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SummaryBackground Psoriasis associates several extra-cutaneous manifestations. Little is known about hepatic parameters specifically associated with psoriasis. Objective To study whether psoriasiform dermatitis is associated with liver injury. Methods We studied liver parameters of inflammation and fibrosis in a murine model of psoriasiform dermatitis induced by topical application of imiquimod for nine weeks. Results Topical treatment with imiquimod induced a form of psoriasiform dermatitis reminiscent of the human disorder, characterized by thickened and scaly skin, psoriasiform epidermal hyperplasia, altered keratinocyte differentiation, and cutaneous overexpression of interleukin-17A. Mice with dermatitis displayed hepatitis, as shown by elevation of plasma transaminase levels, as well as portal and periportal hepatitis characterized by T lymphocyte (CD3e+) and polymorphonuclear cell (Gr1+) infiltrates. The hepatitis progressed toward liver fibrogenesis, as shown by excessive Sirius red staining, consistent with the expression of alpha-smooth muscle actin by hepatic stellate cells. Conclusions These results indicate that liver inflammation and fibrosis is associated with experimental psoriasiform dermatitis. Our results suggest that psoriatic inflammation may be associated with specific liver injury. This article is protected by copyright. All rights reserved.

Introduction Les cultures de keratinocytes en monocouche sont couramment utilisees dans les etudes in vitro, mais celles-ci ne reproduisent pas fidelement l’architecture de l’epiderme et les caracteristiques physiologiques des differents etats de differenciation cellulaire. Dans cette etude, nous decrivons un protocole simple et rapide pour la generation d’epidermes reconstruits murins (RME) a partir de keratinocytes primaires de souriceaux. Apres avoir caracterise les differentes etapes de leur differenciation, nous analysons leur reponse a la stimulation par des cytokines proinflammatoires. Materiel et methodes Les RME sont realises a partir de keratinocytes primaires issus de peaux de souriceaux nouveau-nes cultives dans des inserts en polycarbonate dans un milieu d’ensemencement. Des l’obtention d’une monocouche cellulaire, les inserts sont passes a l’interface air-liquide au contact d’un milieu de differenciation. La caracterisation des RME est effectuee par histologie et par immunohistofluorescence pour la detection de marqueurs de differenciation incluant les keratines 14, 6, 10, la loricrine, la filaggrine, l’E-Cadherine et des connexines. Leur permeabilite est eprouvee par des tests de diffusion de la sonde fluorescente Lucifer Yellow . Enfin, la reponse des RME aux cytokines IL-17A, TNFα, IL-22, IL-1α et oncostatine M est evaluee par RT-qPCR par la mesure de l’expression de marqueurs de differenciation, de peptides antimicrobiens et de chimiokines. Resultats Notre protocole permet d’obtenir des RME qui reproduisent les caracteristiques morphologiques et phenotypiques d’un epiderme de souris en seulement 5 jours apres leur passage a l’interface air-liquide comme l’atteste l’expression des marqueurs de differenciation conforme a celle d’un epiderme natif. Les RME acquierent egalement leur fonction de barriere et sont impermeables au passage de la Lucifer Yellow . Enfin, suite a leur stimulation par des cytokines proinflammatoires, les RME repondent de maniere similaire a un epiderme in vivo par une diminution d’expression de la keratine 10, de l’involucrine et de la filaggrine et une augmentation de l’expression de mediateurs de l’inflammation tels que la chimiokine CXCL-3 et les peptides antimicrobiens S100A9 et β-defensine-3. Discussion Ce nouveau protocole permet donc de realiser rapidement et facilement des RME reproduisant fidelement l’architecture et les caracteristiques physiologiques d’un epiderme, y compris leur reponse dans un contexte inflammatoire. Conclusion Ce modele de RME permet d’etudier les mecanismes physiologiques de la peau et ouvre la perspective de realiser des RME a partir de keratinocytes issus de souris genetiquement modifiees.

De nombreuses etudes in vitro sont realisees a partir de cultures primaires de keratinocytes en monocouche. Ces cultures cellulaires sont composees majoritairement de cellules progenitrices de la couche basale, presentant un potentiel proliferatif important mais un etat de differenciation epidermique peu avance. Afin d’etudier in vitro la physiologie du keratinocyte dans un systeme plus differencie, nous avons mis au point un protocole d’obtention d’epidermes reconstruits murins (RME) a partir de keratinocytes primaires issus de souriceaux nouveau-nes. La caracterisation des RME en immuno-histofluorescence montre une expression similaire a celle de la peau de souris des marqueurs de differenciation epidermique, tels que les cytokeratines 6/10, la loricrine ou la filaggrine, de cadherines et de connexines des j5. Ces RME permettent egalement de mettre en evidence le blocage de la differenciation induit par les cytokines pro-inflammatoires telles que l’oncostatine M ou l’IL-22. Nous avons egalement compare les profils d’expression des Toll-like Receptors des RME avec les cultures de keratinocytes en monocouche et la peau de souris. Outre l’etude des reponses des RME en conditions infectieuses et/ou inflammatoires, ce protocole ouvre la possibilite de generer des RME a partir de souris transgeniques knock-out ou knock-in.

La steatopathie hepatique metabolique (SHM), dont la forme inflammatoire correspond a la steatohepatite non alcoolique (NASH), est 2 fois plus frequente dans la population psoriasique ; sa presence pourrait aggraver l’atteinte cutanee. Notre objectif est d’etudier l’impact de la NASH dans un modele murin de psoriasis induit par l’application topique d’imiquimod (IMQ). La NASH est induite par un regime hyperlipidique enrichi en acide cholique de 11 semaines ; de la 9e a la 11e semaine, les souris recoivent tous les 2 jours une application cutanee d’IMQ. Avant induction du psoriasis, les souris recevant le regime hyperlipidique presentent une peau erythemateuse associee a une surexpression cutanee d’IL-17A. Apres traitement par IMQ, l’inflammation cutanee est plus severe chez les souris NASH que chez les souris recevant un regime standard : le score clinique est augmente, l’epaississement epidermique est plus important (62 ± 9 μm vs 90 ± 10 μm, p