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O presente trabalho trata da preparação e caracterização de membranas de quitosana porosas e densas, que possuem diversas aplicações tecnológicas. Para tanto, foram utilizadas as técnicas de microscopia (microscopia eletrônica de varredura - MEV - e microscopia de força atômica -MFA), titulação potenciométrica e espectroscopia no infravermelho (FTIR-ATR). A síntese das estruturas foi realizada através da secagem total ou parcial de uma solução acética de quitosana a 2,5% (w/w) seguida de coagulação em meio alcalino. Glutaraldeído foi utilizado para modificar quimicamente as membranas, tornando-as mais hidrofóbicas. A extensão deste processo pôde ser observada por FTIR-ATR, utilizando-se um plano fatorial onde foram variados o tempo de fixação e a concentração de glutaraldeído na solução de tratamento. In this work, we studied the preparation and characterization of porous and non-porous chitosan membranes, which may have several technological uses. For characterization, we have used microscopy (scanning electron microscopy -SEM- and atomic force microscopy -AFM), potentiometric titration and infrared spectroscopy (FTIR-ATR). The synthesis of structures were done by total or partial casting of a 2.5% (w/w) chitosan acetic solution and further coagulation. Glutaraldehyde was also used to chemically modify chitosan, making it more hydrophobic. The extension of this process could be observed by FTIR-ATR, and by using a factorial plan which varied time of fixation and concentration of glutaraldehyde solution.

Se realizó un estudio tecnológico en la forma farmacéutica ungüento, para lo cual se empleó quitina como principio activo. Se utilizaron 2 tipos de base, oleosa e hidrosoluble, la primera con mejores características. Se estudiaron la liberación in vitro del fármaco, así como la cinética de este proceso, y se llegó a la conclusión de que el mayor porcentaje de quitina liberada fue en base oleosa. Se siguió en ambos casos una cinética de orden cero.A technological study of pharmaceutical form ointment was undertaken for which chitin was used as an active agent. Two types of base were used: oinment and water-soluble; the former presented better characteristics. Drug release in vitro and the kinetics of this process were studied so it was concluded that the higher percentage of chitin was released in oinment. Zero kinetics was followed in both cases.

Se estudió la actividad de la lisozima sobre la carboximetilquitina y la carboximetilquitosana mediante el empleo de la viscosimetría y se encontró que ambas son hidrolizadas en condiciones fisiológicas.The activity of lysozime an carboxymethylchitin and carboxymethyl-chitosan was studied by viscosimetry. It was found that both are hydrolized under physiological conditions.

Se realizó un estudio comparativo de la quitina y la carboximetilquitosana como agentes desintegrantes, y se evaluó la influencia ejercida por el método empleado en la elaboración de las tabletas sobre la actividad desintegrante de ambos polímeros. La quitina presentó buenas características como agente desintegrante independientemente del método utilizado en la elaboración de las tabletas, mientras que la actividad desintegrante de la carboximetilquitosana fue afectada por el proceso de granulación.A comparative study of chitin and carboxymethylchitosan as disintegrating agents was wade made. The influence exerted bu tje method used in the preparation of the tablets on the disintegrating activity of both polymers was evaluated. Chitin proved to have good characteristics as a disintegrating agent independently of the method used to make tablets. The disintegrating activity of carboxymethylchitosan was affected by the granulation process.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Maestría en Producción Agropecuaria Several products have worked in the biocontrol of Phytophthora worldwide, but until now they have not been tested in Mexico. The objective of this work was to evaluate the alternative products chitin, chitosan and Trichoderma harzianum for the biocontrol of Phytophthora capsici individually and in combination, in serrano chili pepper plants (Capsicum annum L.) cv. Camino Real. For the experiments plants with four true leaves were selected and were transplanted to 1 L pots containing a mixture of sterile substrate and non sterile (peat moss, vermiculite, sand, 3: 1/2: 1). During the experiments the plants were maintained under greenhouse conditions. Three experiments were carried out. In the experiment 1 the plants were transplanted at 36 days; in the experiment 2 at 48 days; and in the experiment 3 at 55 days. In the experiment 1 the treatments were applied before the transplant: T. harzianum, chitosan, chitin and the combinations T. harzianum-chitin and T. harzianum-chitosan. In the experiments 2 and 3 the treatments were applied after the transplant. A negative control (without P. capsici) and a positive control (with P. capsici) were included. Each treatment had six replicates. The plants were inoculated with P. capsici (50, 000 zoospores / plant) 15 days after the transplant. Wilting symptoms in the plants were evaluated at 6, 13 and 20 days after the inoculation with P. capsici in the experiments 1 and 2, and at 5, 12 and 21 days in the experiment 3. Plants were harvested in exp. 1 and exp. 3 and examined in terms of plant height, shoot fresh and dry weight, root fresh and dry weight, as well as disease severity and P. capsici root infection levels. Existen diferentes productos que han funcionado en el biocontrol de Phytophthora en otros países sin embargo, en México estos no han sido probados. El objetivo de este estudio fue evaluar los productos alternativos quitina, quitosano y Trichoderma harzianum, individualmente y en combinación para el control biológico de Phytophthora capsici en plantas de chile serrano (Capsicum annuum L). var. Camino Real. Para los experimentos se seleccionaron plantas con cuatro hojas verdaderas, y se trasplantaron a macetas de 1 L conteniendo una mezcla de sustrato estéril y no estéril (turba, vermiculita, arena 3:1/2:1). Durante los experimentos las plantas se mantuvieron en condiciones de invernadero. Se realizaron tres experimentos. En el experimento 1 las plantas fueron trasplantadas a los 36 días; en el experimento 2 a los 48 días; y en el experimento 3 a los 55 días. En el experimento 1 se aplicaron los tratamientos antes del trasplante: T. harzianum, quitina, quitosano y las combinaciones T. harzianum-quitina y T. harzianum-quitosano. En los experimentos 2 y 3 los mismos tratamientos se aplicaron después del trasplante. Se incluyeron un testigo negativo (sin P. capsici) y un testigo positivo (con P. capsici). Cada tratamiento tuvo seis repeticiones. Las plantas fueron inoculadas con P. capsici (50,000 zoosporas/planta) 15 días después del trasplante. Los síntomas de marchitez en las plantas fueron evaluados 6, 13 y 20 días después de la inoculación de P. capsici en los experimentos 1 y 2, y a los 5, 12 y 21 días en el experimento 3. Las plantas de los experimentos 1 y 3 fueron cosechadas y se evaluaron el desempeño vegetal en términos de altura de la planta, peso fresco y seco parte aérea, peso fresco y seco de la parte radicular así como la severidad de la enfermedad y el porcentaje de raíces infectadas.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Os exoesqueletos de crustáceos, como camarão M. amazonicum (Heller, 1863) são uma das principais fontes alternativas de obtenção de quitina, precursor da quitosana. Diante das inúmeras dificuldades de se trabalhar padronizadamente com biomaterias, este trabalho teve como principal objetivo a extração de quitina e quitosana através de uma metodologia de planejamento experimental por superfície de resposta, para otimizar as principais etapas de desmineralização, desproteinização e desacetilação,. Para o planejamento das três etapas, as variáveis de resposta foram respectivamente, porcentagem de cinzas remanescentes (%CR), porcentagem de Nitrogênio total (%Ntotais) e porcentagem do grau de desacetilação (%GD). As caracterizações das etapas de Desmineralização, Desproteinização. e Desacetilação, foram analisadas consecutivamente por análise de cinzas, análise elementar e titulação potenciométrica. Após as conclusões das análises de cinzas, tanto no material in natura quanto no desmineralizado, foi possível obter, respectivamente 32,03±0,05% de (%CR) e 0,0% de (%CR). Os parâmetros de regressão do modelo de superfície de resposta foram estatisticamente significativos, com valores (R2) igual a 0,89. A superfície de resposta construída para a variável % CR com regiões de iso-repostas indicaram HCl igual 1,2 M e razão 0,08g/ml, isto determina a região ótima no modelo adotado para a otimização da desmineralização. Para os ensaios de desproteinização ressalta-se que, mesmo não havendo significância quanto as variáveis em estudo, o resultado da análise elementar mostrou que em todos os ensaios do planejamento, a extração de proteínas foi realizada com eficiência, mostrando uma média de grau de desproteinização próximo a 100%. Na etapa de desactilação as variáveis também não se mostraram significantes, com % Grau de Desacetilação variando de 18,24 – 57,22. Neste trabalho, pode-se concluir que nem sempre a literatura poderá ser o apoio para eficiente extração de quitina e quitosana, dependendo neste caso, exclusivamente de testes preliminares e adaptações exclusivas para cada espécie em estudo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental, Florianópolis, 2014. A drenagem ácida mineral (DAM) é um dos mais graves problemas da mineração em termos mundiais, com elevado impacto negativo sobre os cursos hídricos e a vida aquática. As principais características da DAM são baixos pH e elevadas concentrações de sulfatos e diferentes íons metálicos (Cd, Cu, Ni, Pb, Zn, Fe, Al, Cr, Mn, Mg, etc.), muitos dos quais são tóxicos para os ecossistemas e, em última instância, para a saúde e qualidade de vida humana. O objetivo deste trabalho foi estudar o potencial da casca de camarão in natura para remoção de metais e ácidos presentes nas águas impactadas por DAM, visando obter, após tratamento, uma água dentro dos padrões legais exigidos que possibilite seu reuso para fins secundários não potáveis. As águas objeto da pesquisa foram provenientes do Manancial da Língua do Dragão (MLD), em Siderópolis-SC, e do rio Sangão (RS) ao passar pela cidade de Criciúma-SC, ambas com pH na faixa de 3 e elevados teores de Al, Fe, Mn e SO42-. Foram realizados ensaios preliminares comparativos de substratos em regime de batelada visando avaliar a influência do pH, da relação quantidade de substrato/volume de água, do tempo de contato e da velocidade de agitação na remediação das águas. Os resultados mostraram que a elevação do pH das amostras e a remoção de íons metálicos foram maiores com casca de camarão do que com quitina comercial. Em contraste, a concentração de sulfato não apresentou modificações após os tratamentos, indicando que, nas condições testadas, a quitina não é um agente adequado para a remoção deste contaminante. No intuito de identificar os parâmetros ideais do experimento, assim como o grau de influência/dependência das variáveis estabelecidas, foi efetuado um planejamento fatorial para água RS tratada com corpo de camarão por meio do Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR). Em termos de eficiência na remoção das espécies poluentes, foi possível determinar as melhores condições experimentais em 188 rpm e 8,975 g ×L-1 de casca de camarão. Os estudos cinéticos revelaram que o modelo de pseudo-segunda ordem forneceu os melhores ajustes dos dados experimentais, confirmando que o controle do mecanismo de velocidade é a adsorção química. Como esperado, os maiores valores de velocidade inicial de adsorção corresponderam a Fe e Al, que são os metais mais abundantes na água objeto de tratamento. Foram efetuados experimentos em fluxo contínuo descendente em escala laboratorial da água RS através de uma coluna preenchida com casca do corpo de camarão. Nas condições analisadas, o padrão para reutilização da água pode ser assegurado até t ~60 min (água de classe III) e t ~300 minutos (padrão de lançamento de efluentes). As capacidades de adsorção de Fe, Al e Mn calculadas pelas curvas de ruptura resultaram em 10,41; 32,62 e 5,56 mg por grama de casca do corpo de camarão, respectivamente, valores em consonância ou mais altos que os encontrados na literatura para outros adsorventes. O estudo por MEV parece confirmar a presença sobre a superfície da casca de camarão saturada de material microcristalino e de material amorfo, em acordo com a existência de mecanismos sucessivos de adsorção e precipitação. Realizaram-se também ensaios de toxicologia aguda com Daphnia magna como organismo-teste, com o objetivo de confirmar o potencial do efluente após tratamento com casca de camarão para fins secundários não potáveis. Os ensaios toxicológicos da amostra pós-tratamento com casca de camarão não apresentaram efeitos tóxicos nos organismos-teste. Este fato confirma a adequação, tanto em termos de pH quanto das concentrações residuais de metais na água tratada, para seu reaproveitamento para fins secundários não potáveis. Como conclusão final, cabe destacar o caráter sustentável do tratamento proposto, com o qual se tem conseguido transformar uma água altamente tóxica em um efluente apto para ser utilizado como água de reuso para fins secundários não potáveis por meio de uma tecnologia de baixo custo, dando um valor agregado a um resíduo inicialmente sem valor, a casca de camarão. Abstract : The acid mine drainage (AMD) is one of the most serious problems of mining on an international level, with high negative impacts on hydric courses and water life. The main characteristics of AMD are low pH and high sulfate and different metals ions (Cd, Cu, Ni, Pb, Zn, Fe, Al, Cr, Mn, Mg, etc.) concentration, many of which demonstrate toxics for the ecosystems, and, in last case, to the health and quality of human life. This way, the objective of this dissertation is to study the potential of the shrimp shell in natura for removal of metals and acids present in mine impacted waters (MIW), aiming to obtain, after treatment, water within legal standards that enable its reuse for secondary non-potable purposes. The waters studied for this research came from  Língua do Dragão manatial in Siderópolis  SC, and from the river Sangão (RS) which both pass by the city Criciúma  SC, both with pH around 3, and high levels of Al, Fe, Mn and SO4 2-. Preliminary trials were performed using the shell of the body (SB) and the shell of the head (SH), as well as commercial chitin (CC) with 70% of purity for comparative effects in batches to analyze the influence of the pH in the relation quantity of substratum/ water volume, the time of contact and the agitation velocity in the remediation of waters. The results show that the elevation of the pH of the samples was higher with the shrimp shells rather than with the commercial chitin. Oppositely, the concentration of sulfate did not present modifications after treatments, indicating that, in the tested conditions, chitin is not an adequate agent for the removal of this contaminant. In order to identify ideal parameters for the experiment, as well as, the degree of influence/dependency of the established variables, a factorial approach for water RS, treated with shells from shrimps bodies was made, by design compost central rotational (DCCR). In terms of efficiency in the removal of pollutant specimens, it was possible to determine how the best experimental conditions 188 rpm and 8,975g L-1 of shrimp shells. The kinetic studies revealed that the model of pseudo second order provided the best adjustments of experimental data, confirming that the control of the velocity mechanism is the chemical adsorption. As expected, the higher values of initial velocity of adsorption corresponded to Fe and Al, the most abundant metals in the water object of treatment. Experiments in continue descendent flow in laboratorial scale of water RS were made by a column filled with shells of shrimps bodies. In the conditions analyzed, the standard for reuse of water can be reassured until t = 60min (class III water) and t~300minutes (standard for effluent launching). The capacities of adsorption of Fe, Al and Mn calculated through the rupture curves result in 10,41; 32,62 and 5,56mg per gram of shrimp body shells, respectively, values in consonance or higher them found in literature for other adsorptions. The study by MEV seems to confirm the presence of microcrystalline and amorphous material over the surface of saturated shrimp shells, in agreement to the existence of successive mechanisms of adsorption and precipitation. Studies of acute toxicology with Daphna magna as test organism were also performed with the goal of confirming the potential of effluent after treatment with shrimp shells for secondary non-potable uses. The toxicological studies of the samples after treatment with shrimp shells did not present toxic effect on the test organisms. This fact confirms the suitability, not only in terms of pH, but also the residual concentrations of metals in the treated water, for its reuse for secondary purposes. As a final conclusion, the sustainable character of the proposed treatment can be pointed out, with which it has been possible to transform an extremely toxic water in an effluent capable of being used as reuse water for secondary non-potable purposes by a cheap technology, giving an earned value to a residue initially without value, the shrimp shell.

The chitin was isolated from theGanoderma lucidumsubmerged cultures mycelium as potential source of chitin under biotechnological processes. The extraction of chitin was carried out through 5 different assays which involved mainly three phases: pulverization of the mushroom, deproteinization of the mycelia with NaOH solution, and a process of decolorization with potassium permanganate and oxalic acid. The chitin contents extracted from 9-day mycelia were 413, 339, 87, 78, and 144 mg/g−1(milligrams of chitin/grams of dry biomass) for A1, A2, A3, A4, and A5, respectively. Obtained chitin was characterized by X-Ray Diffraction (XRD), by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), and by thermal analysis (TGA). The results showed thatGanoderma lucidumchitin has similar characteristic of chitin from different fonts. The advantage of the biotechnological processes and the fact thatGanoderma lucidumfungus may be used as a potential raw material for chitin production were demonstrated.

SILVA, B. H. M. Clonagem, sequenciamento e modelagem molecular por homologia da sequência parcial de uma vicilina de genótipos de feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] contrastantes em relação à resistência ao caruncho Callosobruchus maculatus. 2014. 51 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. The cowpea bean [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is a legume with high protein levels, largely cultivated and consumed in the Northeast of Brazil. Due to your economic importance, there are several studies that search resistant forms of cultivars of this kind of bean, as they is often attacked by different kinds of pests and predators. One of the most common is the weevil Callosobruchus maculatos. With the discovery of resistant cultivars for this insect many questions emerged about what biological component of the plant was responsible for such defensive action. Some studies suggest that this resistance is due to vicilin, which are reserve nutritious proteins, present in the seeds of cowpea. In this work, regions belonging to the vicilin gene of two contrasting cultivars in relation to resistence to weevil were sequenced, one resistant (IT81D-1053) and a susceptible (EPACE-10). These sequences, which come from several clones, were analyzed and thereby deducting its three-dimensional structure was made through a homology modeling using as template one 7S globulin from adzuki bean (Vigna angularis) identified as 2EA7 in the PDB database. Sequence analysis revealed that there are two regions highly variable in sequence from the vicilin gene, and these regions are rich in glutamine. Previous studies suggest that resistance to weevil occurs in the fact that the vicilin can bind to chitin and such glutamine rich regions are potentially chitin binding due to the high ability to form hydrogen bonds between the residues of glutamine and residues of N-acetylglucosamine. The structural analysis also supports this assumption, because the region rich in glutamine is very exposed, in relation to the protein surface, which facilitates the interaction of these amino acid residues with chitin. However more refined studies are needed to have a certainty of how is this interaction between vicilin and chitin, and if these same proteins are in fact fundamental in the resistance against the weevil. O feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é uma leguminosa com alto teor de proteínas, muito consumida e cultivada na região Nordeste do Brasil. Devido a sua importância econômica, existem vários estudos que procuram formas de cultivares resistentes desta espécie de feijão, pois esta é muito atacada por diversos tipos de pragas e predadores. Um dos mais comuns é o caruncho Callosobruchus maculatos. Com a descoberta de cultivares resistentes a este inseto, questionou-se sobre o componente biológico da planta responsável por tal ação defensiva. Alguns estudos sugerem que essa resistência ocorre devido as vicilinas, que são proteínas de reserva nutritiva, presentes nas sementes do feijão-de-corda. No presente trabalho, foram sequenciadas regiões pertencentes ao gene de vicilina de dois cultivares contrastantes em relação ao ataque do caruncho, sendo um resistente (IT81D-1053) e outro suscetível (EPACE-10). Essas sequências, advindas de vários clones, foram analisadas e com isso foi feita a dedução de sua estrutura tridimensional através de uma modelagem por homologia, utilizando como molde uma globulina 7S de feijão-azuki (Vigna angularis) identificada como 2EA7 no banco de dados PDB. A análise das sequências revelou que há duas regiões bastante variáveis na sequência do gene da vicilina, sendo essas regiões ricas em glutamina. Estudos anteriores sugerem que a resistência ao gorgulho se dá no fato de que as vicilinas conseguem se ligar a quitina, e tais regiões são potencialmente ligantes a quitina devido a grande capacidade de formar ligações de hidrogênio entre os resíduos de glutamina e os resíduos de N-acetilglucosamina. A análise estrutural também corrobora esta hipótese, pois a região rica em glutamina é bastante exposta, em relação à superfície proteica, o que facilita a interação destes resíduos de aminoácidos interagirem com a quitina. Entretanto estudos mais refinados são necessários para se ter uma maior certeza de como se dá esta interação entre vicilinas e a quitina, e se de fato essas proteínas são mesmo fundamentais na resistência contra o caruncho.

CAPES CNPq FACEPE Nos últimos anos, muitos estudos têm demonstrado o interesse em relação à produção e aplicação dos biopolímeros quitina e quitosana como materiais funcionais na medicina, farmácia, alimentação, biologia e engenharia. Especialmente devido a suas características únicas como biocompatibilidade, biodegradabilidade, não- toxicidade, atividade antimicrobiana, capacidade quelante e fácil produção. Após a celulose, a quitina é o segundo composto orgânico mais abundante na Terra, e é encontrado naturalmente como elemento estrutural em invertebrados e paredes celulares de fungos, principalmente na ordem Mucorales (classe Zygomycetes). A quitosana é obtida a partir da desacetilação da quitina (poli-(1-4)-2-acetamida-2-desoxi-β-D-glicosamina). A produção simultânea desses polímeros por via microbiológica mostrou ser vantajosa quando comparada com a extração tradicional a partir de crustáceos. A produção controlada por fermentação têm permitido o uso de resíduos agroindustriais como substratos de baixo custo, tais como: milhocina, manipueira, melaço e casca de mamão, o que corresponde a fontes de nutrientes alternativas para as culturas de fungos.Entre as várias aplicações da quitosana , destaca-se a sua capacidade de formar membranas, que podem ser aplicadas durante a remoção de metais pesados em ambientes aquosos . Esse método poderia ser considerado alternativa promissora, tendo em vista a inviabilidade operacional e o alto custo dos procedimentos habituais para remoção de metais. O objetivo deste estudo foi selecionar as melhores condições de cultivo para a produção satisfatória de quitina e quitosana a partir de Cunninghamella elegans e Rhizopus arrhizus e posterior aplicação de membranas de quitosana para a remoção de cádmio em soluções aquosas. Inicialmente, a produção de biomassa e de biopolímeros por estes fungos foi realizada através dos seguintes meios de cultura: meio específico modificado para Mucorales, e meios alternativos enriquecidos com milhocina (como fonte de nitrogênio) e suplementados manipueira, melaço ou suco de casca de mamão (como fontes de carbono). As caracterizações físico-químicas realizadas foram: infravermelho, difração de raios X, microscopia eletrônica de varredura, viscosidade, massa molecular, termogravimetria e densidade calorimétrica. Foi realizada a comparação entre as membranas obtidas utilizando quitosana fúngica com baixa massa molecular e quitosana comercial com massas moleculares baixa e média. Essas membranas de quitosana foram aplicadas para a remoção de Cd ( II ) a partir de soluções aquosas. E a remoção de cádmio foi estimada utilizando as análises de voltametria de redissolução anódica e voltametria de onda quadrada. Os resultados mostraram claramente as maiores produções de biomassa entre 16,00-24,60 g/L e produção de quitosana entre 77,78-77,76 mg/g obtidas utilizando os meios de cultura alternativos para R. arrhizus e C. elegans, respectivamente. Por outro lado, as produções mais elevadas de quitina de 137,17 e 235,00 mg/g foram obtidas usando os mesmos fungos e o meio de cultura padrão para Mucorales. A caracterização físico-química dos polímeros foi semelhante à encontrada para a quitina e quitosana comerciais utilizadas como padrões. A remoção de aproximadamente 100% de cádmio utilizando a membrana de quitosana de baixo custo sugere uma alternativa para complementar, ou até mesmo substituir, procedimentos de alto custo e baixa eficiência na descontaminação de efluentes industriais por metais pesados.

Made available in DSpace on 2017-06-01T18:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jaceline_maria_negreiros_lima.pdf: 862576 bytes, checksum: 0dbb4a9357bfef84bcb5012f24964cae (MD5) Previous issue date: 2013-08-23 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Chitosan is a natural polysaccharide originated from the deacetylation of chitin. It is soluble in acid because of the presence of amino groups, free along the polymer chain. The fungal class Zygomycetes, in particular Rhizopus oryzae, presents in its cell wall chitin and chitosan, and they may be linked through the polyphosphate or proteins and other components, respectively. The polyphosphate is a biopolymer with wide applicability in environmental biotechnology. Manipueira is the result of the process for production of pressed cassava flour and used as carbon source in fermentation processes. The corn steep liquor is a by-product of corn starch and regarded as nitrogen source. Investigations were carried out with Rhizopus oryzae in submerged fermentation for production of biomass and chitosan-polyphosphate complex, through cultivation in agro waste, cassava supplemented with corn steep liquor, using a full factorial design on 23 agitation at 150 rpm for 96h. The test with the greatest amount of biomass and chitosan was selected to perform a growth kinetics to evaluate the production of biomass and chitosan-polyphosphate complex. In this sense, was used bottles of 500ml capacity Erlenmyers containing 100mL of medium formulated being inoculated in 1-ml suspension of 107 spores per ml, incubated under orbital agitation at 150 rpm. Samples were collected every 12 hours until the period of 120h. The results showed a maximum increase of biomass with 48 hours of cultivation at pH 7.3, with maximum production of chitosan by R. oryzae 116mg / g biomass at 36h of cultivation. The polyphosphate complexed to chitosan had the highest yield in 36 h corresponding to 13mg/mg chitosan. Because the results in the production of biomass and chitosan-polyphosphate complex from Rhizopus oryzae, have become economically viable due to the use of industrial wastes to obtain these polymers. A quitosana é um polissacarídeo natural originado da deacetilação da quitina. É solúvel em ácido devido à presença de grupos amino, livres ao longo da cadeia do polímero. Os fungos de classe Zygomycetes, em especial Rhizopus oryzae, apresenta em suas paredes celulares quitina e quitosana, podendo as mesmas estar ligadas através de proteínas e polifosfato ou outros componentes, respectivamente. O polifosfato é um biopolímero de ampla aplicabilidade na biotecnologia ambiental. A manipueira é o resultado do processo da mandioca prensada para produção de farinha e utilizada como fonte de carbono nos processos fermentativos. A milhocina é um subproduto da produção de amido de milho e considerada como fonte de nitrogênio. Investigações foram realizadas com Rhizopus oryzae em fermentação submersa para produção de biomassa e do complexo quitosana-polifosfato, através do cultivo em rejeito agroindustrial, manipueira suplementado com milhocina, utilizando um planejamento fatorial completo 23 sobre agitação de 150rpm por 96h. O ensaio com a maior quantidade de biomassa e quitosana foi selecionado para realizar uma cinética de crescimento para avaliar a produção de biomassa e do complexo quitosanapolifosfato. Neste sentido, foi utilizado frascos de Erlenmyers de 500mL de capacidade, contendo 100mL do meio formulado, sendo inoculados em 1mL da suspensão de 107 esporos por mL, incubados sob agitação orbital de 150rpm. As amostras foram coletadas a cada 12 horas até o período de 120h. Os resultados obtidos demonstraram um aumento máximo de biomassa com 48h de cultivo em pH 7,3, com produção máxima da quitosana por R. oryzae de 116mg/g de biomassa em 36h de cultivo. O polifosfato complexado à quitosana apresentou maior rendimento em 36h correspondendo a 13mg/mg de quitosana. Devido os resultados obtidos na produção de biomassa e o complexo de quitosanapolifosfato por Rhizopus oryzae, tornaram-se economicamente viáveis devido à utilização de rejeitos industriais para obtenção desses polímeros.

Introdução: A Paracoccidioidomicose (PCM) é uma doença infecciosa sistêmica causada pelo Paracoccidioides brasiliensis e uma das mais importantes micoses sistêmicas endêmicas na América Latina. Os critérios de cura da paracoccidioidomicose ainda não estão bem definidos. A enzima quitotriosidase (QT) é naturalmente produzida nos macrófagos humanos e pertence à classe das quitinases. O aumento de sua atividade está relacionado com ativação dos macrófagos em doenças de caráter inflamatório. O P. brasiliensis possui quitina como componente da sua parede celular, sendo passível associar a elevação da atividade da QT com a atividade da PCM. Objetivo: Relacionar o aumento da atividade da QT com a PCM crônica não tratada, e avaliar sua utilidade como biomarcador desta micose. Metodologia: Foram selecionados dois grupos de pacientes: 1. Grupo PCM crônica sem tratamento: 14 pacientes; 2. Grupo Controle: 14 pessoas hígidas que doaram voluntariamente sangue para o estudo. A QT foi dosada em técnica de fluorescência. Resultados: A atividade da QT foi consideravelmente maior no primeiro grupo em comparação com o segundo (P < 0,0001). As medianas (em nmol/mL/h) para o grupo PCM e o controle foram, respectivamente, 174 (SD ± 122) e 44 (SD ± 29). Discussão: A atividade da QT está elevada em infecções fúngicas sistêmicas, parasitárias e bacterianas, em doenças de depósito lisossomal, e em processos inflamatórios. A sua função no sistema imunológico humano parece estar relacionada à imunidade inata e sua regulação parece complexa, envolvendo linfócitos Th1 e Th2 e citocinas. A análise da variação sérica da QT pode constituir-se em meio de inferir a atividade de vários processos inflamatórios, inclusive, fúngicos, o que pode ajudar como biomarcador da PCM. Conclusão: A QT pode constituir-se em método simples para revelar a presença de resposta inflamatória associada à infecção por P. brasiliensis. São necessários mais ensaios laboratoriais-clínicos para relacionar o aumento da atividade da QT como marcador bioquímico na PCM. Introduction: The paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic infectious disease caused by Paracoccidioides brasiliensis and one of the most important systemic mycosis endemic in Latin America. The criteria for cure of paracoccidioidomycosis are not well defined. The enzyme chitotriosidase (QT) is naturally produced in human macrophages and belongs to the class of chitinases. The increase in activity is related to activation of macrophages in diseases of inflammatory nature. The P. brasiliensis has chitin as a component of its cell wall, being susceptible associate elevation of QT with the activity of PCM. Objective: The aim of this study is to correlate the increased activity of QT with chronic active PCM, and evaluate its utility as a biomarker of this mycosis. Methods: We selected two groups of patients:1. chronic untreated PCM group: 14 patients, 2. Control group: 14 healthy people who voluntarily donated blood for the study. The QT was measured in fluorescence assay. Results: The QT activity was considerably higher in the first compared to the second group (P

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-01Bitstream added on 2014-08-13T18:00:29Z : No. of bitstreams: 1 000758813.pdf: 1783041 bytes, checksum: a41c1df49c7d04a56b75365ba30808ed (MD5) A terapia com Células-Tronco vive hoje o seu momento de máxima visibilidade. Toda esta atenção dá-se ao fato deste procedimento ser alvo potencial em tratamento de doenças graves. A grande aplicabilidade da terapia com as células-tronco dá-se através de seu potencial ilimitado de diferenciação em varias linhagens celular, além de sua capacidade de auto-renovação. Para que esta técnica possa ser utilizada na correção de fraturas ou na cicatrização de vários tecidos pode-se realizar a associação com biomaterias, que tenham um potencial de incorporação celular e ajudem na regeneração tecidual, e depois de adesão em seu local de ação, esta técnica é chamada de biocurativos e diversos substratos podem ser utilizados, desta forma foi escolhido um biomaterial Quitosana, o qual advém de uma matéria-prima conhecida como quitina, um polímero muito abundante na natureza, o qual tem sido recentemente testado como biocurativo. Em nossos testes, pudemos notar que estas biomembranas aceleram o processo de adesão celular e apresentam um desenvolvimento celular constante, sendo assim uma excelente opção na terapêutica cirúrgica Stem Cell therapy is currently experiencing its moment of maximum visibility. All this attention is given the fact that this procedure is a potential target in the treatment of serious diseases. The wide applicability of therapy with stem cells is possible due to your unlimited potential to differentiate into several cell lineages, as well as their capacity for self-renewal. For this technique can be used in the repair of fractures or healing of various tissues can be performed in combination with biomaterial, which have a potential merger of cellular and assist in tissue regeneration, and after accession in their place of action, this technique is called Biocure and diverse substrates can be used in this way was chosen a biomaterial Chitosan, which comes from a raw material known as chitin, an abundant polymer in nature, which has recently been tested as Biocure. In our tests, we noticed that these biomembranes accelerate the process of cell adhesion and cell growth have a constant, so a great option in the surgical therapy

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-25Bitstream added on 2014-06-13T18:58:31Z : No. of bitstreams: 1 gabriel_js_me_sjrp_parcial.pdf: 216992 bytes, checksum: bbc625daf5b4deae2f711159759b17f1 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-04T11:39:22Z: gabriel_js_me_sjrp_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-04T11:40:09Z : No. of bitstreams: 1 000713818.pdf: 6444616 bytes, checksum: d678f998fb14745c7aacc63852bd136f (MD5) No presente trabalho foi realizada a síntese e caracterização de derivados de quitosana que tiveram suas atividades antifúngicas testadas contra os fungos Aspergillus flavus e A. parasiticus. As quitosanas utilizadas nas sínteses foram obtidas da desacetilação heterogênea de quitosana comercial e da quitosana comercial de média massa molecular. Os graus médios de desacetilação ( ) da quitosana desacetilada (CH) e da quitosana de média massa molecular desacetilada (CHm) foram determinados pelas técnicas de Potenciometria e Espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio (RMN-H). Parte da quitosana desacetilada CH foi degradada para obtenção de polímeros de baixa massa molecular (CHD). As massas moleculares médias das quitosanas CHm, CH e CHD foram determinadas por viscosimetria e os valores obtidos foram 42,93 kDa, 15,22 kDa e 610,79 Da, respectivamente. Os derivados hidrofílicos foram obtidos pela reação das quitosanas CHm, CH e CHD com cloreto de 2-cloro-N,N-dietilaminoetila (DEAE). Os graus de substituição (GS) de grupos DEAE de CHm, CH e CHD foram determinados utilizando-se RMN-H e os valores obtidos foram 14, 30 e 43%, respectivamente. Na sequência, as quitosanas CHm14DEAE, CH30DEAE e CHD43DEAE foram alquiladas com dodecil aldeído seguido pela redução com cianoboroidreto de sódio, obtendo-se derivados com diferentes graus de substituição. Os graus de substituição por grupos dodecila (GDD) para a quitosana contendo 14% de grupos DEAE foram 2,5, 10 e 14%. Para a quitosana com 30% de DEAE os graus de substituição por dodecila foram 2,7, 10 e 19%. Para o derivado contendo 43% de DEAE os graus de substituição por dodecila foram 5, 28 e 39%. Além da Espectroscopia de RMN-H o sucesso da obtenção dos derivados anfifílicos também foi indicado por meio da... In this study, it was done the synthesis and characterization of chitosan derivatives, that had their antifungal activity tested against Aspergillus flavus and A. parasiticus. The chitosan used for the syntheses was obtained from heterogeneous deacetylation of the commercial chitosan and commercial chitosan of average molecular mass. The average degrees of deacetylation ( ) of chitosan (CH) and deacetylated chitosan of medium molecular weight (CHm) were determined by Potentiometry and techniques Spectroscopy Hydrogen Nuclear Magnetic Resonance (H-NMR). Part of deacetylated chitosan CH was degraded to obtain low molecular weight polymers (CHD). The average molecular weights of chitosans CHm, CH and CHD were determined by viscometry, and the values obtained were 42.93 kDa, 15.22 kDa and 610.79 Da, respectively. Hydrophilic derivatives were obtained by reaction of chitosan CHm, CH, CHD with chloride 2-chloro-N,N-diethylaminoethyl (DEAE). The degrees of substitution (DS) by DEAE groups of CHm, CH and CHD were determined by H-NMR and the values obtained were 14, 30 and 43%, respectively. After that the chitosans CHm14DEAE, CH30DEAE and CHD43DEAE were alkylated with dodecyl aldehyde followed by reduction with sodium cyanoborohydride to yield derivatives with different degrees of substitution. The degrees of substitution by dodecyl groups (GDD) for the chitosan containing 14% of DEAE groups were 2.5, 10 and 14%. For chitosan with 30% of DEAE the degrees of substitution by dodecyl groups were 2.7, 10... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-18Bitstream added on 2014-06-13T19:17:16Z : No. of bitstreams: 1 pedro_ro_me_sjrp_parcial.pdf: 308733 bytes, checksum: 9891c3253677398a2eaeee4aa835dae4 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-09T14:35:39Z: pedro_ro_me_sjrp_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-09T14:36:20Z : No. of bitstreams: 1 000713827.pdf: 1107831 bytes, checksum: 7123832b50b5229b5f6397201b89b8a2 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-09T17:15:02Z: 000713827.pdf,Bitstream added on 2015-02-09T17:15:39Z : No. of bitstreams: 1 000713827.pdf: 1107831 bytes, checksum: 7123832b50b5229b5f6397201b89b8a2 (MD5) Os fungos do gênero Aspergillus, presentes em amendoins, milho, arroz, nozes e outros grãos, são uma constante preocupação nos dias atuais devido a sua capacidade de produzir toxinas cancerígenas. Dentre as várias técnicas de controle desse microrganismo, tem se destacado o uso de produtos naturais, não agressivos ao meio ambiente e de baixo custo, como por exemplo, a quitosana. O presente trabalho apresenta a síntese e caracterização de duas séries de novos derivados de quitosana para utilização como biofungicida contra os fungos Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus. A primeira série descreve a síntese de derivados de quitosana pela reação de quitosana desacetilada (QD) com brometo de propil (Q-Propil) pentil (Q-Pentil) trimetilamônio para obter derivados com proporções crescentes do grau de substituição (GS). A segunda série foi obtida a partir da síntese de sais bi-quaternários de amônio, com a posterior reação com quitosana desacetilada obtendo-se derivados bi-quaternários de quitosana. Todos os derivados foram caracterizados por técnicas de RMN 1 H, infra-vermelho (IR) e titulação potenciométrica e as suas atividades fungicidas testadas contra o crescimento micelial dos fungos A. flavus e A. parasiticus in vitro. Os estudos foram conduzidos variando-se a acidez e a força iônica do meio. Os resultados dos ensaios microbiológicos mostram que as atividades antifúngicas aumentam com o grau de substituição e os derivados mais substituídos de ambas as series, propil e pentil, exibiram respectivamente atividades três e seis vezes maiores que as quitosanas comercial e desacetilada. As concentrações inibitórias mínimas foram avaliadas após 24, 48 e 72 horas, variando-se a concentração dos polímeros de 0,5 a 16 g L -1 e os resultados mostraram que os derivados quaternários inibem o crescimento... The fungi of the genus Aspergillus, present in peanuts, corn, rice, nuts and other grains, are a constant concern nowadays due to its ability to produce carcinogenic toxins. Among the various techniques for controlling this microorganism it has been emphasized the use of natural products not harmful to the environment and at a low cost, for example, chitosan. This paper presents the synthesis and the characterization of two series of novel derivatives of chitosan for use as biofungicide against the Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus fungi. The first series of derivatives was synthesized by the reaction of deacetylated chitosan (QD) propyl bromide (Q-Propil) and pentyl trimethylammonium (Q-Pentil) for obtaining derivatives with increasing degrees of substitution (GS). The second series was obtained from the synthesis of bi-quaternary salts, with subsequent reaction with deacetylated chitosan to yield bi-quaternary derivatives of chitosan (Q-BPHD). All derivatives were characterized using NMR techniques, infra-red (IR) and potentiometric titration and fungicides activities were tested against A. flavus and A. parasiticus by evaluating the mycelial growth of fungi in vitro. The studies were conducted by varying the acidity and ionic strength of the medium. The antifungal activities increase with the degree of substitution and the most substituted derivatives from both series, propyl and pentyl, respectively exhibited activities three to six times lighter than the commercial and deacetylated chitosans. The minimum inhibitory concentrations were recorded after 24, 48 and 72 hours varying the concentration of polymer from 0.5 to 16 g L -1 and the results showed that the quaternary derivatives inhibit the growth of fungi in concentrations four times lower than deacetylated chitosan . The bi-quaternary derivative (Q-BPHD) showed the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-18Bitstream added on 2014-06-13T18:58:30Z : No. of bitstreams: 1 souza_rhfv_me_sjrp_parcial.pdf: 227052 bytes, checksum: 346b8df229c15977aeecc49e607866c6 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-23T17:35:44Z: souza_rhfv_me_sjrp_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-23T17:36:19Z : No. of bitstreams: 1 000713805.pdf: 736844 bytes, checksum: 5c3db864c655673a0978e9ecb86de411 (MD5) A quitosana e seus derivados têm se mostrado muito atrativos para a indústria de alimentos, visando principalmente a sua conservação. No presente trabalho foram sintetizados e caracterizados derivados de quitosana contendo grupos quaternários de amônio com proporções crescentes de grupos hidrofóbicos com o objetivo de investigar a atividade fungicida desses derivados contra os fungos Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus que são um problema na contaminação do amendoim e outros grãos. Os derivados foram sintetizados usando quitosana desacetilada e a reação foi realizada em duas etapas, sendo a primeira a quaternização do polímero com brometo de propiltrimetilamônio seguido da reação de aminação redutiva com dodecilaldeído. Os derivados foram caracterizados por RMN 1 H e os graus de substituição pelo grupo dodecil foram variados para melhorar a atividade antifúngica dos derivados. A atividade antifúngica da quitosana desacetilada e seus derivados foi testada variando-se a concentração dos polímeros de 0,1 a 1,0 g/L. Os resultados mostraram que a quitosana substituída com grupos propil exibiu uma baixa inibição contra o fungo Aspergillus flavus, resultado similar àquele obtido com quitosana desacetilada. Quanto aos derivados anfifílicos com conteúdo crescente de grupos dodecil, observou-se um aumento no índice de inibição com o aumento da concentração e do conteúdo hidrofóbico. A partir de 0,5 g/L os derivados anfifílicos contendo de 10% a 30% de grupos dodecil e 83% de grupos quaternários inibiram completamente o crescimento do fungo. Resultados similares foram obtidos no estudo de inibição do fungo Aspergillus parasiticus Chitosan and its derivatives have been shown very attractive for the food industry, mainly targeting its conservation. In this study were synthesized and characterized chitosan derivatives containing quaternary ammonium groups with increasing proportions of hydrophobic groups in order to investigate the antifungal activity of these derivatives against the fungi Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus that are a problem in the contamination of peanuts and other grains. The derivatives were synthesized using deacetylated chitosan and the reaction was carried out in two steps, first the quaternization of the polymer with propyltrimethylammonium bromide followed by reductive amination reaction with dodecylaldehyde. The derivatives were characterized by 1 HNMR and the degree of substitution by the group dodecyl was varied to enhance the antifungal activity of the derivatives. The antifungal activity of deacetylated chitosan and their derivatives was tested by varying the concentration of the polymers 0.1 to 1.0 g/L. The results showed that chitosan substituted with propyl groups exhibited a low inhibition against the fungus Aspergillus flavus, a result similar to that obtained with chitosan deacetylated. Regarding the amphiphilic derivatives with increasing content of dodecyl groups, we observed an increase in the rate of inhibition with increased concentration and hydrophobic content. Since 0.5 g/L amphiphilic derivatives containing from 10% to 30% dodecyl groups and 83% of quaternary groups inhibited completely growth of the fungus. Similar results were obtained in the study of inhibition of Aspergillus parasiticus

OBJECTIVE: This study evaluated, using digital radiographic images, the action of chitosan and chitosan hydrochloride biomaterials, with both low and high molecular weight, used in the correction of critical-size bone defects (CSBD's) in rat's calvaria. MATERIAL AND METHOD: CSBD's with 8 mm in diameter were surgically created in the calvaria of 50 Holtzman rats and these were filled with a blood clot (Control), low molecular weight chitosan, high molecular weight chitosan, low molecular weight chitosan hydrochloride and high molecular weight chitosan hydrochloride, for a total of 10 animals, which were divided into two experimental periods (15 and 60 days), for each biomaterial. The radiographic evaluation was made using two digital radiographs of the animal's skull: one taken right after the bone defect was created and the other at the moment of the sacrifice, providing the initial and the final radiographic bone density in the area of the defect, which were compared. RESULT: Analysis of radiographic bone density indicated that the increase in the radiographic bone density of the CSBD's treated with the proposed biomaterials, in either molecular weight, in both observed periods, where similar to those found in control group. CONCLUSION: Tested chitosan-based biomaterials were not able to enhance the radiographic density in the CSBD's made in rat's calvaria. OBJETIVO: Este estudo avaliou através de imagens radiográficas digitais, a ação de biomateriais de quitosana e de cloridrato de quitosana, com baixo e alto peso molecular, utilizados na correção de defeitos ósseos de tamanho crítico (DOTC)em calvária de ratos. MATERIAL E MÉTODO: DOTCs com 8 mm de diâmetro foram criados cirurgicamente na calvária de 50 ratos Holtzman. Em 10 animais o defeito foi preenchido foram preenchidos com coágulo sanguíneo (controle negativo). Os 40 animais restantes foram divididos de acordo com o biomaterial utilizado no preenchimento do defeito (quitosana de baixo peso e de alto peso molecular, e cloridrato de quitosana de baixo e de alto peso molecular), e foram avaliados em dois períodos experimentais (15 e 60 dias), totalizando 5 animais/biomaterial/período de avaliação. RESULTADO: A avaliação radiográfica foi feita utilizando duas radiografias digitais do crânio do animal: uma tomada logo após o defeito ósseo ser criado e a outra no momento do sacrifício. Nessas imagens, foi avaliada a densidade óssea radiográfica inicial e a final na área do defeito, que foram comparadas. As análises na densidade óssea radiográfica indicaram aumento da densidade óssea radiográfica dos DOTCs tratados para todos os biomateriais testados, em ambos os períodos. Resultados semelhantes foram encontrados no grupo controle. CONCLUSÃO: Conclui-se que os biomateriais de quitosana testados não foram capazes de aumentar a densidade radiográfica em DOTC realizados em calvária de ratos.

Made available in DSpace on 2021-07-14T10:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10. Added 1 bitstream(s) on 2021-07-14T11:39:25Z : No. of bitstreams: 1 S1807-25772012000500003.pdf: 973486 bytes, checksum: 9d5b5eb4b720266200309ed6d51b7833 (MD5) OBJETIVO: Este estudo avaliou através de imagens radiográficas digitais, a ação de biomateriais de quitosana e de cloridrato de quitosana, com baixo e alto peso molecular, utilizados na correção de defeitos ósseos de tamanho crítico (DOTC)em calvária de ratos. MATERIAL E MÉTODO: DOTCs com 8 mm de diâmetro foram criados cirurgicamente na calvária de 50 ratos Holtzman. Em 10 animais o defeito foi preenchido foram preenchidos com coágulo sanguíneo (controle negativo). Os 40 animais restantes foram divididos de acordo com o biomaterial utilizado no preenchimento do defeito (quitosana de baixo peso e de alto peso molecular, e cloridrato de quitosana de baixo e de alto peso molecular), e foram avaliados em dois períodos experimentais (15 e 60 dias), totalizando 5 animais/biomaterial/período de avaliação. RESULTADO: A avaliação radiográfica foi feita utilizando duas radiografias digitais do crânio do animal: uma tomada logo após o defeito ósseo ser criado e a outra no momento do sacrifício. Nessas imagens, foi avaliada a densidade óssea radiográfica inicial e a final na área do defeito, que foram comparadas. As análises na densidade óssea radiográfica indicaram aumento da densidade óssea radiográfica dos DOTCs tratados para todos os biomateriais testados, em ambos os períodos. Resultados semelhantes foram encontrados no grupo controle. CONCLUSÃO: Conclui-se que os biomateriais de quitosana testados não foram capazes de aumentar a densidade radiográfica em DOTC realizados em calvária de ratos. OBJECTIVE: This study evaluated, using digital radiographic images, the action of chitosan and chitosan hydrochloride biomaterials, with both low and high molecular weight, used in the correction of critical-size bone defects (CSBD's) in rat's calvaria. MATERIAL AND METHOD: CSBD's with 8 mm in diameter were surgically created in the calvaria of 50 Holtzman rats and these were filled with a blood clot (Control), low molecular weight chitosan, high molecular weight chitosan, low molecular weight chitosan hydrochloride and high molecular weight chitosan hydrochloride, for a total of 10 animals, which were divided into two experimental periods (15 and 60 days), for each biomaterial. The radiographic evaluation was made using two digital radiographs of the animal's skull: one taken right after the bone defect was created and the other at the moment of the sacrifice, providing the initial and the final radiographic bone density in the area of the defect, which were compared. RESULT: Analysis of radiographic bone density indicated that the increase in the radiographic bone density of the CSBD's treated with the proposed biomaterials, in either molecular weight, in both observed periods, where similar to those found in control group. CONCLUSION: Tested chitosan-based biomaterials were not able to enhance the radiographic density in the CSBD's made in rat's calvaria. Aarhus University, Department of Dentistry São Paulo State University, Araraquara Dental School University of São Paulo, São Carlos Chemistry Institute São Paulo State University, Araraquara Dental School

El objetivo del presente estudio fue utilizar arroz mezclado con quitina cruda de camarón como sustrato e inductor de quitinasas y proteasas de Lecanicillium lecanii en fermentación en medio sólido, además, se evaluó el efecto patogénico de conidios y enzimas producidas en medio sólido sobre el pulgón cenizo de la col. Cinco aislamientos de L. lecanii fueron caracterizados considerando el tamaño del conidio, la velocidad de germinación (GT5, GT50, y GT95), crecimiento radial en placa en dos medios de cultivo, esporulación y virulencia. La correlación entre el tamaño del conidio, la tasa máxima de crecimiento en placa y la tasa específica de crecimiento fueron altamente significativas. L. lecanii ATCC 26854 fue seleccionado por presentar altos porcentajes de infección y por su alta producción de enzimas extracelulares en fermentación en medio sólido (FMS) y líquido (FML). El incremento del contenido de humedad en FMS, tanto en bolsas de polipapel y matraces de 250 mL mejoro de manera significativa la producción de proteasas, endoquitinasas, N-acetil- hexosaminidasas así como la concentración de conidios (5.4 X 108 conidia /gss). También se encontró que la máxima actividad de proteasas fue a las 120 horas de cultivo, las endoquitinasas a las 96 horas y β-N-acetilhexosaminidasas a las 120 horas, con rendimientos de 9.79 U/g sustrato en base seca, 3.96 U/g ss y 0.795 U/g ss, respectivamente. El rango de mortalidad con el extracto enzimático y conidios de L. lecanii sobre Brevicoryne brassicae fue mayor (TL50 (95.3 horas)) comparado con la aplicación de conidios obtenidos en arroz o ADS (Agar-Dextrosa-Sabouraud). La mezcla de quitina cruda de camarón y arroz no produjo la cantidad de enzimas esperadas. Investigaciones posteriores podrán ampliar nuestro conocimiento sobre los mecanismos de virulencia entre aislamientos de L. lecanii.________The aim of this study was to utilize rice mixed with raw shrimp chitin both as substrate and inducer of chitinases and proteases of Lecanicillium lecanii in solid state fermentation, beside, the effect of conidia and enzymes produced in solid state fermentation was evaluated on the cabbage aphid. Five isolates of L. lecanii were characterized considering the size of conidia, germination speed (GT5, GT50, and GT95), radial growth rate in two culture media, sporulation and virulence. The correlation of infectivity with conidia size, maximum rate of growth and specific rate of growth was highly significant. L. lecanii ATCC 26854 was selected considering its high rate of infection and production of extracellular enzymes in solid (FMS) and liquid state fermentation (FML). The increase of moisture content in FMS in polythene bags and flasks of 250 mL improved the proteases, endochitinases, N-acetyl-hexosaminidasas and conidia (5.4 X 108 conidia /gss) yield significantly. The highest proteases activity required 120 hours, endochitinases 96 hours and B-N-acetyl-hexosaminidasas 120 hours with yields of 9.79 U/g substrate on dry basis, 3.96 U/g ss and 0.795 U/g ss respectively. Mortality rates with enzymatic extract and conidia took longer time (TL 50 (95.30 hours) compared with conidia harvested from rice or ADS. Raw shrimp chitin mixed with rice did not produce the expected amount of enzymatic extracts. Further research will expand our understanding of the mechanisms of virulence among isolates of L. lecanii.

Los principales objetivos del presente estudio fueron aislar y seleccionar bacterias ruminales quitinolíticas con alta capacidad para degradar quitina pura y caparazón de camarón in vitro, e identificar genéticamente a las bacterias seleccionadas usando secuencias de su gen 16S rARN amplificado mediante PCR. El aislamiento de las bacterias ruminales se inicio con un cultivo mixto liofilizado de bacterias quitinolíticas (CMBQ) obtenido de borregos alimentados con una dieta con 25% de caparazón de camarón. Se requirieron tres aislamientos progresivos para obtener dos bacterias ruminales puras. En el primer aislamiento se obtuvieron seis consorcios bacterianos: BQT1, BQT2, BQT3, BQT4, BQT6 y BQT6 , a partir de CMBQ. Por su alta capacidad para degradar quitina pura (62.69 % a las 72 h de incubación) se seleccionó al consorcio BQT1 para el segundo proceso de aislamiento. Se usaron medios de cultivo a base de glucosa, quitina pura o caparazón de camarón y se aislaron 18 colonias (seis de cada uno de los medios de cultivo). De estas colonias se seleccionó el consorcio bacteriano Q6 (aislado del medio de cultivo con quitina pura) ya que causo la mayor degradación (p≤0.01) de quitina (33.31%) y caparazón de camarón (23.10 %) a las 72 h de fermentación. En el tercer aislamiento se obtuvieron dos bacterias, Q6a y Q6b. Estas bacterias no tienen una importante capacidad de degradar caparazón de camarón en cultivos axénicos (17.64 y 12.60% a las 72 h de incubación), pero en cocultivo, su capacidad aumenta ( p≤0.05) a 36.37%. Estos resultados indican una interacción sinérgica en la d egradación del caparazón de camarón entre las dos bacterias aisladas. Para la identificación genética de las dos bacterias aisladas se usaron fragmentos de 796 pb y se encontró que, con un 99% de similitud, Q6a pertenece a la especie Bacillus licheniformis, mientras que Q6b está emparentada al género Enterococcus y sólo falta discernir si pertenece a la especie E. faecium, E. durans o E. lactis._________The main objectives of this study were to isolate and select chitin- degrading rumen bacteria with high capacity to degrade pure chitin and shrimp shell waste in vitro, as well as to identify genetically these bacteria, using their 16S rRNA gene sequences amplified by PCR. The isolation of rumen bacteria was started with a lyophilized chitin -degrading mixed culture (ChDMC), obtained from lambs fed a diet containing 25% shrimp shell waste. Three progressive isolations were required in order to obtain two pure rumen bacteria. In the first isolation six bacteria consortia were obtained: BQT1, BQT2, BQT3, BQT4, BQT5 and BQT6, from the ChDMC. Due to its high capacity to degrade pure chitin (62.69% after 72 h incubation), BQT1 was select ed for the second isolation procedure. Culture media based on glucose, chitin or shrimp shell waste were used, and 18 bacteria colonies were obtained (six from each culture media). The bacteria consortia Q6 (isolated from the culture medium with pure chiti n) was selected from all these colonies, since these bacteria caused the highest (p≤0.01) chitin (33.31%) and shrimp shell waste (23.10%) degradation after 72 h incubation. Two bacteria, Q6a and Q6b, were obtained in the third isolation. Axenic cultures of these bacteria have not an important chitin-degrading capacity (17.64 and 12.60% after 72 h incubation), but in coculture their capacity has a significant (p≤0.05) increase, 36.37%. These results indicate a synergic interaction for chitin degradation between this two isolated bacteria. Fragments of 796 bp were used for the genetic identification of the two isolated bacteria; it was found, with 99% of similitude, that Q6a belongs to the specie Bacillus licheniformis, and Q6b is a family member of the genus Enterococcus, but it is still required to confirm if this bacteria belongs to the specie E. faecium, E. durans or E. lactis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-21Bitstream added on 2014-06-13T19:58:56Z : No. of bitstreams: 1 pereira_fs_me_bauru.pdf: 1450189 bytes, checksum: abd0b71fa89bda3df1f8153f2dcbe346 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O presente trabalho descreve modificações estruturais feitas na cadeia lateral do polímero quitina-quitosana mediante a N-alquilação com um aldeído aromático, a qual origina a base de Schiff como produto intermediário, seguido de uma redução com cianoborohidreto de sódio (NaBH3CN) para a formação do composto N-Benzilquitosana. Subsequentemente, reações de acoplamento entre o produto sintetizado e diferentes sais de diazônio foram realizadas para produzir uma nova classe de compostos poli-azóicos a partir deste polímero. Estas modificações são importantes pela síntese de novos derivados com potencial aplicação como materiais orgânicos. Pela técnica de ressonância magnética nuclear de próton em solução, determinou-se o grau de desacetilação do polímero que foi de 68 %. O grau de substituição do derivado N-Benzilquitosana também foi determinado por RMN de 1H e o valor encontrado foi de 46 %. Todos os compostos foram caracterizados por espectroscopia de absorção na região do infravermelho e ressonância magnética nuclear em solução e no estado sólido, que confirmaram a síntese dos derivados poliméricos. Devido ao alto peso molecular do polímero e seus derivados, estes foram hidrolisados e os oligômeros formados foram estudados por espectrometria de massas com ionização por eletrospray. Além de confirmar a formação do composto N-Benzilquitosana, constatou-se uma reação de substituição nucleofílica aromática do átomo de bromo e do grupo nitro pelo átomo de cloro promovido pela alta concentração de íons cloretos no meio reacional. Entretanto, a técnica não se mostrou adequada para a caracterização dos poli-azo-compostos, pois a reação de hidrólise ácida leva a uma degradação dos mesmos. A espectroscopia de UV-VIS permitiu identificar as bandas de absorção dos... The present work describes the structural modifications made in the side chain of the polymer chitin-chitosan by N-alkylation with an aromatic aldehyde, which forms the Schiff base as an intermediate, followed by reduction with sodium cyanoborohydride (NaBH3CN) to form the N-Benzyl chitosan compound. Subsequently, coupling reactions between the synthesized product and different diazonium salts were made to produce a new class of poly-azo-compounds from this polymer. These changes are important for the synthesis of new derivatives with potential use as organic materials. By proton nuclear magnetic resonance, it was determined the degree of deacetylation of the polymer, which was 68%. The degree of substitution of N-Benzyl chitosan derivative was also determined by 1H NMR and the value was 48%. All compounds were characterized by Fourier transform infrared spectroscopy and nuclear magnetic resonance, which confirmed the synthesis of polymeric derivatives. Due to the high polymer molecular weight and its derivatives, they were hydrolysed and the oligomers formed were analyzed by mass spectrometry with electrospray ionization. In addition to confirm the formation of the compound N-Benzyl chitosan, there was a nucleophilic aromatic substitution reaction of the bromine atom and the nitro group by chlorine atom promoted by high concentration of chloride ions in the reaction medium. However, the technique was not suitable for the characterization of poly-azo-compounds because the reaction of acid hydrolysis leads to their degradation. The UV-VIS spectroscopy allowed the identification of the absorption bands of poly-azo-compounds and showed that the substituents influence the absorption causing an batocromic effect to a longer wavelength. Finally, it was studied the thermal behavior of the polymer chitin-chitosan and its derivatives by thermogravimetry... (Complete abstract click electronic access below)

El exoesqueleto de camarón desechado por la industria puede ser aprovechado para la obtención de quitina y quitosano con la utilización de reactivos comerciales de muy bajo costo. El quitosano es un biopolímero que tiene diversos usos, entre ellos, la remoción de metales pesados a partir de aguas residuales. En este estudio se utilizó quitosano para la remoción de cromo hexavalente a partir de muestras de aguas residuales del proceso de galvanizado (cromado) de una industria de Cartagena. La remoción de cromo se realizó por un proceso discontinuo, a un pH óptimo encontrado en este estudio de 2.0 y una temperatura de 26 °C. La cinética de adsorción fue estudiada mediante el uso de la isoterma de Langmuir, siendo la capacidad máxima de adsorción (Qmax) de 200 mg/g. La remoción de cromo hexavalente a partir de las muestras de aguas residuales fue del 99.98 %. The exoskeleton of shrimp discarded by the industry, can be used for the production of chitin and chitosan with the use of very low cost commercial reagents. Chitosan is a biopolymer that has many uses, including heavy metals removal from wastewater. In this study, chitosan was used to remove hexavalent chromium from wastewater samples from the galvanizing process (chrome) of an industry in the city of Cartagena. The chromium removal was performed by a batch process at an optimum pH found in this study of 2.0 and a temperature of 26 °C. The adsorption kinetics was studied by using the Langmuir isotherm, being the maximum adsorption capacity (Qmax.) of 200 mg/g. The removal of hexavalent chromium from wastewater samples was 99.98 %. O exoesqueleto de camarão desperdiçado pela indústria pode ser aproveitado para a obtenção de quitina e quitosana usando reagentes comerciais de baixo custo. A quitosana é um biopolimero que tem diversos usos como a remoção de metais pesados de aguas residuais. Neste estudo se usou quitosana para a remoção de cromo hexavalente de amostras de aguas residuais do processo de galvanizado (cromado) de uma indústria da cidade de Cartagena (Colômbia). A remoção do cromo se realizou através de um processo continuo em um pH de 2.0 como condição ótima encontrada durante a realização deste estudo e uma temperatura de 26 °C. A cinética de adsorção foi estudada através do uso da isoterma de Langmuir, sendo a capacidade máxima de adsorção (Qmax) de 200 mg/g. A remoção de cromo hexavalente a partir das amostras residuais foi de 99.98 %.

Chitin is an abundant biopolymer that can be found in shells of crustaceans, insects and in squid and pota pen. Deacetylation of chitin produces chitosan, a more versatile polysaccharide due to its solubility and increased chemical reactivity. Chitosan is used in medicine, pharmaceutics, cosmetics, water treatment, agriculture and food industry. La quitina es un biopolímero muy abundante presente en el caparazón de crustáceos, insectos y en la pluma del calamar y la pota, entre otras fuentes. La desacetilación de la quitina forma la quitosana, un polisacárido más versátil por su solubilidad y mayor reactividad química. La quitosana es utilizada en aplicaciones médicas, farmacéuticas, cosméticas, tratamiento de aguas, agricultura e industria alimentaria.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Chitin and chitosan are nontoxic, biodegradable and biocompatible polymers produced by renewable natural sources with applications in diverse areas such as: agriculture, textile, pharmaceutical, cosmetics and biomaterials, such as gels, films and other polymeric membranes. Both have attracted greater interest of scientists and researchers as functional polymeric materials. In this context, the objective of this study was to take advantage of the waste of shrimp (Litopenaeus vannamei and Aristeus antennatus) and crabs (Ucides cordatus) from fairs, beach huts and restaurant in Natal/RN for the extraction of chitin and chitosan for the production of membranes by electrospinning process. The extraction was made through demineralization, deproteinization, deodorization and deacetylation. Morphological analyzes (SEM and XRD), Thermal analysis (TG and DTG), Spectroscopy in the Region of the Infrared with Transformed of Fourier (FTIR) analysis Calorimetry Differential Scanning (DSC) and mechanical tests for traction were performed. In (XRD) the semicrystalline structure of chitosan can be verified while the chitin had higher crystallinity. In the thermal analysis showed a dehydration process followed by decomposition, with similar behavior of carbonized material. Chitosan showed temperature of maximum degradation lower than chitin. In the analysis by Differential Scanning Calorimetry (DSC) the curves were coherent to the thermal events of the chitosan membranes. The results obtained with (DD) for chitosan extracted from Litopenaeus vannamei and Aristeus antennatus shrimp were (80.36 and 71.00%) and Ucides cordatus crabs was 74.65%. It can be observed that, with 70:30 solutions (v/v) (TFA/DCM), 60 and 90% CH3COOH, occurred better facilitate the formation of membranes, while 100:00 (v/v) (TFA/DCM) had formation of agglomerates. In relation to the monofilaments diameters of the chitosan membranes, it was noted that the capillary-collector distance of 10 cm and tensions of 25 and 30 kV contributed to the reduction of the diameters of membranes. It was found that the Young s modulus decreases with increasing concentration of chitosan in the membranes. 90% CH3COOH contributed to the increase in the deformation resulting in more flexible material. The membranes with 5% chitosan 70:30 (v/v) (TFA/DCM) had higher tensile strength Quitina e quitosana são polímeros atóxicos, biodegradáveis e biocompatíveis produzidos por fontes naturais renováveis com aplicações em diversas áreas como: agricultura, têxtil, farmacêutica, cosméticos e biomateriais, tais como géis, filmes, membranas poliméricas entre outros. Ambas têm despertando grande interesse de cientistas e pesquisadores como materiais poliméricos funcionais. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi aproveitar os resíduos de camarões (Litopenaeus vannamei e Aristeus antennatus) e de caranguejos (Ucides cordatus) proveniente de feiras, barracas de praia e restaurantes em Natal/RN para extração de quitina, quitosana e produção de membranas pelo processo de eletrofiação. A extração foi realizada a partir das etapas de desmineralização, desproteinização, desodorização e desacetilação. Análises morfológicas (MEV e DRX), análises das propriedades térmicas (TG e DTG), análise por Espectroscopia na Região do Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), análise de Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) e ensaios mecânicos por tração foram realizados. Na análise de DRX pode-se verificar a estrutura semicristalina da quitosana enquanto a quitina teve alta cristalinidade. As análises térmicas demonstraram um processo de desidratação seguido da decomposição com comportamento similar de material carbonizado. A quitosana apresentou temperaturas de máxima degradação mais baixas do que a quitina. Na análise por Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) as curvas foram coerentes aos eventos térmicos das membranas de quitosana. Os resultados obtidos com (GD) para quitosana extraída de camarões Litopenaeus vannamei e Aristeus antennatus foram (80,36 e 71,00%) e caranguejos Ucides cordatus foi 74,65%. Pode-se perceber que, com soluções 70:30 (v/v) (TFA/DCM), 60 e 90% CH3COOH, ocorreu melhor facilitação na formação das membranas, enquanto em 100:00 (v/v) (TFA/DCM) houve formação de aglomerados. Em relação aos diâmetros dos nanofilamentos das membranas de quitosana, percebeu-se que a distância capilar-coletor de 10 cm e tensões de 25 e 30 kV contribuíram para a redução dos diâmetros das membranas. Quanto ao módulo de Young diminui com o aumento da concentração da quitosana nas membranas. 90% CH3COOH contribuiu para o aumento da deformação, sendo um material mais flexível. As membranas com 5% quitosana 70:30 (v/v) (TFA/DCM) apresentaram maior valor de resistência à tração

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2017-04-20T11:39:08Z No. of bitstreams: 1 2012 - Vanessa Paulino da Cruz Vieira.pdf: 1181202 bytes, checksum: 7bfcf1b5c3509ddacbb033dcaf5448c3 (MD5) Made available in DSpace on 2017-04-20T11:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012 - Vanessa Paulino da Cruz Vieira.pdf: 1181202 bytes, checksum: 7bfcf1b5c3509ddacbb033dcaf5448c3 (MD5) Previous issue date: 2012-03-29 Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq This study was conducted to evaluate the activity of fluazuron administered orally in the control of R. sanguineus in dogs. A total of 12 beagle dogs which, on day 0, treatment day, were divided into two groups: Group 1. Six animals treated with oral formulation fluazuron at a dose rate of 20 mg / kg body weight and Group 2. Six dogs kept as control without treatment. On the same day, containment devices for ticks denim cloth were attached with glue to the back trichotomized dogs. After this procedure, three challenges were performed on days +1, +20 and +40, where the animals of both groups received infestations with the three stage of the tick R. sanguineus: approximately 2.500 larvae, 200 nymphs and 25 adult couples. Were used a climatic chamber with biochemical oxygen demand, BOD, at a temperature of 27 ? 1 ? C and relative humidity of 80 ? 10%. From the fourth to tenth day after each challenge, the devices were opened daily to the collection of engorged stages. Larvae and nymphs were counted and divided into syringes for evaluating the changes. The engorged females were collected and fixed in petri dishes to perform the posture that was weighed and placed in syringes, sealed with cotton, to calculate the hatchability. The efficacy of recovery fluazuron on larvae of A. sanguineus in dogs was 84.3% for day of challenge of the day +20 and 36% for the day +40. With regard to the recovery of engorged nymphs of R. sanguineus in dogs fluazuron achieved an efficacy of 82.4% and 51.7% on days +20 and +40. There was statistical difference between the mean number of engorged nymphs of R. sanguineus recovered on days +20 and +40 (p ? 0.05). The efficacy of recovery of the fluazuron engorged females was lower than 30.3% over the whole experimental period. The efficacy of treatment on reproductive performance of R. sanguineus was less than 12.4% in the three days of challenge. In inhibiting the change of larvae or nymphs ecdysis, fluazuron showed the effectiveness of 0%, 96.9% and 45.0% for days +1, +20 and +40, respectively. On day +20, there was a statistically significant difference between the mean engorged larvae to nymphs who underwent changes (p ? 0.05). The effectiveness of fluazuron on the inhibition of molting or ecdysis of nymphs to adults was 0%, 99.5% and 63.5% for days +1, +20 and +40, respectively, a statistically significant difference between mean the control and treated groups on days +20 and +40 (p ? 0.05). The growth regulator arthropod fluazuron is effective in helping control larvae and nymphs of R. sanguineus, when administered orally to dogs at a dose of 20mg/Kg. The same dose and route of administration, has no significant negative effect on female reproductive R. sanguineus. O presente trabalho foi realizado com o objetivo avaliar a atividade do fluazuron administrado por via oral no controle de R. sanguineus em c?es. Foram utilizados 12 c?es da ra?a Beagle, que, no dia 0, dia do tratamento, foram divididos em dois grupos: Grupo 1. Seis c?es tratados com formula??o oral de fluazuron na dosagem de 20 mg/Kg de peso corporal e Grupo 2. Seis c?es mantidos como controle, sem tratamento. No mesmo dia, dispositivos para conten??o de ixod?deos de pano brim foram aderidos com cola ao dorso tricotomizado dos c?es. Ap?s esse procedimento, foram realizados tr?s desafios, nos dias +1, +20 e +40, onde os animais dos dois grupos receberam infesta??es com as tr?s fases do carrapato R. sanguineus: aproximadamente 2.500 larvas, 200 ninfas e 25 casais de adultos. Foi utilizada c?mara climatizada com demanda bioqu?mica de oxig?nio, tipo BOD, a uma temperatura de 27 ? 1oC e umidade relativa de 80 ? 10%. Do quarto ao d?cimo dia ap?s cada desafio, os dispositivos foram abertos diariamente para a coleta das fases ingurgitadas. As larvas e as ninfas foram contadas e separadas em seringas para a avalia??o da muda. As f?meas ingurgitadas foram coletadas e fixadas em placas de petri para realiza??o da postura que foi pesada e colocada em seringas, vedadas com algod?o, para o c?lculo da eclodibilidade. A efic?cia do fluazuron sobre a recupera??o de larvas de R. sanguineus em c?es foi de 84,3% para o desafio do dia +20 e 36% para o dia +40. Com rela??o ? recupera??o de ninfas ingurgitadas de R. sanguineus em c?es, o fluazuron obteve uma efic?cia de 82,4% e 51,7% nos dias +20 e +40. Houve diferen?a estat?stica entre os n?meros m?dios de ninfas ingurgitadas de R. sanguineus recuperadas nos dias +20 e +40 (p?0,05). A efic?cia do fluazuron sobre a recupera??o de f?meas ingurgitadas foi inferior a 30,3% durante todo o per?odo experimental. A efic?cia do tratamento sobre a efici?ncia reprodutiva de R. sanguineus se apresentou inferior a 12,4% nos tr?s dias de desafio. Na inibi??o da muda ou ecdise de larvas para ninfas, o fluazuron apresentou uma efic?cia de 0%, 96,9% e 45,0% para os dias +1, +20 e +40, respectivamente. No dia +20, observou-se diferen?a estat?stica significativa entre as m?dias de larvas ingurgitadas que realizaram muda para ninfas (p?0,05). A efic?cia do fluazuron sobre a inibi??o da muda ou ecdise de ninfas para adultos foi de 0%, 99,5% e 63,5% para os dias +1, +20 e +40, respectivamente, havendo diferen?a estat?stica significativa entre as m?dias dos grupos controle e tratado nos dias +20 e +40 (p?0,05). O regulador de crescimento de artr?podes fluazuron ? eficaz no aux?lio do controle de larvas e ninfas de R. sanguineus, quando administrado oralmente em c?es, na dose de 20mg/Kg. Na mesma dose e via de administra??o, n?o apresenta efeito negativo significativo na reprodu??o de f?meas de R. sanguineus.

JEREISSATI, E. S. Transformação genética de feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp] e tabaco (Nicotiana tabacum) com uma quitinase de classe I. 2012, Transformação genética de feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp] e tabaco (Nicotiana tabacum) com uma quitinase de classe I. 120 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. Heterologous expression of genes encoding pathogenesis related proteins (PR-proteins) represents a promising alternative for the development of plants resistant to fungi. Among the PR-proteins with great biotechnological potentials are the chitinases, a class of hydrolases which catalyze the degradation of chitin, a polymer constituent of cell wall of several species of pathogenic fungi. Besides their function related to defense mechanisms, it is believed that these enzymes may play other roles, such as regulation of growth and development processes in plants. Using two approaches, this study sought to investigate the role of a class I chitinase of cowpea (VuChiI) in defense and plant development. The first approach consisted of silencing of the gene encoding for VuChiI in cowpea. Apical meristems excised from cowpea seeds were bombarded with microparticles containing a silencing vector (pKANNIBAL), which was cloned with a construct harboring an intron harpin of the gene VuChiI. Plants regenerated in a Murashige and Skoog (MS) media containing imazapyr as a selection agent, were analyzed by PCR, resulting in confirmation of genetic transformation of five plants from the 1092 apical meristems bombarded. Northern blot analysis of total RNA extracted from the putative transgenic plants allowed for the detection of siRNAs. Upon regeneration and germination, only one of the five transformed plants produced a pod containing six seeds. Of these, only one germinated when further planted. The transformed plants exhibited a life cycle of over 365 days, as against the normal cycle of 65-70 days. Based on these results we posit that silencing of class I cowpea chitinase may have led to changes in plant development. The second strategy consisted of co-cultivation of tobacco leaf discs with Agrobacterium tumefaciens strain LB4404 suspension to express recombinant protein in the extracellular space of the regenerated plants in order to expose the protein fungus even before its penetration into the plant cell. To achieve this, a sequence of cowpea chitinase insert was cloned into the binary vector pCAMBIA1305.2 under the control of CaMV35S promoter and signal peptide fused to glycine-rich protein of Oryza sativa (GRP), which allowed the secretion of recombinant protein via apoplast. This led to the generation of three strains as confirmed by PCR. Seeds obtained from transformed R1 generation of the plants were germinated and analyzed for transmission of the transgene using X2 test, which confirmed its transmission to the progeny in a Mendelian fashion. The experimental models developed in this work may serve to further assess the biological roles of class I chitinase from cowpea. A expressão heteróloga de genes que codificam proteínas relacionadas à patogênse (PR-proteínas) representa uma alternativa promissora para o desenvolvimento de plantas resistentes ao ataque de fungos. Dentre as PR-proteínas com grande potencial biotecnológico, estão as quitinases, hidrolases que catalisam a degradação da quitina, que é um polímero constituinte da parede celular de muitas espécies de fungos fitopatogênicos. Além da função relacionada aos mecanismos de defesa, acredita-se que essas enzimas podem desempenhar outros papéis, como a regulação de processos de crescimento e desenvolvimento em plantas. O objetivo deste trabalho foi estudar o papel de uma quitinase de classe I de feijão-caupi (VuChiI) na defesa e no desenvolvimento vegetal e para isso duas abordagens foram conduzidas. A primeira consistiu no silenciamento do gene que codifica esta proteína em plantas de feijão-caupi. Nos experimentos de silenciamento gênico foram utilizados meristemas apicais de plântulas de feijão-caupi, que foram então bombardeados com micropartículas portando um vetor de silenciamento (pKANNIBAL), onde foi clonada uma construção em grampo (intron harpin) do gene de VuChiI. As plantas regeneradas em meio de cultura de Murashige e Skoog (MS) contendo o herbicida imazapyr, como agente de seleção, foram analisadas por PCR, o que resultou na confirmação da transformação genética de cinco plantas, a partir de 1.092 meristemas apicais bombardeados. O RNA foi extraído das plantas transformadas e utilizado em análises de Northern blot que possibilitou a detecção de siRNAs no RNA total extraído das plantas putativamente transgênicas. Apenas uma das plantas transformadas produziu uma vagem contendo seis sementes, das quais apenas uma germinou. As plantas transformadas apresentaram ciclo de vida de mais de 365 dias enquanto que o esperado é de 65-70 dias. Com base nos resultados sugere-se que o silenciamento da quitinase de classe I de feijão-caupi pode ter promovido alteração no desenvolvimento da planta. A segunda estratégia de transformação genética consistiu no co-cultivo de discos foliares de tabaco com suspensão de Agrobacterium tumefaciens LB4404, com o intuito de expressar a proteína recombinante no espaço extracelular das plantas regeneradas. Essa estratégia tem como objetivo fazer com que a proteína entre em contato com o fungo antes mesmo que este agente patogênico penetre na célula vegetal. Para tanto, o inserto referente à quitinase de feijão-caupi foi clonado no vetor binário pCAMBIA1305.2 sob controle do promotor CaMV35S e fundido ao peptídeo sinal GRP (glycine-rich protein de Oryza sativa), que permite a secreção da proteína recombinante via apoplasto. Foram produzidas três linhagens de plantas que tiveram a transformação genética confirmada por PCR. As sementes obtidas das plantas transformadas, geração R1, foram semeadas em meio seletivo para a análise da transmissão do transgene. O teste de X2 indicou que o transgene foi transmitido para a progênie em proporções Mendelianas. Os modelos experimentais desenvolvidos neste trabalho poderão contribuir para a elucidação dos papéis biológicos da quitinase de classe I de feijão-caupi.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-graduação em Engenharia Ambiental Existem cada vez mais evidências de que o alumínio é prejudicial para a saúde. Seu excesso no organismo prejudica o transporte de ferro e as funções do ATP, além de provocar osteomalacia, encefalopatia por diálise e anemia microcítica. Suspeita-se também que possa ser um fator desencadeante da doença de Alzheimer e da esclerose múltipla. Uma das fontes mais importantes de entrada de alumínio no organismo humano é a água potável. A tecnologia empregada para remover o alumínio foi a remoção via uso de biopolímeros, por serem materiais abundantes e biodisponíveis, renováveis, de custo relativamente baixo e não tóxicos. Os biopolímeros escolhidos em base à literatura foram a carboximetilcelulose e a quitina. Estes biomateriais podem remover alumínio via processos de adsorção e/ou de complexação via formação de ligações entre seus grupos funcionais e o alumínio. O presente trabalho objetivou: a) determinar a capacidade de remoção de Al3+ por ambos os biopolímeros na faixa de concentração do metal encontrada em água de abastecimento público; b) caracterizar o mecanismo e a velocidade do processo de remoção de Al3+ pelos biopolímeros por meio de estudos isotérmicos, espectroscópicos e cinéticos; c) efetuar estudos de remoção de alumínio em fluxo contínuo visando encontrar os melhores parâmetros operacionais. Os ensaios de remoção de alumínio foram efetuados em regime de batelada utilizando soluções aquosas sintéticas contendo diferentes concentrações de alumínio e diferentes quantidades de biopolímeros. Foram efetuados diferentes experimentos para determinar as condições ideais de pH, temperatura, relação quantidade de biopolímero/concentração de alumínio e tempo de contacto água/biopolímero que levam às melhores remoções de alumínio. Os resultados permitiram concluir que a carboximetilcelulose não é um agente de remoção de alumínio adequado quando este se encontra presentes em baixas concentrações características de águas para abastecimento. Em contraste, a quitina demonstrou uma capacidade de remoção excelente, mesmo a temperatura ambiente e sem necessidade de modificar o pH da amostra. Com objeto de caracterizar o mecanismo que rege a remoção de alumínio pelos biopolímeros, foram efetuados estudos de isotermas de adsorção utilizando soluções sintéticas. Os dados experimentais dos ensaios foram comparados com os modelos de isoterma de Langmuir, Freundlich, Sips e Tóth. O modelo que melhor ajustou-se foi o de Tóth, o que indica um mecanismo de remoção via quimissorção, mas com interações Al-biopolímero mais fracas que as correspondentes ao modelo de Langmuir. A capacidade máxima de remoção de alumínio calculada foi de 20,144 mg Al3+ / g quitina, valor muito adequado para o emprego de quitina em procedimentos em maior escala. Análises por espectroscopia infravermelha (IFTR) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) contribuíram para uma melhor caracterização do material, antes e após o processo de remoção, bem como do mecanismo envolvido no processo. Os estudos cinéticos, efetuados com soluções sintéticas, água de poço e água decantada de estação de tratamento de água, revelaram cinéticas de pseudo-segunda ordem, atingindo-se os residuais de alumínio permitidos pela normativa em ~30 minutos para o biopolímero quitina. Para a remoção total de alumínio foram necessários tempos de contacto de ~160 minutos, dependendo da relação Al3+/biopolímero usada. Os ensaios em fluxo contínuo e descendente de água de poço através de uma coluna contendo quitina compactada mostraram-se muito promissores. A técnica mostrou-se capaz de remover alumínio de grandes volumes de água com tempos curtos de contacto sem atingir a saturação do biopolímero, demonstrando uma capacidade de remoção máxima de 9,53 mg Al3+/ g quitina, sendo capaz de manter a água abaixo do valor máximo permitido nas condições analisadas por mais de 2 horas com uma taxa de 6,7 m3 m-2 h-1. O estudo efetuado demonstrou que a quitina é um biomaterial muito adequado para a remoção de alumínio de água para abastecimento, tanto em regime de batelada como em contínuo. Estes resultados, junto com seu baixo custo, que faz desnecessário aplicar processos para sua regeneração após saturação, permitem concluir que a quitina é um excelente agente de remoção de alumínio a escala de laboratório que pode ser testado em experimentos em maior escala There is increasing evidence that aluminum may be harmful to human health. Its excess impairs the body iron transport and functions of ATP, besides causing osteomalacia, dialysis encephalopathy and microcytic anemia. It is suspected that can also be a trigger factor of Alzheimer's disease and multiple sclerosis. One of the most important sources of aluminum intake and ingestion in the human body is drinking water. Therefore, this study aimed to remove the aluminum present in water supplies, from both natural and introduced from coagulants used in water treatment stations. The technology employed to remove the aluminum was via use of biopolymers, to be bioavailable, abundant, renewable, relatively inexpensive non-toxic materials. The polymers chosen were based on literature were carboxymethylcellulose and chitin. Those biomaterials can remove aluminum via adsorption processes and/or complexing via the formation of bonds between their functional groups and aluminum. This study aimed to: a) determine the removal capacity of Al3+ for both polymers in the concentration range of metal found in public water supply, b) to characterize the mechanism and speed the process of Al3+ removal by the biopolymers through isothermal, kinetic and spectroscopic studies; c) conduct aluminum removal studies in continuous flow in order to find the best operating parameters. The aluminum removal tests were made under batch conditions, using synthetic aqueous solutions containing different concentrations of Al3+ and different amounts of biopolymers. Several experiments were performed to determine the optimal conditions of pH, temperature, relative amount of biopolymer/aluminum concentration and contact time water/biopolymer that lead to a better Al3+ removal. The results showed that carboxymethylcellulose is not an suitable agent for Al3+ removal when it is present in low concentrations of features for water supply. In contrast, a chitin demonstrated excellent ability to remove Al3+, even at room temperature and without need to modify the pH of the sample. Aiming characterizing the mechanism governing the removal of aluminum by biopolymers, adsorption isotherms studies using synthetic solutions were carried out. The experimental tests were compared with the Langmuir, Freundlich, Sips and Toth isothermal models. The model that best fitted the experimental data was Tóth model, which indicates a removal mechanism through chemisorption, but with a Al-biopolymer interaction weaker than those corresponding to the Langmuir model. The maximum aluminum removal was estimated to be 20.144 mg Al3+/g chitin, a very suitable value for the use of chitin in procedures on a larger scale. Analysis by infrared spectroscopy (IFTR) and scanning electron microscopy (SEM) contributed to a better characterization of the material before and after the removal process as well as the mechanism involved. The kinetic studies performed with synthetic solutions, well water and decanted Water Treatment Plant water, showed kinetics of pseudo-second order, reaching the residual aluminum allowed by WHO guide in ~ 30 minutes for the biopolymer chitin, with a complete Al3+ removal from the solution within a contact time of ~ 160 minutes, depending on the relationship Al3+/QTN used. The tests and down-stream flux of well water through a packed column containing QTN were very promising. The QTN was capable of removing aluminum from large volumes of water with short times of contact without reaching the saturation of the biopolymer, showing a maximum adsorption capacity of 9.53 mg Al3+/g chitin, being capable of maintaining the water below the maximum permitted concentration for over two hours at a rate of 6,7 m3 m2 h-1. The studies performed demonstrated that chitin is a biomaterial very suitable for the removal of water for aluminum, both under batch and continuous. These results, along with its low cost, which makes it unnecessary to apply processes for regeneration after saturation, allow to conclude that the chitin is an excellent agent for removing aluminum laboratory scale that can be tested in experiments on a larger scale

La industria pesquera de crustáceos, entre ellos el camarón, genera altos volúmenes de residuos provenientes de los exoesqueletos y cabezas, que alcanzan en Colombia un promedio de 40% del total de pesca. Entre los principales emplazamientos pesqueros en la costa Pacífica colombiana se encuentran los puertos de Buenaventura y Tumaco donde, además de pesca de arrastre, la acuicultura contribuye con un porcentaje significativo de residuos. Por otra parte, la industria biotecnológica, en especial la producción de ácido cítrico, genera residuos de biomasa de hongos como Penicilium y el Aspergillus en grandes proporciones que producen malos olores, atraen plagas y contaminan el suelo y el agua. Un manejo adecuado de estos residuos permite su aprovechamiento a través de la extracción de quitosano, que es un biopolímero de amplio uso en aplicaciones tecnológicas como piel sintética, soporte para inmovilización enzimática y conductores iónicos, entre otros. En este trabajo se realizó la extracción de quitina y quitosano a partir de residuos de camarón y micelio del hongo A. níger y se caracterizaron a través de métodos físicos y químicos.

In this study, chitosan extracted from Penaeus Vannamei shrimp was modified to prepare two adsorbent materials: chitosan-glutaralaldehyde (QGD) and chitosan-ferric nitrate (QFe). Effects of the pH, dosage of adsorbent, stirring speed, temperature and contact time were evaluated. The best lead adsorption was found to occur onto QGD at pH 6,75-7,00; dosage of adsorbent 0,35-0,50g and time of contact 151-175min. The efficiency of lead remotion with QGD was 98,40% and the isothermal study of adsorptive capacity showed an absorption of 282,61mg of Pb2+ per g of QGD. En este estudio, el quitosano fue extraído y modificado a partir de caparazones de camarón Penaeus Vannamei con el cual se prepararon dos materiales adsorbentes: quitosano-glutaraldehído (QGD) y quitosano-nitrato férrico (QFe). En la primera etapa experimental fue seleccionado el material adsorbente (QGD) que presenta un mayor porcentaje de adsorción. En las etapas experimentales posteriores son analizadas las influencias de factores como el pH, la dosificación del adsorbente, velocidad de agitación, temperatura y tiempo de contacto en la adsorción de plomo en QGD; estableciéndose en la optimización que son determinantes: el pH, la dosificación del adsorbente y el tiempo de contacto en un rango de 6,75-7,00; 0,35-0,50 g y 151-175 min respectivamente. Teniéndose una eficiencia en remoción de plomo con QGD de 98,40% y encontrándose a partir del estudio isotérmico que la capacidad adsorbente de este material es de 282,61mgPb2+/gQGD

En este trabajo se hace uso de una serie de materias primas renovables para llevar a cabo la optimización de la formulación y el proceso de producción de nuevas grasas lubricantes totalmente biodegradables, utilizando aceites vegetales como fluido base y diversos polímeros y/o agentes gelificantes biodegradables como espesantes, por ejemplo, monoestearatos de sorbitano y glicerilo y los dos polímeros más abundantes en la naturaleza, celulosa y quitina, o algunos derivados químicos de éstos. Para ello, se ha efectuado una caracterización fundamentalmente reológica y mecánica de las formulaciones resultantes así como un análisis térmico, evaluando la influencia de los polímeros biodegradables utilizados como espesantes. También se han realizado una serie de ensayos tribológicos para determinar el comportamiento de estas nuevas grasas en condiciones simuladas de lubricación. Finalmente, como resultado de esta investigación, se proponen una serie de formulaciones que podrían ser potencialmente utilizadas como grasas biodegradables.__________________________________This work deals with the use of renewable raw materials to develop new completely biodgradable lubricating grease formulations. Different vegetable oils have been used as base oil and several polymers and/or biodegradable gelling agents have been tested as thickeners, e.g. sorbitan and glyceryl monoestearates and the two most abundant biopolymers, cellulose and chitin, or some chemical derivatives. A comprehensive rheological and mechanical characterization of the resulting formulations as well as a thermal analysis, evaluating the influence of the different biodegradable polymers used as thickeners, were carried out. Moreover, a series of tribological tests were performed to evaluate the frictional behaviour of these new greases in simulated conditions of lubrication. As a result of this investigation, a number of formulations, which could potentially be used as biodegradable greases, have been proposed.

Enfermedades tales como osteoporosis, osteonecrosis, osteogénesis imperfecta y tumores óseos se caracterizan por pérdida de masa ósea con deterioro de la microarquitectura lo que se asocia con riesgo de fractura en la población general. Las terapias convencionales para la reparación de lesiones óseas incluyen la reconstrucción quirúrgica, el trasplante, y el reemplazo por prótesis artificiales. En la actualidad el tratamiento de dichas enfermedades es un área de gran interés, a tal punto que la ingeniería de tejidos, ciencia que aplica los principios de la ingeniería y las ciencias de la vida para desarrollar sustitutos biológicos que reparen o mejoren la función biológica de un tejido u órgano, se ha convertido en una terapia alternativa para tratar la pérdida de hueso por medio de la utilización de productos biomédicos obtenidos a partir de biomateriales con aplicaciones en reparación de tejidos dañados. La búsqueda de nuevos materiales que puedan ser empleados en el campo de la ingeniería de tejidos ha permitido que en los últimos años surja un especial interés en la investigación de las sustancias poliméricas, fundamentalmente de origen natural. Los biopolímeros han presentado un papel primordial en el desarrollo de nuevos materiales por no presentar limitaciones en cuanto a biocompatibilidad, biodegradabilidad y toxicidad, además de ser naturalmente abundantes y renovables. El enfoque de la ingeniería tisular se basa en el uso de tres elementos fundamentales: las células, las biomoléculas y las matrices tridimensionales (scaffolds). En este sentido, los scaffolds poliméricos desempeñan un papel muy importante, y para ello deben cumplir una serie de requisitos con el fin de favorecer la integración y vascularización del tejido, deben ser biocompatibles, biodegradables, tener adecuadas propiedades mecánicas y una superficie química apropiada que favorezca la adhesion, proliferación y diferenciación celular., Facultad de Ciencias Exactas

Las quitinasas sintetizadas por plantas, hongos, insectos y bacterias tienen un gran potencial debido a su amplio espectro de aplicaciones. En este trabajo revisamos generalidades sobre las quitinasas y quitosanasas bacterianas y su uso en la producción de quito-oligosacáridos. Este tipo de biomoléculas han creado un mercado biotecnológico diversificado e ilimitado que incluye aplicaciones en alimentos como aditivos y bioconservadores, asimismo en múltiples aplicaciones biomédicas enfocadas a la actividad anti-tumoral, a la capacidad como agentes antioxidantes y como antidiabéticos. Además, en la agricultura se han aplicado como factores de nodulación, como agentes osmoprotectores y antioxidantes para beneficiar el crecimiento de cultivos. Es importante destacar el potencial de las quitinasas sintetizadas por Bacillus thuringiensis, el bioinsecticida mas importante mundialmente. Las quitinasas de B. thuringiensis se han empleado recientemente para generar quito-oligosacáridos que tienen actividad antimicrobiana, particularmente contra diversas bacterias patógenas de importancia en salud pública transmitidas por alimentos.

Polymeric membranes have been used as wound dressings for burns and healing wounds. Healing properties, anti-inflammatory and antibiotic in such membranes can be induced and/or made possible with the incorporation of bioactive as phytotherapic extract. In this work chitosan membranes were produced incorporating a commercial phytotherapic extract. The membranes were prepared by casting a chitosan solution and phytotherapic extract in a Petri dish and dried for 24 hs. We studied the effect of the concentration of the phytotherapic extract (PE) on membranes properties. Additionally, membranes were prepared with silver sulfadiazine (SS), an antibiotic ointment used for burns. The membranes were characterized for thickness, water vapor permeability rate, water uptake capacity, erosion degree and infrared spectroscopy. The results showed that the incorporation of low concentrations of extract promotes changes in the water uptake capacity and erosion degree, while high concentrations promote changes in the water vapor permeability., Colegio de Farmacéuticos de la Provincia de Buenos Aires

El efecto de los sustratos foliares sobre la dinámica poblacional de bacterias líticas nativas de la filósfera de banano fue evaluado a nivel in vitro, bajo cubierta (casa de malla) y en parcelas experimentales, este último, simulando las condiciones de una producción comercial de banano de exportación. In vitro se evaluaron dieciocho sustratos compuestos de harina cebada (HC) y quitina (Q), de estos se seleccionaron los cinco mejores utilizando como criterio su capacidad de fomentar en mayor proporción el crecimiento de bacterias líticas. Los sustratos seleccionados fueron aplicados en plántulas de banano bajo cubierta, se seleccionaron los dos mejores que pasaron a ser aplicados solos y en combinación con mezcla fungicida en plantas de banano establecidas en parcelas experimentales. Además de la dinámica de crecimiento de las bacterias líticas también se evaluó el efecto de los sustratos sobre el desarrollo del agente causal de la Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis). En cuanto a la dinámica poblacional de las bacterias en parcelas experimentales se obtuvo que el sustrato, compuesto de Buffer fosfato + HC + Q + Urea + Neofat + mezcla fungicida, incrementó las poblaciones de bacterias líticas en comparación con el testigo (sin control químico). En cuanto al nivel de control de enfermedad el tratamiento que redujo en forma significativa la enfermedad fue el sustrato foliar compuesto de solución mineral base + HC + Urea + Neofat + aceite, mostrando una respuesta de reducción de la enfermedad del 22,6%. La dinámica de las bacterias líticas sobre medios de cultivo con harina de cebada y quitina coloidal también se evaluó bajo el efecto de inductores de resistencia, a diferentes concentraciones de Ácido Salicílico (AS) y Acibenzolar-S Metil (ASM). Al evaluar las bacterias en medios con AS, no hubo crecimiento de éstas, mientras que en presencia de ASM, se obtuvo un crecimiento inferior al tratamiento testigo. Por su parte en la fase bajo cubierta (interacción de la hoja tratada con los inductores de resistencia), se encontró un incremento de estas bacterias en hojas tratadas con AS, mientras que el ASM redujo la población de las bacterias de interés. Con el fin de establecer qué tipo de microorganismos habitan la filósfera de las plantas de banano, se realizó una captura a partir de hojas de banano de cultivos comerciales de exportación y una identificación de los aislamientos con mayor potencial lítico, mediante análisis moleculares amplificando la región 16S rRNA. Los diferentes aislamientos se caracterizaron desde el punto de vista morfológico y de características tintoriales. Se identificaron a nivel de género 80 de los aislamientos y el 94% de estos a nivel de especie. Se cuenta con una colección de 102 bacterias con actividad lítica. Los aislamientos están crioconservados en glicerol. Se evaluó la compatibilidad y antagonismo de 40 aislamientos de la colección. La compatibilidad se evaluó con diferentes fungicidas usados en el control convencional de Sigatoka negra a nivel in vitro encontrando solo crecimiento bajo la acción de dosis experimentales de fungicidas, con valores por debajo del tratamiento testigo. El antagonismo se evaluó bajo la acción de M. fijiensis en medios de cultivo líquidos y sólidos, obteniéndose que el 32,5% de los aislamientos evaluados presentaron 100% de inhibición de la germinación del hongo./Abstract: The effect of the foliar substrates on the population dinamies of native lytic bacteria from banana phyllospere was evaluated at in vitro level, in greenhouse and experimental lots, the latter, simulating the conditions of banana commercial production for exportation. In vitro eighteen substrates were evaluated, of barley flour (HC) and chitin (Q) composed, from this there were selected the best five by using to as criterion their capacity to foment greater proportion on the growth of lytic bacteria. The selected substrates were applied in banana seedling under greenhouse: the best two were selected and passed to be applied by themselves and combined with a fungicide mixture in banana plants which were established in experimental lots. In addition to the dynamic growth of lytic bacteria, the effect of the substrates on the development of the casual agent of the black Sigatoka (Mycosphaerella fijiensis) was also evaluated. As for the dynamical population of the bacteria in experimental lots there was found that the foliar substratum, composed of phosphate buffer + HC + Q + Urea + Neofat fungicide mixture, it increased the population of lytic bacteria compared to the witnessed (without chemical control). As the level of disease control, the treatment that significantly reduced the disease was the foliar substratum (Mineral solution base + HC + Urea + Neofat) mixed with oil, responded showing a reduction of 22,6% of the disease. The dynamic of the lytic bacteria on growing medium with barley flour and colloidal chitin were also evaluated under the effect of resistance inductors at different concentrations of salicylic acid (SA) and Acibenzolar-S Methyl (ASM). When evaluating the bacteria in media with AS, there was no growth of it, while in the presence of ASM, there was obtained a lower growth to the treatment witnessed. On the other hand, during the stage of under greenhouse (interaction of the leaf treated with the resistance inductors), there was found a increasement of these bacteria on leaves treated with AS, whereas ASM reduced on a way the population of the bacteria of interest. In order to establish what kind of microorganisms inhabit the phyllosphere of the banana plants, it was taken a sample from banana leaves of the commercial crops for exportation and an identification of isolates with greater lytic potential, through molecular analysis amplifying the region 16S rRNA. The different isolates were characterized from the morphological point of view and staining characteristics. At genus level, 80% of the isolates were identified well as 94% at specie level at specie level, with a collection of 102 bacteria with lytic activity. The isolates are cryopreserved in glycerol. It was evaluated the compatibility and antagonism of isolates of the collection. The compatibility was evaluated with different fungicides used in conventional control of black Sigatoka at in vitro level finding only growth under the action of experimental fungicide doses, with values below the witness treatment. Antagonism was evaluated under the action of M. fijiensis in media of liquid and solid growing, it was observed that 32,5% from the evaluated isolates showed 100% of inhibition of the fungus germination. Maestría

The aim of this study was to develop sustained release formulation for improving bioavailability of metronidazole designing metronidazole loaded chitosan microcapsules (MLCM) using coacervation technique. Two solutions with different pH nature i.e. chitosan solution in 5 % glacial acetic acid containing metronidazole and 2 M NaOH solution were employed for the induction of coacervation. Glutaraldehyde was used as cross-linking agent. Different MLCM formulations were fabricated by varying chitosan and glutaraldehyde concentrations. Dissolution data was evaluated using new software, DDSolver. Microcapsules were discrete, brown, spherical and porous. Microcapsule size range was 343.6 ± 8.9 μm – 401.9 ± 9.6 μm and the entrapment efficiency ranged from 45.2 ± 6.4 – 64.3 ± 5.7 for all formulations. The F6 formulation with drug/polymer ratio 1:2 (w/w) was optimum regarding entrapment efficiency (64.3 ± 5.7 %), flow characteristics (Hausner’s ratio = 1.3-1.5) and drug release properties, in all cases. The kinetic analysis of dissolution data confirmed diffusion controlled release of metronidazole from its microcapsules. From the results, it can be concluded that metronidazole can be successfully microencapsulated into the chitosan shells by coacervation and is influenced significantly by the quantity of chitosan and glutaraldehyde employed., Colegio de Farmacéuticos de la Provincia de Buenos Aires

Orientadora : Profª Drª Carmen Lúcia de Oliveira Petkowicz Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Defesa: Curitiba, 17/02/2011 Inclui referências Resumo: A Metagenômica permite a aplicação de técnicas de biologia molecular em organismos não cultiváveis e têm tido um grande impacto na descoberta de novas enzimas. Para identificação de novos genes de enzimas hidrolíticas foram analisadas duas bibliotecas metagenômicas: uma do solo da Mata Atlântica paranaense (MAF) e outra do solo contaminado por gordura de uma planta de tratamento de resíduos industriais (SLP). Essas bibliotecas foram estocadas na forma de conjuntos de clones contendo 100.000 e 500.000 clones, respectivamente, com um tamanho médio de inserto de 30 kb clonados no vetor osmidial pCC2FOS. A triagem funcional foi realizada em meio sólido LA contendo um substrato específico para proteases (1% leite em pó desnatado), amilases (1% amido), celulases (0.2% carboximetilcelulose) ou quitinases (2% quitina coloidal). Como resultado foram encontrados 23 clones positivos para protease e 17 para quitinase pertencentes às duas bibliotecas. Análise de restrição com as endonucleases BamHI e EcoRI revelou três padrões diferentes para os clones de protease e quatro padrões para os de quitinase. Todos os clones positivos foram retransformados e somente o clone CHI1 manteve atividade quitinolítica. Uma sub-biblioteca de CHI1 foi construída em pUC18 e os plasmídeos dos subclones com atividade foram purificados e submetidos a mutagênese por inserção de transposon. As extremidades dos insertos de DNA de todos os subclones e mutantes com inserção de transposon foram sequenciados para obtenção de sequências consenso estendidas. A comparação dessas sequências com o GenBank através da ferramenta BlastX revelou três genes de quitinase com identidades entre 78 e 93% com Chi1 de Aeromonas punctata (Chit1), um endoquitinase básica de A. hydrophila (Chit2) e uma quitodextrinase de A. hydrophila subsp. hydrophila (Chit3). No PDB poucas estruturas similares estão disponíveis e o programa Modeller foi utilizado para construir um modelo de estrutura por homologia somente para o gene da Chit1, que apresentou 75% de identidade com a sequência de aminoácidos da estrutura de ChiA de Serratia marcescens. Os outros genes apresentaram cerca de 30% de identidade com Chi2 de Carica papaya e ChiB de S. marcescens, respectivamente. Chit1 e 3 pertencem a família 18 das glicosil hidrolases e a análise de suas sequências identificou-as como exoquitinases secretadas. Chi2 pertence a família 19 das glicosil hidrolases, geralmente encontradas em plantas, e também possui um domínio de lisozima que pode fornecer uma atividade antibacteriana. Quitinases podem ter atividade antifúngica e antibacteriana, além de erem utilizadas na produção de quito-oligômeros e N-acetilglucosamina. Essas moléculas são aplicadas como promotores de crescimento em plantas, imunoestimuladores, agentes antitumorais e antibacterianos. Os três genes de quitinases são novos e possuem potencial de aplicação como agentes de biocontrole e na produção de derivados de quitina. Abstract: Metagenomics allows the application of molecular genomics to consortia of noncultivable microbes and has had substantial impact on the discovery of novel industrial enzymes. In order to identify new genes of hidrolytic enzymes we screened two fosmid metagenomic libraries; one from Atlantic Forest soil (MAF) and another from an animal fat-contaminated soil from an industrial wastewater treatment plant (SLP). These libraries were stored as pools and have 100,000 and 500,000 clones, respectively, with an average insert size of 30 kb cloned into the pCC2FOS fosmid vector. Functional screening was carried out on LB agar plates containing specific substrates for proteases (1% skimmed milk), amylases (1% starch), cellulases (0.2% carboximethylcellulose) and chitinases (colloidal chitin). As a result, 23 protease positive and 17 chitinase positive clones were found in the SLP and MAF libraries. Restriction analysis with BamHI and EcoRI endonucleases revealed three different restriction patterns among the protease activity bearing fosmids nd four patterns mong those conferring chitinase activity. All positive clones were retransformed and only clone CHI1 retained chitinase activity. A plasmid sub-library of CHI1 was constructed in pUC18 and subclone plasmids with activity were purified and submitted to transposon insertion mutagenesis. All subclones and transposon insertions mutants were sequenced. Contigs obtained were analysed with BlastX and three chitinases genes were found revealing identities between 78 and 93% with chiti ase 1 from Aeromonas punctata (Chit1), basic endonuclease from A. hydrophila (Chit2) and chitodextrinase from A. hydrophila subsp. hydrophila (Chit3). On PDB few similar structures were available and the Modeller software was used to construct an homology structure model for Chit1 gene that presents 75% identity with ChiA from Serratia marcescens. Other genes had 30% similarity to structures of Chi2 from Carica papaya and ChiB from S. marcescens, respectively. Chit1 and 3 belong to glycosil hydrolases family 18, and sequence analysis identified them as secreted exochitinases. Chi2 belongs to glycosil hydrolases family 19, generally found in plants, and also have a lysozyme domain that can provide an antibacterial activity. Chitinases may have antifungal and antibacterial activity and are used on chitooligomers and GlcNAc production. These compounds are applied as growth promoters in plants, imunoenhancers, antitumoral and antibacterial agents. The hree chitinases are new genes with potential application as biocontrol agents and on chitin derivatives production.

Antimicrobial films for food packaging applications have received increasing attention from the industry in recent years. Due to their exceptional properties, such as non-toxicity, biodegradability, antimicrobial characteristics, and biocompatibility, chitosan has proven useful for the development of active materials. This review aims to provide anoverview of the main techniques used for the characterization of chitin and chitosan, including Fourier transforminfrared spectroscopy (FTIR), 1H and 13C nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, UV spectrophotometry, viscosimetry, elemental analysis, X-ray diffraction (XRD), thermogravimetric analysis (TGA), titrations, scanning electron microscopy (SEM) and size exclusion chromatography (SEC) among others. In addition, the main applications of the polymer in food packaging are also reported En los últimos años los films antimicrobianos han recibido una gran atención por parte de la industria para su aplicación en el envasado alimentario. Debido a sus excepcionales propiedades, no-tóxico, biodegradable, características antimicrobianas y biocompatible, el quitosano ha demostrado ser útil para el desarrollo de materiales activos. Este artículo de revisión tiene por objeto proporcionar una visión general de las principales técnicas usadas para la caracterización de quitina y quitosano incluidas la espectroscopia infrarroja (FTIR), la espectroscopia RMN de 1H y 13C, la espectrofotometría UV, viscosimetría, análisis elemental, difracción de rayos-X (XRD), análisis termogravimétrico (TGA), titulaciones, microscopía electrónica de barrido (SEM) y cromatografía de exclusión por tamaños (SEC)entre otras. Además, se describen las principales aplicaciones del polímero en el envasado de los alimentos This work was funded under the Project no. 95935 from FONCICYT C002-2008-1/ALA 127 249 SI

En este trabajo se hace uso de una serie de materias primas renovables para llevar a cabo la optimización de la formulación y el proceso de producción de nuevas grasas lubricantes totalmente biodegradables, utilizando aceites vegetales como fluido base y diversos polímeros y/o agentes gelificantes biodegradables como espesantes, por ejemplo, monoestearatos de sorbitano y glicerilo y los dos polímeros más abundantes en la naturaleza, celulosa y quitina, o algunos derivados químicos de éstos. Para ello, se ha efectuado una caracterización fundamentalmente reológica y mecánica de las formulaciones resultantes así como un análisis térmico, evaluando la influencia de los polímeros biodegradables utilizados como espesantes. También se han realizado una serie de ensayos tribológicos para determinar el comportamiento de estas nuevas grasas en condiciones simuladas de lubricación. Finalmente, como resultado de esta investigación, se proponen una serie de formulaciones que podrían ser potencialmente utilizadas como grasas biodegradables.__________________________________This work deals with the use of renewable raw materials to develop new completely biodgradable lubricating grease formulations. Different vegetable oils have been used as base oil and several polymers and/or biodegradable gelling agents have been tested as thickeners, e.g. sorbitan and glyceryl monoestearates and the two most abundant biopolymers, cellulose and chitin, or some chemical derivatives. A comprehensive rheological and mechanical characterization of the resulting formulations as well as a thermal analysis, evaluating the influence of the different biodegradable polymers used as thickeners, were carried out. Moreover, a series of tribological tests were performed to evaluate the frictional behaviour of these new greases in simulated conditions of lubrication. As a result of this investigation, a number of formulations, which could potentially be used as biodegradable greases, have been proposed.

The present work was developed as objective to evaluate macrocospically and morphologically the effect of the chitosan in orabase, associated or not to the 660 nm laser in the tissue repair. In this experimental study were used 75 rats, male, of the Wistar strain, randomly divided into 5 groups: G1 (control), G2 (orabase), G3 (orabase of chitosan 2%), G4 (laser) and G5 (laser + orabase of chitosan 2%). They had been confectioned wounded in the back of the animals measuring around 5 mm and had been obeyed to the periods of observation and sacrifice with 3, 7 and 14. The results were subjected to statistical analysis. From the results can be concluded that in the initial period of healing, the use of chitosan in orabase associated laser promoted, macroscopically, greater contraction of the wound and better standards of healing. The group treated with chitosan showed similar results, as the group treated with Laser, about the control of inflammation, formation of crust and angiogenesis, in addition to promoting greater early in reepithelialization. Treatment with chitosan in orabase showed levels of collagen similar to the laser. O presente trabalho foi desenvolvido como objetivo de avaliar macroscópicamente e morfológicamente os efeitos da quitosana em orabase associada ou não ao laser de 660 nm, na reparação tecidual. Neste estudo experimental foram utilizados 75 ratos, machos, da linhagem Wistar, divididos aleatoriamente em 5 grupos: G1 (controle), G2 (orabase), G3 (orabase de quitosana 2%), G4 (laser) e G5 (laser + quitosana em orabase à 2%). Foram confeccionados feridas no dorso dos animais medindo em torno de 5 mm. Foram obedecidos os periodos de observação e sacrifício com 3, 7 e 14 dias e os resultaodos foram submetidos a análise estatística. A partir dos resultados pode se concluir que: no período inicial da cicatrização, o uso da quitosana em orabase associado Laserterapia promoveu, macroscopicamente, maior contração da ferida e melhores padrões de cicatrização; O grupo tratado com quitosana apresentou resultados semelhantes, ao grupo tratado com Laserterapia, sobre o controle da inflamação, formação de crosta e angiogênese, além de promover maior precocidade na reepitelização. O tratamento com quitosana em orabase apresentou graus de colagenização semelhantes à Laserterapia.

Submitted by Biblioteca Central (biblioteca@unicap.br) on 2017-10-18T18:19:59Z No. of bitstreams: 1 dissertacao_renata_goncalves_santos_inacio.pdf: 1768781 bytes, checksum: 5fdfcec3f8878393182377f7f1dc5564 (MD5) Made available in DSpace on 2017-10-18T18:19:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_renata_goncalves_santos_inacio.pdf: 1768781 bytes, checksum: 5fdfcec3f8878393182377f7f1dc5564 (MD5) Previous issue date: 2010-06-14 The present work had as objective investigate the effect of dibenzotiofene - DBT (derived from oil) in the growth and morphology of Rhizopus arrhizus UCP 402. Had the increase of the use of the fossil fuels used for some industrialized countries, a serious environment problem aggravates due to quality of the reserves of the oil, in view of the amount of sulphur, and consequently, greater toxicity for the environment. In turn, the dibenzothiofene (DBT) is a composition heterociclic organossulfurated in the oil diesel, being considered a great fuel that cause ambient problems. The use of the DBT for R. arrhizus UCP 402 was evaluated from different concentrations of this composition, having observed itself the effect in kinetic of growth and the morphology, in the production of quitina and quitosana, as well as in the formation of toxic methabolits. The gotten results had indicated that R. arrhizus presents ability to grow in the different concentrations of the composition, however only, in co-metabolism, that is, in the glucose presence. A variation in the total protein text, quitina and quitosana for the action of the DBT was observed. The óptic microscopy evidenced variations in the morphology of R. arrhizus, also causing alterations in the ramification of hifas on standard. The products of the metabolism of the DBT had indicated that degradation of the composition for R. arrhizus occurred, whose methabolits had presented one accented inhibition of the germination of Cabbage of the 4 stations (oleracea Brassica to var. capitata). The carried through studies had demonstrated a great biotechnological potential of R. arrhizus in the process of degradation of DBT, being able to be used in the future in biorremediation processes. O presente trabalho teve como objetivo investigar o efeito do dibenzotiofeno – DBT (derivado do petróleo) no crescimento e na morfologia de Rhizopus arrhizus UCP 402. Com o aumento da utilização de combustíveis fósseis por vários países industrializados, um sério problema ambiental se agrava devido à qualidade das reservas do petróleo, tendo em vista a quantidade de enxofre, e conseqüentemente, maior toxicidade para o meio ambiente. Por sua vez, o dibenzotiofeno (DBT) é um composto organossulfurado heterocíclico presente no óleo diesel, sendo considerado um combustível que causa grandes problemas ambientais. A utilização do DBT por R. arrhizus UCP 402 foi avaliada a partir de diferentes concentrações desse composto, observando-se os efeitos na cinética de crescimento e morfologia do fungo, na produção de quitina e quitosana, como também na formação de metabólitos tóxicos. Os resultados obtidos indicam que R. arrhizus apresenta habilidade para crescer nas diferentes concentrações do composto, porém apenas, em co-metabolismo, isto é, na presença de glicose. Observou-se uma variação no teor de proteínas totais, em quitina e quitina pela ação do DBT. A microscopia ótica evidenciou variações na morfologia de R. arrhizus, causando também alterações no padrão de ramificação das hifas. Os produtos do metabolismo do DBT indicam que ocorreu degradação do composto por R. arrhizus, cujos metabólitos apresentaram uma acentuada inibição da germinação de Repolho das 4 estações (Brassica oleracea var. capitata). Os estudos realizados demonstram um grande potencial biotecnológico de R. arrhizus no processo de degradação de DBT, podendo ser empregado no futuro em processos de biorremediação.

El presente trabajo desarrolla una propuesta para la elaboración de películas poliméricas biodegradables en base a quitosano plastificado, el cual fue sintetizado a partir de quitina extraída a través de diversos métodos químicos, con rendimientos entre 79 % y 94 %, de conchas de camarón de la especie L. vannamei proveniente de la Península de Paraguaná-Venezuela. Posteriormente, mediante desacetilación termoalcalina de la quitina y a 120 °C, se obtuvo el quitosano, con grados de desacetilación entre 94 % y 97 % y pesos moleculares viscosimétricos (Mv) en un rango de 3 x 10(5) y 4 x 10(5) g/mol. Con el quitosano sintetizado se prepararon soluciones bases de quitosano en acido acético diluido para preparar películas de quitosano puro y plastificadas con 0,2 % de glicerina, mediante evaporación del solvente, a una temperatura alrededor de 50 ºC. Luego, se determinaron las propiedades mecánicas de las películas, encontrándose un buen efecto plastificante por parte de la glicerina. El estudio de degradación de ambos tipos de películas (plastificadas y no plastificadas), se llevó a cabo en sistemas de compostaje en distintas zonas del país (zona árida Punto Fijo-Falcón y zona húmeda Los Teques- Miranda) y luego fue caracterizado a través de la pérdida porcentual de peso y por la morfología superficial de las películas usando microscopia electrónica de barrido (MEB). Las películas degradadas en Falcón presentaron una disminución en la velocidad de degradación con respecto a las degradas en Los Teques de acuerdo al sistema evaluado This research attempts to develop a proposal for the development of biodegradable polymer film based on Chitosan, synthesized from chitin extracted from shells of shrimp species L. vannamei that can be found on the Peninsula of Paraguaná- Venezuela. Chitin was isolated from the shrimp shells selected through various chemical methods giving yields between 79 % and 94 %. Then, through thermal alkaline desacetilation, at 120 °C, chitosan was obtained, reaching levels of between 94 % and 97 %, and viscosimetric molecular weights between 3 x 10(5) y 4 x 10(5) g/mol. With the obtained chitosan, solutions were prepared using the solvent casting technique (at a temperature around 50 ºC) to prepare pure chitosan film and plastifiant chitosan adding 0.2 % of glycerin using dilute acetic acid as solvent. The mechanical properties of samples were determined, finding a good plasticizer effect through the presence of the glycerin. The study of degradation of the plastic film and the pure chitosan film was carried out in compost systems in different parts of the country (arid zone in Punto Fijo city and a wet zone in the city of Los Teques ). The degradation was measured by weight loss (%) and the superficial morphology of the films using scanning electron microscopy (SEM). The degraded films in the arid zone showed a decrease in the degradation rate compared to the degraded films in wetlands, as expected, due to the conditions given to the process of enzymatic hydrolysis that can occur in wetlands

El nematodo agallador Meloidogyne incognita Kofoid y White, 1919, Chitwood, 1949, distribuido en 23 de los 32 estados del país y Nacobbus aberrans Thorne 1935, Thorne and Allen, 1944, distribuido en 10 de 32 estados de la República Mexicana, su combate para ambas especies, casi siempre se hace aplicando diferentes agroquímicos, los cuales algunos ya tienen problemas de registro. Se necesita evaluar nuevos productos que sean otra alternativa a su manejo y mas amigables al ambiente. En el presente trabajo se evaluó el efecto de quitina-quitosano con diferentes grados de desacetilación, biopolímeros naturales que poseen propiedades nematicidas y utilizados como reguladores de la población de estos fitonematodos; los estudios se hicieron in vitro, sobre la eclosión de masas de huevos, huevos aislados de la matriz gelatinosa, juveniles de segundo estadio (J2) y el efecto in vivo, sobre la invasión de raíz en plántulas de chile CM-334. Se colectaron 240 muestras de suelo rizosférico del cultivo de chile en dos zonas de estudio, para M. incognita, en el ejido Jiquilpan municipio de Ahome Sinaloa, y para N. aberrans, 150 muestras en Montecillo municipio de Texcoco estado de México. De cada muestra se obtuvo masas de huevecillos para analizar la actividad nematicida de los biopolímeros, se compararon las concentraciones de 250, 500, 1000, 1500 y 2000 ppm, en tres grados de desacetilación quitosano (Q1) kDA=100, quitina (Q2) kDA= 55 y quitina (Q)3 kDA=27. El mejor resultado in vitro posterior a 264hrs en masas de huevos tratadas de M. incognita, fue (Q1) 2000 ppm al obtener una media mínima de eclosión de 13.3, para huevos aislados fue (Q1) 2000 ppm y (Q1) 1000 ppm, que resultaron en una media de eclosión de 0.9 y 1.5 respectivamente, en juveniles J2 después de 72hrs de su probable recuperación en agua destilada (Q1) 2000 ppm, obtuvo una media de inmovilidad de 186.6, comparados con los testigos (T) y (Q0) que obtuvieron una media mínima de inmovilidad de 20.2 y 46.5 respectivamente. Con respecto al bioensayo in vivo, el menor índice de invasión se observo en el tratamiento 0 días (0d) obteniendo el 9.8% de invasión comparados con los testigos (T) y (Q0) los cuales obtuvieron el 100% y 69.9% de invasión respectivamente en plántulas tratadas. El mejor resultado in vitro en masas de huevos para N. aberrans posterior a 264hrs de tratamiento fue (Q1) 2000 y 1500 ppm obteniendo una media mínima en eclosión de 16.5 y 17.8 respectivamente, en huevos aislados fue (Q1) 1500, (Q1) 250 ppm, con una media mínima de eclosión de 0.8 y 1.1 respectivamente, con respecto al bioensayo de juveniles J2 después de 72hrs de su probable recuperación, los mejores tratamientos fueron (Q1) 2000 y (Q2) 1500 ppm, con una media mínima de inmovilización de 145.9 y 140.5 respectivamente, comparados con los testigos (Q0) y (T) que obtuvieron una media de 27.1 y 51.9 respectivamente. En relación al bioensayo in vivo, el menor índice de invasión se observo a los 0 días (0d) de tratamiento resultando un 6% de invasión con respecto a los testigos (Q0) y (T), que obtuvieron una invasión de 49% y 100% respectivamente en los puntos de crecimiento de la raíz._______________________ ABSTRACT: The root-knot nematode Meloidogyne incognita Kofoid and White, 1919, Chitwood, 1949, distributed in 23 of the 32 states and Nacobbus aberrans Thorne 1935, Thorne and Allen, 1944, distributed in 10 of 32 states of Mexico, their control of both species is almost always done by different chemicals, some of which already have registration problems. We need to evaluate new products that are alternatives to their management and more friendly to the environment. In the present study we evaluated the effect of chitin-chitosan with different degrees of deacetylation, these natural biopolymers have nematicidal properties and are used as regulators of the population of these fitonematodes. Studies were made in vitro, on the hatching of egg masses eggs isolated from the gelatinous matrix, second-stage juveniles (J2) and the in vivo effect on the invasion of root in seedlings of chili CM-334. We collected 240 samples of rizospheric soil from chili peppers in two areas of study for M. incognita, on the Ejido Sinaloa Ahome Jiquilpan Township, and N. aberrans, 150 samples in the municipality of Texcoco, Montecillo Mexico State. From each sample were obtained egg masses to analyze the nematicidal activity of biopolymers, we compared the concentrations of 250, 500, 1000, 1500 and 2000 ppm in three degrees of deacetylation, chitosan (Q1) kDA = 100, chitin (Q2) kDA = 55 and chitin (Q) 3 kDA = 27. The best result after 264hrs in treated egg masses of M. incognita was (Q1) 2000 ppm with a minimum hatching average of 13.3. For isolated eggs (Q1) 2000 ppm and (Q1) 1000 ppm, resulting in an average of 0.9 and 1.5 eclosion respectively, J2 juveniles after 72 hr did not recover after treated (Q1) 2000 ppm, with an average of 186.6 immobility compared to controls (T) and (Q0) with an average immobility of 20.2 and 40.5 respectively. Regarding the in seedlings bioassay, the lowest rate of invasion was observed in treatment 0 days (0d) obtaining 9.8% of invasion compared with controls (T) and (Q0) which were 100% and 69.9% of invasion treated seedlings, respectively. The best result in vitro on egg masses for N. aberrans 264hrs after treatment was (Q1) 2000 and 1500 ppm in obtaining a minimum average emergence of 16.5 and 17.8 respectively. For isolated eggs (Q1) 1500, (Q1) 250 ppm, with a hatching average of 0.8 and 1.1 respectively, with respect to J2 juvenile bioassay after 72hrs which we let to recover, the best treatments were (Q1) 2000 and (Q2) 1500 ppm, with a minimum immobilizing average of 145.9 and 140.5, compared with controls (QO) and (T) which had an average of 27-1 and 51.9 respectively. Regarding the in vivo bioassay, the lowest rate of invasion was observed at 0 days (0d) of treatment resulting from invasion by 6% compared to controls (Q0) and (T), which were invaded 49% and 100% respectively at points of root growth. The chitin and chitosan have a nematicida effect that affects the J2, killing them and reducing the risks of roots invasion.

Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco Nos últimos anos, a indústria pesqueira brasileira tem vivenciado um período importante de desenvolvimento. Mas, juntamente com o crescimento na produção, temse o aumento da quantidade de resíduos gerados no processamento do pescado, que usualmente são descartados no ambiente, causando poluição. Os resíduos do processamento são constituídos por cabeças, carcaças e vísceras de peixes, cabeças e cascas de crustáceos e fauna acompanhante, e podem representar de 20 a 70% do pescado comercializado. O aproveitamento dos resíduos incrementa a economia do setor industrial pesqueiro e permite que essa atividade seja mais ecologicamente sustentável e economicamente viável. O mal uso de subprodutos do processamento de pescados é considerado por muitos um desperdício de moléculas biativas valiosas. As cabeças de camarão representam um dos principais resíduos do processamento de pescados e constituindo em até 50% do peso total do animal. Esse material é utilizado atualmente como fonte de proteína e na produção de quitina das cascas, matéria prima para produção comercial de quitosana. Diversos métodos são empregados para a recuperação de hidrolisados protéicos e quitina, dentre eles a hidrólise utilizando proteases exógenas. Entretanto, o emprego destas enzimas encarece o processo tornando-o pouco adequado para o uso industrial. Nas cabeças de camarões estão contidas as vísceras (parte do trato digestivo) que possuem enzimas hidrolíticas que podem ser aplicadas na solubilização dos tecidos e deproteinização das cascas, facilitando as etapas de extração e purificação dos produtos. No presente trabalho é descrito um novo método para obtenção de vários compostos a partir de cabeças de camarão (Litopenaeus vannamei) submetidas à autólise. No processo, foi obtido hidrolisado protéico, carotenóides, quitina e quitosana e glicosaminoglicanos sulfatados. A partir de 1kg de cabeças obteve-se 1,46L de hidrolisado protéico (solução a 9%) e 194mg de carotenóides totais, sendo 111,96mg de carotenóides não identificados e 82,56mg de astaxantina. A partir de 53g de carapaça foram obtidas cerca de 25g de quitina e 17g de quitosana. Quitina e quitosana foram analisadas por espectroscopia de 13C-RMN e FT-IR para comprovar a efetiva desacetilação dos resíduos de Nacetilglucosamina. O grau de desacetilação foi calculado por titulação potenciométrica, análise elementar e FT-IR para quitosana produzidas a partir uma e duas desacetilações bem como a quitosana purificada. Os valores obtidos encontram-se ente 60-80%. O conteúdo de glicosaminoglicanos obtidos do sedimento após extração de carotenóides e lipídios foi de 23,32 μg kg-1 de subproduto e mostraram migração eletroforética semelhante aos padrões de mamífero. As frações precipitadas foram suscetíveis à ação das heparitinases I e II, o que sugere a presença de um heparam sulfato. As biomoléculas recuperadas a partir de cabeças de camarão possibilitam um amplo espectro de aplicações como na suplementação e formulação de rações animais, em abordagens biomédicas e biotecnológicas

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental, Florianópolis, 2010 Entre os diversos problemas de saúde pública ligados ao abastecimento de água, a contaminação de mananciais de água doce por cianotoxinas tem sido muito enfatizada devido ao risco toxicológico que representa. Assim, este assunto tornou-se preocupante e é cada vez mais estudado pela comunidade científica, pois compromete a qualidade das águas destinada ao consumo humano, atingindo conjuntos de organismos muito além da comunidade aquática. A saxitoxina (STX) é uma neurotoxina produzida pela cianobactéria Cylindrospermopsis raciborskii, que compõe a biota da Lagoa do Peri, um dos principais mananciais de abastecimento de água para o Município de Florianópolis-SC. Este estudo investigou o mecanismo de ação da STX por meio de métodos toxicológicos in vitro, além de verificar a capacidade de adsorção de conchas de ostra e quitina à STX. Os testes citotóxicos e genotóxicos in vitro, realizados para avaliar a ação da STX sobre células Neuro 2A (N2A) e Vero, foram os testes do MTT, a fragmentação e a metilação do DNA, a lipoperoxidação e a frequência de células micronucleadas. Os ensaios de adsorção deram-se com o emprego de conchas de ostras trituradas e quitina, como matrizes adsorventes para a verificação da capacidade de adsorção da STX em soluções aquosas. Para a quantificação da STX, foi empregada a cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). Os resultados obtidos nas avaliações toxicológicas demonstraram que a STX possui um potencial efeito citotóxico e genotóxico, pois induziu as células N2A à apoptose, à fragmentação e à hipermetilação do DNA, além de causar a oxidação lipídica da membrana celular. Nessas avaliações toxicológicas ainda foi possível verificar o potencial da STX à indução de formação de micronúcleos em células N2A e Vero, com evidências dos efeitos de origem aneugênica. Nos ensaios de adsorção, foi possível verificar que a concha de ostra e a quitina foram eficientes para remoção da STX (>60% em 48h) em amostras da água, na escala de concentrações empregadas neste estudo. Amongst the diverse problems of public health on the water supply, the contamination of fresh water sources from cyanotoxins had been emphatized due toxicological risk. Thus, this subject that concern more and more studied by the scientific community, therefore compromises the waters quality destined to the human consumption, reaching organisms beyond the aquatic community. The saxitoxin (STX) is a neurotoxin produced in blooms of Cylindrospermopsis raciborski, cyanobacteria that composes the biota of Peri Lagoon - Florianópolis/SC. This study evaluated the mechanism of action of STX through toxicology methods in vitro, besides verifying the absorption capacity of oyster shell and chitin to STX. To evaluate the action of STX in Neuro 2A (N2A) and Vero cells, the cytotoxic and genotoxic in vitro essays employed were: MTT assay, DNA methylation and fragmentation, lipid peroxidation and frequency of micronucleated cells. From the adsorption essays were employed oyster shells powdered and chitin as adsorbents matrices and verifying the capacity of absorption of STX soluble to these adsorbents. The quantification of STX was for high performance liquid chromatography (HPLC). The results of toxicological evaluation showed that STX had a potential cytotoxic and genotoxic effects. The STX'exposure induced to N2A cells to cellular apoptosis, DNA fragmentation and methylation and lipid oxidation of cellular membrane. The toxicological evaluation demonstrated that STX induced to the N2A and Vero cells exposed to micronuclei formation, with evidenced to aneugenic effects. The adsorption assays verified that oyster shell and chitin were efficient to remove the STX (>60% in 48h) from water samples, in the concentrations scale employed in this study.