accidentes, cirugía, etc). [1] Para entender el funcionamiento de la OTC, establecer correlaciones genotipo-fenotipo y determinar el impacto de las mutaciones descritas (la mayoría de ellas sustituciones de aminoácido [2]) sobre la estabilidad, la actividad y los parámetros cinéticos, es clave producir OTC humana recombinante. En el laboratorio esto se consigue utilizando un sistema de expresión en E. coli [3] en el que la forma madura de OTC humana (es decir, sin secuencia señal de internalización mitocondrial) se coexpresa en presencia de chaperonas sobreexpresadas que favorecen su correcto plegamiento [3]. El procedimiento de purificación empleado (modificado de [4]) es laborioso, implica cinco etapas de purificación, incluyendo precipi, [EN] Ornithine transcarbamylase (OTC) is a mitochondrial enzyme that catalyzes the second step of the urea cycle, the reaction between carbamyl phosphate and ornithine to form citrulline and phosphate. This metabolic pathway converts ammonium derived from protein catabolism, which is highly toxic, into urea, an innocuous molecule that is eliminated in the urine. [1] Mutations in the gene for OTC (Xp21.1) cause OTC deficiency (OTCD), the most frequent error of the urea cycle. The symptoms of OTCD are due to the toxicity of the accumulated ammonium and are variable depending on the mutation present in hemizigosis in patients. It s more severe, early neonatal form usually affects males, festering with irritability, lack of energy and appetite, lethargy, seizures and coma. Although treatable, OTCD can lead to death or developmental delay, intellectual disability and liver damage. Less frequently, OTCD manifests itself late, usually in less severe presentations, in both men and women. Its symptoms may include episodes of delirium, reduced level of consciousness, headaches, vomiting, seizures and prolonged loss of consciousness in situations of catabolic stress (childbirth, accidents, surgery, etc). [1] To understand the functioning of OTC, establish genotype-phenotype correlations and determine the impact of the described mutations (most of them amino acid substitutions [2]) on stability, activity and kinetic parameters, it is key to produce recombinant human OTC . In the laboratory this is achieved using an expression system in E. coli [3] in which the mature form of human OTC (ie, without a mitochondrial internalization signal sequence) is co-expressed in the presence of overexpressed chaperones that favor its correct folding [3]. The purification procedure employed (modified from [4]) is laborious, involving five purification steps, including ammonium sulfate precipitation, dialysis and ion exchange chromatography. Affinity purification using as ligand N-5-phosphonace

[ES] La ornitina transcarbamilasa (OTC) es un enzima mitocondrial que cataliza el segundo paso del ciclo de la urea, la reacción entre carbamil fosfato y ornitina para formar citrulina y fosfato. Esta ruta metabólica convierte el amonio derivado del catabolismo proteico, que es altamente tóxico, en urea, molécula inocua que se elimina en la orina. [1] Mutaciones en el gen para OTC (Xp21.1) causan la deficiencia de OTC (OTCD), el error más frecuente del ciclo de la urea. Los síntomas de OTCD se deben a la toxicidad del amonio acumulado y son variables dependiendo de la mutación presente en hemicigosis en los pacientes. Su forma más severa, neonatal temprana, generalmente afecta a varones, manifestándose con irritabilidad, falta de energía y apetito, letargia, convulsiones y coma. Aunque tratable, la OTCD puede conducir a la muerte o al retraso del desarrollo, discapacidad intelectual y daño hepático. Con menos frecuencia, la OTCD se manifiesta tardíamente, generalmente en presentaciones menos graves, tanto en hombres como en mujeres. Sus síntomas pueden incluir episodios de delirio, nivel reducido de conciencia, dolores de cabeza, vómitos, convulsiones y pérdidas prolongadas de conciencia en situaciones de estrés catabólico (parto, accidentes, cirugía, etc). [1] Para entender el funcionamiento de la OTC, establecer correlaciones genotipo-fenotipo y determinar el impacto de las mutaciones descritas (la mayoría de ellas sustituciones de aminoácido [2]) sobre la estabilidad, la actividad y los parámetros cinéticos, es clave producir OTC humana recombinante. En el laboratorio esto se consigue utilizando un sistema de expresión en E. coli [3] en el que la forma madura de OTC humana (es decir, sin secuencia señal de internalización mitocondrial) se coexpresa en presencia de chaperonas sobreexpresadas que favorecen su correcto plegamiento [3]. El procedimiento de purificación empleado (modificado de [4]) es laborioso, implica cinco etapas de purificación, incluyendo precipi, [EN] Ornithine transcarbamylase (OTC) is a mitochondrial enzyme that catalyzes the second step of the urea cycle, the reaction between carbamyl phosphate and ornithine to form citrulline and phosphate. This metabolic pathway converts ammonium derived from protein catabolism, which is highly toxic, into urea, an innocuous molecule that is eliminated in the urine. [1] Mutations in the gene for OTC (Xp21.1) cause OTC deficiency (OTCD), the most frequent error of the urea cycle. The symptoms of OTCD are due to the toxicity of the accumulated ammonium and are variable depending on the mutation present in hemizigosis in patients. It s more severe, early neonatal form usually affects males, festering with irritability, lack of energy and appetite, lethargy, seizures and coma. Although treatable, OTCD can lead to death or developmental delay, intellectual disability and liver damage. Less frequently, OTCD manifests itself late, usually in less severe presentations, in both men and women. Its symptoms may include episodes of delirium, reduced level of consciousness, headaches, vomiting, seizures and prolonged loss of consciousness in situations of catabolic stress (childbirth, accidents, surgery, etc). [1] To understand the functioning of OTC, establish genotype-phenotype correlations and determine the impact of the described mutations (most of them amino acid substitutions [2]) on stability, activity and kinetic parameters, it is key to produce recombinant human OTC . In the laboratory this is achieved using an expression system in E. coli [3] in which the mature form of human OTC (ie, without a mitochondrial internalization signal sequence) is co-expressed in the presence of overexpressed chaperones that favor its correct folding [3]. The purification procedure employed (modified from [4]) is laborious, involving five purification steps, including ammonium sulfate precipitation, dialysis and ion exchange chromatography. Affinity purification using as ligand N-5-phosphonace

[ES] La ornitina transcarbamilasa (OTC) es un enzima mitocondrial que cataliza el segundo paso del ciclo de la urea, la reacción entre carbamil fosfato y ornitina para formar citrulina y fosfato. Esta ruta metabólica convierte el amonio derivado del catabolismo proteico, que es altamente tóxico, en urea, molécula inocua que se elimina en la orina. [1] Mutaciones en el gen para OTC (Xp21.1) causan la deficiencia de OTC (OTCD), el error más frecuente del ciclo de la urea. Los síntomas de OTCD se deben a la toxicidad del amonio acumulado y son variables dependiendo de la mutación presente en hemicigosis en los pacientes. Su forma más severa, neonatal temprana, generalmente afecta a varones, manifestándose con irritabilidad, falta de energía y apetito, letargia, convulsiones y coma. Aunque tratable, la OTCD puede conducir a la muerte o al retraso del desarrollo, discapacidad intelectual y daño hepático. Con menos frecuencia, la OTCD se manifiesta tardíamente, generalmente en presentaciones menos graves, tanto en hombres como en mujeres. Sus síntomas pueden incluir episodios de delirio, nivel reducido de conciencia, dolores de cabeza, vómitos, convulsiones y pérdidas prolongadas de conciencia en situaciones de estrés catabólico (parto, accidentes, cirugía, etc). [1] Para entender el funcionamiento de la OTC, establecer correlaciones genotipo-fenotipo y determinar el impacto de las mutaciones descritas (la mayoría de ellas sustituciones de aminoácido [2]) sobre la estabilidad, la actividad y los parámetros cinéticos, es clave producir OTC humana recombinante. En el laboratorio esto se consigue utilizando un sistema de expresión en E. coli [3] en el que la forma madura de OTC humana (es decir, sin secuencia señal de internalización mitocondrial) se coexpresa en presencia de chaperonas sobreexpresadas que favorecen su correcto plegamiento [3]. El procedimiento de purificación empleado (modificado de [4]) es laborioso, implica cinco etapas de purificación, incluyendo precipi, [EN] Ornithine transcarbamylase (OTC) is a mitochondrial enzyme that catalyzes the second step of the urea cycle, the reaction between carbamyl phosphate and ornithine to form citrulline and phosphate. This metabolic pathway converts ammonium derived from protein catabolism, which is highly toxic, into urea, an innocuous molecule that is eliminated in the urine. [1] Mutations in the gene for OTC (Xp21.1) cause OTC deficiency (OTCD), the most frequent error of the urea cycle. The symptoms of OTCD are due to the toxicity of the accumulated ammonium and are variable depending on the mutation present in hemizigosis in patients. It s more severe, early neonatal form usually affects males, festering with irritability, lack of energy and appetite, lethargy, seizures and coma. Although treatable, OTCD can lead to death or developmental delay, intellectual disability and liver damage. Less frequently, OTCD manifests itself late, usually in less severe presentations, in both men and women. Its symptoms may include episodes of delirium, reduced level of consciousness, headaches, vomiting, seizures and prolonged loss of consciousness in situations of catabolic stress (childbirth, accidents, surgery, etc). [1] To understand the functioning of OTC, establish genotype-phenotype correlations and determine the impact of the described mutations (most of them amino acid substitutions [2]) on stability, activity and kinetic parameters, it is key to produce recombinant human OTC . In the laboratory this is achieved using an expression system in E. coli [3] in which the mature form of human OTC (ie, without a mitochondrial internalization signal sequence) is co-expressed in the presence of overexpressed chaperones that favor its correct folding [3]. The purification procedure employed (modified from [4]) is laborious, involving five purification steps, including ammonium sulfate precipitation, dialysis and ion exchange chromatography. Affinity purification using as ligand N-5-phosphonace