26 results on '"Beltrame, Flávio Luis"'
Search Results
2. Plectranthus barbatus Andrews as anti-Helicobacter pylori agent with activity against adenocarcinoma gastric cells
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Borges, Augusto Santos, Minozzo, Bruno Rodrigo, Santos, Heloa, Ardisson, Juliana Santa, Rodrigues, Ricardo Pereira, Romão, Wanderson, Borges, Warley de Souza, Gonçalves, Rita de Cássia Ribeiro, Beltrame, Flávio Luis, and Kitagawa, Rodrigo Rezende
- Published
- 2020
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3. Brewers' spent grain extract as antioxidants in starch‐based active biopolymers
- Author
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Ludka, Flavia Rafaela, primary, Klosowski, Ana Beatriz, additional, Camargo, Giovani Almeida, additional, Justo, Aline Silva, additional, Andrade, Evelyn Assis, additional, Beltrame, Flávio Luis, additional, and Olivato, Juliana Bonametti, additional
- Published
- 2023
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4. Skin of color repigmentation after phenol-croton oil chemical peel
- Author
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Paiva, Marcelo L., Justo, Aline S., Lemes, Bruna M., Capote, Anna Claudia M.O., de Castro Maymone, Mayra Buainain, Lipinski, Leandro C., Rullan, Peter P., Beltrame, Flávio Luís, Miot, Helio A., and Wambier, Carlos G.
- Published
- 2023
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5. Brewers' spent grain extract as antioxidants in starch‐based active biopolymers.
- Author
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Ludka, Flavia Rafaela, Klosowski, Ana Beatriz, Camargo, Giovani Almeida, Justo, Aline Silva, Andrade, Evelyn Assis, Beltrame, Flávio Luis, and Olivato, Juliana Bonametti
- Subjects
BREWER'S spent grain ,STARCH ,IMPACT (Mechanics) ,BIOPOLYMERS - Abstract
Summary: Brewer's spent grain (BSG) is a by‐product of the brewery and represents a sustainable alternative for application in starch‐based active materials. This study aimed to develop starch/poly(vinyl alcohol) films containing BSG extract, with focus on the influence of BSG on the mechanical, structural, and barrier properties of the films. The antioxidant potentials of the extract and the films were proved by ABTS●+ (IC50 = 2.0 ± 0.6 μg mL−1) and DPPH● (IC50 = 196.05 ± 018.66 μg mL−1) assays. The addition of BSG extract did not have a significant impact on the mechanical performance and weight loss in water of the materials. The incorporation of the extract resulted in a rough surface, without pores and/or cracks. Controlled release of phenolic compounds was observed for BSG3 (3 g.100 g−1 of BSG extract) (163.3 ± 20.9 mgGAE.mL−1) and BSG5 (5 g.100 g−1 of BSG extract) (165.7 ± 23.6 mgGAE.mL−1) over a 4 h period. Therefore, this study shows the potential of BSG as an organic source of antioxidants for active biopolymers. [ABSTRACT FROM AUTHOR]
- Published
- 2024
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6. Translational research on the role of formula stability in Hetter's phenol–croton oil peels: Analysis of chemical studies and clinical outcomes from a randomized, double-blinded, split-face controlled trial
- Author
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Neitzke, Ideli Cristhina, de Grande Curi, Daniella, Lin, Erica Miyake, Lee, Kachiu Cecilia, Soon, Seaver L., Lunardelli Bittencourt, Ana Cecília, Aguiar, Caroline Motta, Neto, Domingos Jordão, da Costa Filha, Amanda Roderjan Cray, Beltrame, Flávio Luís, Döll-Boscardin, Patrícia Mathias, and Wambier, Carlos Gustavo
- Published
- 2021
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7. Depth of injury of Hetter's phenol-croton oil chemical peel formula using 2 different emulsifying agents
- Author
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Justo, Aline da Silva, Lemes, Bruna Mikulis, Nunes, Bruna, Antunes, Kevin Alves, Carletto, Bruna, Koga, Adriana Yuriko, Lipinski, Leandro Cavalcante, Montemor Netto, Mario Rodrigues, Campagnoli, Eduardo Bauml, Beltrame, Flávio Luís, and Wambier, Carlos Gustavo
- Published
- 2020
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8. Effect of injection solutions in the dispersion of syringe lubricant (silicone oil)
- Author
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Lemes, Bruna Mikulis, Andrade, Evelyn Assis de, Cruz, Luiza Stolz, Minozzo, Bruno Rodrigo, Carey, Wayne D., Damsky, William, Miot, Helio Amante, Beltrame, Flávio Luís, and Wambier, Carlos Gustavo
- Published
- 2020
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9. Quantitative determination of 20-hydroxyecdysone in methanolic extract of twigs from Vitex polygama Cham.
- Author
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Gallo, Margareth Borges Coutinho, Beltrame, Flávio Luis, Vieira, Paulo Cezar, Cass, Quezia Bezerra, Fernandes, João Batista, and da Silva, Maria Fátima das Graças Fernandes
- Published
- 2006
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10. A validated higher-performance liquid chromatography method for quantification of cinchonain Ib in bark and phytopharmaceuticals of Trichilia catigua used as Catuaba
- Author
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Beltrame, Flávio Luís, Filho, Edson Rodrigues, Barros, Fabio A. Proença, Cortez, Diógenes AparícioGarcia, and Cass, Quezia Bezerra
- Published
- 2006
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11. Flush technique to minimize adverse reactions from syringe lubricant (silicone oil)
- Author
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Wambier, Carlos Gustavo, Assis de Andrade, Evelyn, Cruz, Luiza Stolz, Lemes, Bruna Mikulis, Carey, Wayne D., de Paula Silveira Moura, Bárbara, Both, Alessandro Soares, Perillo de Farias Wambier, Sarah, and Beltrame, Flávio Luís
- Published
- 2019
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12. The effects of 35% trichloroacetic acid-Croton oil and 35% glycolic acid-Croton oil compared to 35% phenol-Croton oil Hetter’s very heavy formula for deep chemical peel
- Author
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Lemes, Bruna Mikulis, da Silva Justo, Aline, Lin, Erica Miyake, Capote, Anna Claudia M.O., Neves, Anny K.L., Machinski, Isadora, Pereira, Airton V., Koga, Adriana Yuriko, Lipinski, Leandro C., Beltrame, Flavio Luis, Miot, Helio A., and Wambier, Carlos Gustavo
- Published
- 2022
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13. Comment on “Anti-aging effects of ingenol mebutate for patients with actinic keratosis” and phenol-croton oil peelings
- Author
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Wambier, Carlos Gustavo, Lee, Kachiu Cecilia, Bertolini, Thomas Michael, Rullan, Peter P., and Beltrame, Flavio Luis
- Published
- 2019
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14. Comment on “Surgical smoke: Risk assessment and mitigation strategies” and chemical adsorption by activated carbon N95 masks
- Author
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Wambier, Carlos Gustavo, Lee, Kachiu Cecilia, Oliveira, Patrícia Botini de, Wambier, Sarah Perillo de Farias, and Beltrame, Flávio Luís
- Published
- 2019
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15. Anti-ulcer mechanisms of polyphenols extract of Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns (Euphorbiaceae)
- Author
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Minozzo, Bruno Rodrigo, primary, Lemes, Bruna Mikulis, additional, Justo, Aline da Silva, additional, Lara, Jheniffer Ellen, additional, Petry, Victor Emanuel Kubaski, additional, Fernandes, Daniel, additional, Belló, Caroline, additional, Vellosa, José Carlos Rebuglio, additional, Campagnoli, Eduardo Bauml, additional, Nunes, Otalíbio Castiglione, additional, Kitagawa, Rodrigo Rezende, additional, Avula, Bharathi, additional, Khan, Ikhlas Ahmad, additional, and Beltrame, Flávio Luis, additional
- Published
- 2016
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16. Avaliação preliminar da associação entre anfotericina e hesperina com oxidantes e células huvec.
- Author
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Manente, Francine Alessandra, Tostes da Silva, Ana Flavia, Aparecida Schemberger, Josiane, Aparecida Heinrich, Isabella, Mattar Munhoz, Antonio Carlos, Beltrame, Flávio Luis, Geraldo Maia, Danielle Cardoso, Urbaczek, Ana Carolina, Zeppone Carlos, Iracilda, and Rebuglio Vellosa, José Carlos
- Abstract
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- Published
- 2014
17. Efeito citotóxico do látex de Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns (Euphorbiaceae) para modelo de melanoma murino
- Author
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Andrade, Evelyn Assis de, Universidade Federal do Paraná, Universidade Estadual de Ponta Grossa, Beltrame, Flávio Luis, Paludo, Kátia Sabrina, Filipak Neto, Francisco, and Pereira, Airton Vicente
- Subjects
Citotoxicidade ,Terpenes ,Ésteres de forbol ,Cytotoxicity ,Phorbol Esters ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,Euphorbia umbellata ,Melanoma ,Terpenos - Abstract
Submitted by Angela Maria de Oliveira (amolivei@uepg.br) on 2020-05-19T17:19:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertação - Evelyn Assis de Andrade.pdf: 2754781 bytes, checksum: 0489ad121c0e18a0ec2c9a2e251a6dfb (MD5) Made available in DSpace on 2020-05-19T17:19:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertação - Evelyn Assis de Andrade.pdf: 2754781 bytes, checksum: 0489ad121c0e18a0ec2c9a2e251a6dfb (MD5) Previous issue date: 2020-03-06 Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns é conhecida popularmente como “janaúba” e seu látex é empiricamente utilizado como uma “garrafada” para tratamento de diversas doenças, entre elas o câncer. Frente a isso, o objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade citotóxica in vitro e in vivo de compostos presentes no látex de E. umbellata, baseando-se em seu uso e indicação tnofarmacológica e relacionar os resultados com a composição química dessa matriz vegetal. Para tanto, o látex foi coletado e fracionado em extrator Soxhlet, do qual foram obtidas 8 frações, as quais foram utilizadas nos ensaios de citotoxicidade (MTT e vermelho neutro) frente à linhagem B16F10 (melanoma murino); os resultados foram utilizados para o cálculo do CI50 e, com base nestes, pode-se calcular o índice de seletividade (IS). Para os ensaios in vivo, foram utilizados 36 camundongos C57BL/6, machos, nos quais foram inoculadas as células B16F10 para formação do tumor e posteriormente estes animais foram tratados com a subfração diclorometano nas concentrações de 1 mg/kg e 10 mg/kg por 15 dias. Os resultados in vitro demonstraram-se pertinentes para o látex (CI50 = 0,69 ± 0,12 μg/mL, com IS = 0,6 por MTT; e CI50 = 0,02 ± 0,004 μg/mL, com IS = 6,3 por vermelho neutro) e para a fração hexano (CI50 = 24,44 ± 2,30 μg/mL, com IS = 0,8, por MTT e CI50 = 21,30 ± 16,60 μg/mL, com IS = 1,1 por vermelho neutro) e promissores para as subfrações éter de petróleo (CI50 = 5,99 ± 0,23 μg/mL, com IS = 3,98, por MTT) e diclorometano (CI50 = 16,20 ± 7,33 μg/mL, com IS = 0,30 por MTT). A análise espectrofotométrica das frações permitiu determinar que a subfração diclorometano apresenta maior quantidade de terpenos totais expressos em eufol. Acrescenta-se a isso o dado que a análise das frações, por CLAE-EM/EM permitiu quantificar grande quantidade de ésteres de forbois nas frações clorofórmio e acetato de etila e na subfração etanol. Com relação aos resultados in vivo, para o experimento realizado nesse trabalho, se verificou que a subfração diclorometano não demonstrou diferença significativa no volume do tumor nas concentrações testadas, frente ao controle negativo. Conclui-se que o látex de E. umbellata apresenta potencial citotóxico in vitro frente a linhagem B16F10, resultado esse que não foi confirmado nos experimentos in vivo, nesse trabalho. Ainda, pode-se inferir que essa ação pode estar relacionada a presença de terpenos na matriz vegetal. Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns is popularly known as "janauba" and its latex is empirically used for the treatment of several diseases, including cancer. So, the aim of this work was to evaluate the in vitro and in vivo cytotoxic activity of compounds present in E. umbellata latex, based on its use and ethno pharmacological indication,and correlate the results to the chemical composition of this plant. For this, the latex was collected and fractionated in Soxhlet extractor and 8 extracts (samples) were obtained. The extracts were used in the cytotoxicity assays (MTT and neutral red) against the B16F10 (murine melanoma) cell lines. The results were used to calculate the IC50 and, based on these; the selectivity index (IS) was determinate. For in vivo assays, 36 male C57BL/6 mice were used and B16F10 cells were inoculated for tumor formation and subsequently these animals were treated with dichloromethane subfraction at concentrations of 1 mg/ml and 10 mg/ml per 15 days. In vitro results were pertinent for latex (IC50 = 0.69 ± 0.12 μg/ml, with IS = 0.6 by MTT assay; and IC50 = 0.02 ± 0.004 μg/ml, with IS = 6.3 by neutral red assay) and for the hexane fraction (IC50 = 24.44 ± 2.30 μg/ml, with IS = 0.8, by MTT assay and IC50 = 21.30 ± 16.60 μg/ml, with IS = 1.1 by neutral red assay); for the petroleum ether (IC50 = 5.99 ± 0.23 μg/ml with IS = 3.98 by MTT) and dichloromethane (IC50 = 16.20 ± 7.33 μg/ml with IS = 0.30 by MTT) subfractions the results were promising. The spectrophotometric analysis of the fractions allowed determining that the dichloromethane subfraction has the highest amount of total terpenes expressed in eufol. In addition, the analysis of fractions by the LC-MS/MS technique allowed determining that the chloroform and ethyl acetate fractions and the ethanol subfraction presented a large amount of phorbol esters in their compositions. Regarding the in vivo results, for the experiment carried out in this work, it was found that the dichloromethane subfraction did not show a significant difference in the tumor volume in the tested concentrations, compared to the negative control. It is concluded that E. umbellata latex has in vitro cytotoxic potential compared to the B16F10 cell, a result that was not confirmed in the in vivo experiments in this work; it can still be inferred that this action may be related to the presence of terpenes in the plant matrix.
- Published
- 2020
18. Avaliação da atividade citotóxica de subfrações do látex de Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns e eufol
- Author
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Cruz, Luiza Stolz, Beltrame, Flávio Luis, Kanunfre, Carla Cristine, Paludo, Kátia Sabrina, and Barison, Anderson
- Subjects
Leukemia ,Forbol ,Terpenes ,Selective index ,Phorbol ,Leucemia ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,Índice de seletividade ,Euphorbia umbellata ,Terpenos - Abstract
Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-03-12T18:21:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luiza Stolz Cruz.pdf: 10331435 bytes, checksum: 9b1d4ec95714f86c9315354c7d388689 (MD5) Made available in DSpace on 2018-03-12T18:21:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luiza Stolz Cruz.pdf: 10331435 bytes, checksum: 9b1d4ec95714f86c9315354c7d388689 (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns tem seu látex utilizado, etnofarmacologicamente, para tratamento de câncer, incluindo leucemias. Uma doença maligna que atinge os leucócitos, com alta incidência, sendo o tipo de câncer mais comum na infância. O tratamento quimioterápico é, na maioria dos casos, o mais recomendado, mas apresenta-se como terapia muito agressiva e com diversos efeitos colaterais. Por conseguinte, o objetivo deste trabalho foi o de avaliar o potencial citotóxico da fração hexano do látex de Euphorbia umbellata suas subfrações e da substância isolada, eufol, frente a linhagens modelo de leucemia. Para tanto as células, Jurkat e HL-60, foram tratadas por 72 horas com a fração hexano (1,25-75 μg/mL), subfrações éter de petróleo, diclorometano, etanol e metanol (1,25-75 μg/mL) e com o eufol (10-50 μg/mL), sendo sua viabilidade celular avaliada pelo ensaio de redução do MTT ao final deste período. Para a subfração diclorometano (mais ativa) foi avaliada a viabilidade celular no período de 24 e 48 horas, além de ter sido determinado o índice de seletividade. Cabe ressaltar que a fração hexano e as subfrações foram obtidas por fracionamento em extrator de Soxhlet, enquanto o eufol, por precipitação ácida, seguida de cromatografia em coluna, e sendo identificado por ressonância magnética nuclear e espectrometria de massas. A fração hexano e as subfrações resultantes foram analisadas por cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas. A avaliação cromatográfica das subfrações permitiu sugerir 10 substâncias, os triterpenos: eufol; lanosterol; cicloartenol; tirucalol; taraxasterol e lupeol, os diterpenos: forbol-12,13,20- triacetato; 4-β forbol e 3-desoxo-3- 16-dihidroxi-12-desoxiforbol-3-13-16-20- tetracetato, e o esteroide sitosterol. Como resultado do ensaio citotóxico obteve-se, para a fração hexano uma CI50 de 0,061 ± 1,226 μg/mL para as células HL-60 e 4,624 ± 1,088 μg/mL para células Jurkat; para o eufol uma CI50 de 21,031 ± 1,778 μg/mL (HL-60) e 35,925 ± 5,011 μg/mL (Jurkat). Dentre as subfrações a diclorometano apresentou o melhor perfil de resposta com valores de 0,005±0,098 μg/mL (HL-60) e 0,200±0,957 μg/mL (Jurkat), revelando que o tratamento é tempo dependente. Ademais a subfração diclorometano mostrouse seletiva para o tratamento de leucemia com índices de seletividade superior a 2. Portanto, conclui-se que a subfração diclorometano é a promissora para o tratamento de leucemia, possivelmente por ação sinérgica dos terpenos nela presente. Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns has its latex used, ethno-pharmacologically, for the treatment of cancer, including leukemias. A malignant disease that affects leukocytes, with high incidence, being the most common type of cancer in childhood. Chemotherapy treatment is, normally, the most recommended, but it presents as very aggressive therapy and with several side effects. Therefore, the objective of this work was to evaluate the cytotoxic potential of the hexane fraction of Euphorbia umbellata latex, the subfraction of that and the isolated substance, euphol, against leukemia model lines. For this, the cells, Jurkat and HL-60, were treated for 72 hours with the hexane fraction (1.25-75 μg/mL), subfractions petroleum ether, dichloromethane, ethanol and methanol (1.25-75 μg/mL), and euphol (10-50 μg/mL), and their cell viability was evaluated by the assay of MTT reduction at the end of this period. For the dichloromethane subfraction (the most active), the cell viability was evaluated in the period of 24 and 48 hours, in addition, the selectivity index was determined. It should be noted that the hexane fraction and subfractions were obtained by fractionation in Soxhlet extractor, while euphol by acid precipitation, followed by column chromatography, and being identified by nuclear magnetic resonance and mass spectrometry. The hexane fraction was partitioned and the resulting subfractions were analyzed by gas chromatography coupled to the mass spectrometer. The chromatographic evaluation of the subfractions allowed to suggest 10 substances, the triterpenes: euphol; lanosterol; cycloartenol; tirucallol; taraxasterol and lupeol, the diterpenes: phorbol-12,13,20-triacetate; 4- β-phorbol and 3-deoxo-3-16-dihydroxy-12-deoxyphorbol-3-13-16-20-tetracetate, and the steroid sitosterol. As a result of the cytotoxic assay, an IC50 of 0.061 ± 1.226 μg/mL was obtained for HL-60 cells and 4.624 ± 1.088 μg/mL for Jurkat cells; and for euphol an IC50 of 21.031 ± 1.778 μg/ml (HL-60) and 35.925 ± 5.011 μg/ml (Jurkat). Among the subfractions, the dichloromethane presented the best response profile with values of 0,005±0,098 μg/mL (HL-60) and 0,200±0,957 μg/mL (Jurkat), revealing that the treatment is time dependent. In addition, the dichloromethane subfraction was selective for the treatment of leukemia with indexes of selectivity superior to 2.Therefore, it is concluded that the subfraction dichloromethane is promising for the treatment of leukemia, possibly by synergistic action of the terpenes in it.
- Published
- 2017
19. MEMBRANAS DE QUITOSANA CONTENDO FRAÇÃO METANÓLICA DE Euphorbia umbellata (PAX) BRUYNS (EUPHORBIACEAE): DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO E AVALIAÇÃO
- Author
-
Lemes, Bruna Mikulis, Beltrame, Flávio Luis, Novatski, Andressa, Farago, Paulo Vitor, and Bruschi, Marcos Luciano
- Subjects
Compostos fenólicos ,Membranas de quitosana ,Caracterização físico-química ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,Euphorbia umbellata ,Infrared spectroscopy ,Phenolic compounds ,Chitosan membranes - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BRUNA MIKULIS LEMES.pdf: 2339856 bytes, checksum: 090063d94222c9d5a81d2f53dd692a81 (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The abusive use of anti-inflammatory drugs entails health risks and this fact has increasingly led researchers to seek alternative new drugs and safer formulations.Consequently the development of new, modified drug delivery systems and the search for new drugs, presents itself as a great research field. The extracts from plant species stand out as a matrix of interest due to the presence of possible active compounds. These compounds include the class of phenolic compounds, which is a structurally diversified class whose antioxidant and anti-inflammatory activity have already been well-studied and recognised. The species Euphorbia umbellata has attracted attention in recent years in relation to its ethnopharmacological use for the treatment of cancer and inflammation and it presents as candidate to be used in formulations with antiinflammatory activity, which is especially present among in its metabolites, i.e. phenoliccompounds. Consequently, this study developed, characterised and evaluated chitosan membranes containing the methanol fraction of E. umbellata for topical application in relation to their antioxidant and antimicrobial potential. Initially, the quantitative determination of phenolic compounds (total flavonoids and phenolics) present in the crude extract and its fractions (hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol) were performed using UV-VIS, and a qualitative chromatographic evaluation of the methanolic fraction was performed using UHPLC-MS. The physicochemical characterisation of the membranes was performed using SEM and EGF techniques,density, XRD, FTIR, DSC, TGA, colour measurements, and pharmacological evaluation in vitro by determining the scavenging (DPPH and ABTS) and antimicrobial potential, in addition to ex vivo permeation testing. The quantification of phenolic compounds demonstrated that the methanolic fraction contained the highest amount ofthese compounds (225.205 mg.g-1) and the chromatographic evaluation of themethanolic fraction made it possible to suggest 23 molecules of phenolic substances belonging to the classes of simple phenolic acids, tannins and flavonoids. The characterisation tests showed variations related to the addition of the methanolic fraction of the chitosan matrix, which showed interaction between the chitosan matrix and the polymer structure. The antioxidant and antimicrobial tests indicated the positive potential of the membranes in relation to the studied models. Similarly, these formulations also stood out in the antimicrobial assay. There was no permeation of the Franz cell model, suggesting a local activity. Thus, it was possible to demonstrate that interactions occurred between the methanolic fraction and the polymer. These formulations show promising potential for topical application in relation to antiinflammatory action. O uso abusivo de medicamentos anti-inflamatórios traz riscos à saúde da população e tal fato preocupa e instiga cada vez mais os pesquisadores a buscar alternativas de novos fármacos e formulações mais seguros. Neste sentido o desenvolvimento de novas formas farmacêuticas de liberação modificada e a busca de novos fármacos, apresentase como um campo de pesquisa de grande importância. Os extratos de espécies vegetais se destacam com uma matriz de interesse em decorrência da presença de possíveis moléculas bioativas. Entre estes compostos destacam-se os fenólicos, que se destacam como uma classe bastante diversificada estruturalmente e cuja atividade antioxidante e anti-inflamatória são bem estudadas e reconhecidas. A espécie Euphorbia umbellata tem despertado interesse nos últimos anos quanto ao seu uso etnofarmacológico para tratamento de quadros de câncer e inflamação, e apresenta-se como candidata a ser empregada em formulações com atividade anti-inflamatória, especialmente por apresentar entre seus metabólitos, os compostos fenólicos. Sendo assim, no presente estudo, membranas de quitosana contendo a fração metanólica de E. umbellata para aplicação tópica foram desenvolvidas, caracterizadas e avaliadas quanto ao seu potencial antioxidante e antimicrobiano. Para tanto, inicialmente foram realizadas a determinação quantitativa dos compostos fenólicos (fenólicos e flavonoides totais) presentes no extrato bruto e suas frações (hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol) por UV-VIS e a avaliação cromatográfica qualitativa da fração metanólica por UHPLC-MS. A caracterização físico-química das membranas foi desenvolvida por meio de técnicas de MEV, FEG, densidade, DRX, FTIR, DSC, TGA, determinação de cor e avaliação farmacológica in vitro mediante a determinação do potencial scavenger (DPPH e ABTS) e antimicrobiano, além do teste de permeação ex vivo. A quantificação de fenólicos revelou que a fração metanólica é a que possui maior quantidade desses compostos (225,205 mg.g-1) e a avaliação cromatográfica da mesma permitiu sugerir 23 moléculas de substâncias fenólicas pertencentes as classes dos ácidos fenólicos simples, taninos e flavonoides. Os testes de caracterização evidenciaram variações relacionadas à adição da fração metanólica à matriz de quitosana, o que demonstra a interação desta com a estrutura do polímero. Os ensaios antioxidante e antimicrobiano indicaram favorável potencial das membranas M50FM e M100FM, nos modelos estudados. Da mesma forma, estas formulações também se destacaram no ensaio antimicrobiano. Não foi observada permeação cutânea o modelo de célula de Franz, o que aponta para uma atividade local. Deste modo, foi possível indicar que ocorrem interações entre a fração metanólica e o polímero, entretanto as formulações são candidatas promissoras à aplicação tópica para ação anti-inflamatória.
- Published
- 2016
20. Sistema de respostas de Bacillus sp. à toxicidade induzida pelo herbicida Callisto e princípio ativo
- Author
-
Dobrzanski, Tatiane, Pileggi, Marcos, Batista, Jesiane S. S., Azevedo, Ricardo Antunes de, and Beltrame, Flávio Luis
- Subjects
catalase ,superóxido dismutase ,lipid peroxidation ,hydrogen peroxide ,peróxido de hidrogênio ,degradação ,superoxide dismutase ,estresse oxidativo ,rotas metabólicas ,oxidative stress ,metabolic pathways ,peroxidação lipídica ,degradation ,CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULAR [CNPQ] - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T19:59:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiane Dobrzanski.pdf: 2071508 bytes, checksum: e3c3a02783ca0c1929ed8b2a83555230 (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 Excessive use of herbicides for weed control in agriculture causes a selective pressure on soil microbiota and waters near application area, changing environmental balance. Some microorganisms have developed metabolic pathways for degradation of these xenobiotics, although tolerance and degradation processes can generate free radicals and affect survival. This study aimed to analyze the system of responses from soil and water strains, submitted to selective pressure by the herbicide Callisto®. Strains CCT7729 and CCT7730, isolated from soil and water, respectively, were identified as Bacillus sp., and showed different degradation routes, with different metabolites, already described in the literature. Mesotrione and its metabolites, and especially its commercial product Callisto, affected cell viability and altered cell membrane lipids from the tested strains, however, Bacillus sp. CCT7729 presented a more efficient system of responses to oxidative stress. This strain exhibited a greater efficiency to degrade mesotrione, lower rates of peroxide, lower rates of MDA, SOD high activity and low activity of catalase, when compared to Bacillus sp. CCT7730. Changes in membrane lipids can be considered as a defense against oxidative stress strategy. These results indicated the existence from a variety of metabolic pathways for mesotrione degradation to Bacillus sp. Probably metabolites induce different levels of toxicity in bacteria, and Bacillus sp. CCT7730 possibly degraded mesotrione in even harmful compounds, unlike the water line. It is possible that these different responses are related to the home environments of each strain, suggesting plasticity responses of Bacillus sp. for adaptation to toxic substances in different environmental contexts. O uso intenso de herbicidas para controle de ervas daninhas na agricultura provoca uma pressão seletiva na microbiota do solo e de águas próximas à área de aplicação, alterando o equilíbrio ambiental. Alguns microrganismos apresentam vias metabólicas de degradação desses xenobióticos, entretanto, a tolerância e os processos de degradação podem gerar radicais livres capazes de afetar a sobrevivência. Este trabalho teve como objetivo analisar o sistema de respostas de linhagens provenientes de solo e água, e que foram submetidas a pressão seletiva pelo herbicida Callisto. Uma linhagem isolada de cada um destes ambientes, identificadas respectivamente, como Bacillus sp. CCT7729 e Bacillus sp. CCT7730, apresentaram rotas de degradação diferenciadas, com metabólitos diferentes dos já descritos na literatura. O mesotrione, seus metabólitos, e principalmente o Callisto, afetaram a viabilidade celular das linhagens deste estudo e alteraram os lipídios de membrana celular, no entanto, Bacillus sp. CCT7729 apresentou um sistema de respostas ao estresse oxidativo mais eficiente. Esta linhagem exibiu uma maior eficiência em degradar o mesotrione, menores taxas de peróxido, menores taxas de MDA, atividade SOD elevada e uma baixa atividade da catalase, ao contrário de Bacillus sp. CCT7730. Modificações nos lipídios de membrana podem ser consideradas como uma estratégia de defesa contra estresse oxidativo. Os resultados também indicaram uma diversidade de vias metabólicas nas duas linhagens de Bacillus sp. para a degradação do mesotrione. Provavelmente os metabólitos induziram diferentes níveis de toxicidade nas bactérias, sendo que Bacillus sp. CCT7730 possivelmente degradou o mesotrione em compostos ainda nocivos, ao contrário da linhagem de água. É possível que essas diferentes respostas estejam relacionadas com os ambientes de origem de cada linhagem, sugerindo uma plasticidade de respostas apresentadas por linhagens Bacillus sp. para adaptação a substâncias tóxicas em diferentes contextos ambientais.
- Published
- 2015
21. CARACTERIZAÇÃO MORFOANATÔMICA, ESTUDO FITOQUÍMICO E AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE DE Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns (EUPHORBIACEAE)
- Author
-
Luz, Lívia Eidam Camargo, Beltrame, Flávio Luis, Paludo, Katia, Budel, Jane Manfron, and Mello, João Carlos Palozzo de
- Subjects
látex ,câncer ,latex ,Janaúba ,linhagens tumorais ,tumoral lineages ,cancer ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Livia Eidam.pdf: 4492366 bytes, checksum: 6f8d83617df523059e48fdad789c558f (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns, also known as janauba, belonging to the Euphorbiaceae family and it is the nomenclature accepts for Synadenium grantii Hook. f and Synadenium umbellatum Pax, which are synonymies according to some bibliographical references. It is popularly an employed species for the treatment of several cancer types, being the latex the vegetable part used for this purpose. In way to identify the species correctly, to contribute with the quality control and to correlate scientific studies of evaluation anticancer with the use etnopharmacologic, the proposed objectives were: to explore the morphoanatomy of E. umbellata; to evaluate the toxicity for the cells HeLa, HRT-18 and Jurkat and to proceed the phytochemistry investigation in the search of active substances. For the analysis macro and microscopic, leaves and stems of specimens designated as Synadenium grantii Hook. F (in Ponta Grossa) and Synadenium umbellatum Pax (in Goiânia) were previously fixed fastened in FAA solution. The material was sectioned by hand in the transverse and longitudinal directions. Astra blue and basic fuchsin were employed for staining. The citotoxicity of the latex was studied through biological rehearsals, with methodologies of mitochondrial reduction for MTT, internalization of VN for lysosomes; morphology for May Grunwald and Giemsa; membrane integrity for trypan blue; calculation of IC50; quantification of the content of DNA for DPA and propidium iodide; morphology for acridine orange and flow citometry. The phytochemistry, accomplished by accompaniment of biological rehearsals (biomonitored) results, it was done with the fraction Hex. The results ethnobotanical proved that the two specimens evaluated treat of the same plant which should be correctly denominated Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns. These results elucidated the epicuticular wax, paracytic stomata and non-glandular trichomes; as well as laticifers; and they revealed chemical markers as the outstanding presence of the latex; composed lipophilic and phenolics compounds; starch and mucilage. The experimentation in vitro showed that the leukemic cells were firstly more responsive to the latex and later to the fraction Hex. IC50 calculated for the hexane fraction was of 1,87 μg/mL, value this that turns the composed phytocomplex of this fraction a promising antitumoral agents. After comparison with IC50 of non neolpasic cells, it was demonstrated IS of 5,98 and this corroborates the existence of selectivity action in relation to the analyzed cells. For flow citometry stop of cellular progression was verified, with substantial increase of the cells in phase G0/G1 and decrease of these in the phase G2/M. The phytochemistry study could contribute to the isolation of two identified triterpenes for techniques of nuclear magnetic resonance (RMN), being a pentacyclic denominated as germanicol acetate and for the first time isolated of this vegetable species and other tetracyclic designated euphol and already isolated of this Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns. Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns, conhecida também por janaúba, pertencente a família Euphorbiaceae e é a nomenclatura aceita para Synadenium grantii Hook. f e Synadenium umbellatum Pax, as quais são sinonímias segundo algumas referências bibliográficas. É uma espécie empregada popularmente para o tratamento de diversos tipos de câncer, sendo o látex a parte vegetal utilizada para este fim. De forma a identificar corretamente a espécie, contribuir com o controle de qualidade e correlacionar estudos científicos de avaliação anticâncer com o uso etnofarmacológico, os objetivos propostos foram: explorar a morfoanatomia de E. umbellata; avaliar a toxicidade para as células HeLa, HRT-18 e Jurkat e proceder a investigação fitoquímica na busca de substâncias ativas. Para a análise macro e microscópica, folhas e caules de espécimes designados como Synadenium grantii Hook. F (em Ponta Grossa) e Synadenium umbellatum Pax (em Goiania) foram previamente fixados em solução FAA. O material foi cortado à mão nos sentidos transversal e longitudinal. Azul de astra e fucsina básica foram utilizados para a coloração. A citotoxicidade do látex foi estudada através de ensaios biológicos, com metodologias de redução mitocondrial por MTT, internalização de VN por lisossomos; morfologia por May Grunwald e Giemsa; integridade de membrana por azul de tripan; cálculo de IC50; quantificação do conteúdo de DNA por DPA e iodeto de propídio; morfologia por alaranjado de acridina e citometria de fluxo. A fitoquímica, realizada por acompanhamento dos resultados dos ensaios biológicos (biomonitorado), foi feita com a fração Hex. Os resultados etnobotânicos comprovaram que as duas espécimes avaliadas tratam da mesma planta a qual deve ser corretamente denominada Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns. Estes resultados elucidaram a existência de cêra epicuticular, estômatos paracíticos e tricomas tectores; assim como os tubos laticíferos; e revelaram marcadores químicos como a marcante presença do látex; compostos lipofílicos e fenólicos; amido e mucilagem. A xperimentação in vitro mostrou que as células leucêmicas foram primeiramente mais responsivas ao látex e posteriormente à fração Hex. O IC50 calculado para a fração hexânica foi de 1,87 μg/mL, valor este que torna o fitocomplexo constituidor desta fração um promissor agente antitumoral. Após comparação com o IC50 de células não neoplásicas, foi demonstrado IS de 5,98 e isso corrobora a existência de seletividade de ação em relação às células analisadas. Por citometria de fluxo verificou-se parada de progressão celular, com aumento substancial das células em fase G0/G1 e diminuição destas na fase G2/M. O estudo fitoquímico pôde contribuir para o isolamento de dois triterpenos identificados por técnicas de ressonância magnética nuclear (RMN), sendo um pentacíclico denominado como acetato de germanicol e pela primeira vez isolado desta espécie vegetal e outro tetracíclico designado eufol e já isolado de Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns.
- Published
- 2015
22. Estratégias adaptativas da linhagem não ambiental Escherichia coli DH5-α ao herbicida mesotrione
- Author
-
Olchanheski, Luiz Ricardo, Pileggi, Marcos, Pileggi, Sonia Alvim Veiga, Beltrame, Flávio Luis, and Ribeiro, Manuella Nóbrega Dourado
- Subjects
CIENCIAS BIOLOGICAS [CNPQ] ,Biodegradação ,Saturação de lipídeos ,Glutathione-S-Transferase ,Callisto ,Biodegradation ,Glutationa-S-Transferase ,Callisto, Lipid peroxidation ,Lipid saturation ,Peroxidação lipídica - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T20:00:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luiz Ricardo Olchanheski.pdf: 1069422 bytes, checksum: 4a8faf74d88ea768a689fc8a9a055a56 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná The intensive use of agrochemicals has assumed an important role in increasing agricultural production; however, one of the impacts has been changes in population structure of microbiota in the soil, which need to tolerate the xenobiotics that are applied in order to survive. A pertinent question is whether these mechanisms are selected by the presence of different agrochemicals in soils, or if there are constitutive mechanisms of adaptation. The aim of this study was to evaluate the defense system of an un-environmental strain, E. coli DH5-α, in relation to the herbicide mesotrione, which had no prior contact with the soil. The results showed that this strain was able to tolerate higher doses of the herbicide, and that the determination of the herbicide by a method developed and validated by high performance liquid chromatography (HPLC), made it possible to determine the complete disappearance of mesotrione in the sample after 3 h of exposure. Growth rates in the treatment with the herbicide were lower than the control, prior to the period of degradation, showing the toxic effect on the bacterial cells. As regards defense systems, it was noted that changes in the saturation of the membrane lipids reduced the damage caused by reactive oxygen species and possibly hindered the entry of xenobiotics in the cell, as well as activating GST enzyme activity in the antioxidant system and in the metabolizing process of the herbicide. Considering that E. coli DH5-α showed no previous contact with mesotrione, the defense system found in this strain can be considered as general and non-specific. This strategy may be interesting in the adaptation of bacterial strains in agricultural soils, which are subject to changing herbicides in an ever more intense manner. O uso intensivo de agroquímicos tem assumido um papel relevante no aumento da produção agrícola, mas um dos impactos gerados é a mudança na estrutura populacional de microbiotas de solo, que precisam tolerar os xenobióticos aplicados para sobreviver. Uma pergunta pertinente é se os mecanismos de tolerância são selecionados pela presença de diferentes agroquímicos em solo, ou se há mecanismos constitutivos de adaptação. O objetivo deste trabalho foi avaliar o sistema de defesa de uma linhagem não ambiental, a E. coli DH5-α, em relação ao herbicida mesotrione, com o qual não houve contato prévio em solo. Resultados obtidos mostraram que esta linhagem foi capaz de tolerar elevadas doses do herbicida, e a determinação do herbicida por um método desenvolvido e validado por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) permitiu determinar que após 3 horas não foi possível detectar o herbicida nas amostras avaliadas. Taxas de crescimento no tratamento com o herbicida foram menores em relação ao controle nos tempos anteriores ao período de degradação, mostrando o efeito tóxico sobre as células bacterianas. Como sistemas de defesa, constataram-se a alteração na saturação dos lipídeos de membrana, diminuindo os danos causados pelas espécies ativas de oxigênio e possivelmente dificultando a entrada do xenobiótico na célula, além da atuação da enzima GST no sistema antioxidante e no processo de metabolização do herbicida. Considerando que a E. coli DH5-α não apresentou um contato prévio com o mesotrione, o sistema de defesa encontrado nesta linhagem pode ser considerado como geral e não específico. Esta estratégia pode ser interessante na adaptação de linhagens bacterianas em solos agrícolas, os quais são submetidos a regimes de trocas de herbicidas de maneira cada vez mais intensa.
- Published
- 2014
23. DEVELOPMENT AND VALIDATION OF A LIQUID CHROMATOGRAPHY METHOD FOR THE QUALITATIVE, QUANTITATIVE AND CHEMOMETRIC EVALUATION OF Ilex paraguariensis EXTRACTS
- Author
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Pinto, Rodrigo Moreira Caetano, Beltrame, Flávio Luis, Pereira, Airton Vicente, Cass, Quezia Bezerra, and Demiate, Ivo Mottin
- Subjects
lIlex paraguariensis ,quality by design ,Ilex paraguariensis ,CLAE ,fingerprint ,HPLC ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,quimiometria ,chemometrics - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:42:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigo Moreira Caetano Pinto.pdf: 2408271 bytes, checksum: dd930813a70ef7a000eb483899333bfd (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The use of natural products with therapeutic or nutraceutical purposes is growing in the brazilian society, due the easily access to this. However, the indiscriminate use or use of wrongly identified species represent a risk of the user. Thus, phytochemical and pharmacological studies, and the development of analytical methods to the quality control of these products are important actions to ensure the reliability of them. Thus, it is necessary a consistent quality evaluation of vegetal raw materials, that endorse its identity and quality. The erva-mate (Ilex paraguariensis A.St.-Hil. - Aquifoliaceae) is a south brazilian native specie, heavily consumed as stimulant drink. This plant have presented a great economic value as raw material, due the growing interest of the cosmetic and pharmaceutical industries, mainly arising the stimulant, antioxidant and lipolytic potential. The high performance liquid chromatography (HPLC) is a fast and efficient method to the qualitative and quantitative evaluation of medicinal plants and its extracts. The development of analytical methods to quality control of these materials is a necessary action for the pharmaceutical, cosmetic and food industries. To the industries, the Quality by Design approach – that proposes the creation of a design of experiments (DOE) that evaluate simultaneously many relevant factors to the separation efficiency – is an alternative to the classic optimization of HPLC methods, because allows the efficient evaluation of more variables in a short time. In this sense, the aim of this work was realize a factorial study (QbD-DOE) of the main variables that may affect the optimization of a chromatographic method to vegetal extracts, and proposes the development of an analytical method. Were analyzed many relevant factors to the resolution of the chromatographic bands. In a first step, were evaluated the stationary phase, pH range, organic modifier type and the gradient time. In a second stage, was evaluated de pH value, final % of organic modifier, temperature and flow rate. The developed method was used to the evaluation of chemical characteristics of seven commercial samples of erva-mate obtained in the market of Ponta Grossa. The fingerprint was employed in a chemometric study, that allowed classify the samples according the chemical profiles, arising of plantation place, processment and extractor solvent. Yet, the obtained chromatographic run enabled the quantitative analysis of three chemical markers (chlorogenic acid, caffeine and theobromine). The contents of the markers founded by the validated method in the evaluated samples were different between aqueous (A) and hydroethanolic (H) extracts, due the differences on extraction potential of these solvents/procedures. The biggest content of caffeine were founded in the sample 5 (92.7 mg/100 g of dry leaves (A) and 349.19 mg/100g (H)). The same sample presented the least content of theobromine, in hydroethanolic extract (45.88 mg/100g), probably because the both xanthines are sourced of the same biosynthetic route. The chlorogenic acid were founded in highest proportion in the sample 2 (388.15 mg/100g (H) and 110.42 mg/100g (H)). The findings of this study reinforce the use of liquid chromatography as an analytical method, that associated to statistical tools may increase the strategies of erva-mate quality control, as vegetal raw material. A utilização de produtos naturais com fins terapêuticos ou nutracêuticos é crescente na sociedade brasileira devido à facilidade de acesso a estes. Entretanto o uso indiscriminado ou sem uma correta identificação da espécie vegetal que se está utilizando pode se apresentar como um risco ao usuário. Desta forma estudos fitoquímicos, farmacológicos e principalmente o desenvolvimento de métodos analíticos de controle da qualidade destes produtos e seus extratos se constituem em ações importantes para se garantir a confiabilidade dos mesmos. Desta forma, é necessário que a avaliação da qualidade de matérias-primas vegetais seja consistente e respalde sua identidade e qualidade. A erva-mate (Ilex paraguariensis A.St.-Hil. - Aquifoliaceae) é uma espécie vegetal nativa do sul do Brasil, muito consumida como bebida estimulante e vem se apresentando como uma matéria prima de grande valor econômico devido ao crescente interesse das indústrias de medicamentos, cosméticos e alimentos em decorrência principalmente do seu potencial antioxidante, estimulante e lipolítico. A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é um método rápido e eficiente para a avaliação qualitativa e quantitativa de plantas medicinais e seus extratos e o desenvolvimento de métodos analíticos para avaliação da sua qualidade se constitui em uma ação necessária a ser empregada no controle de qualidade de indústrias farmacêuticas, cosméticas e alimentícias. Para as indústrias, a abordagem Quality by Design – que propõe a criação de um desenho experimental que avalia simultaneamente múltiplos fatores relevantes para a eficiência da separação – se constituí em uma alternativa de estudo à otimização clássica de métodos por CLAE, pois permite que mais variáveis sejam avaliadas em um menor tempo e com maior eficiência. Desta forma, foi objetivo deste trabalho realizar um estudo fatorial das principais variáveis que podem interferir na otimização de um método cromatográfico para extratos vegetais e assim propor o desenvolvimento de um método analítico. Num primeiro momento, foram avaliadas a fase estacionária, faixa de pH, tipo de modificador orgânico e o tempo de corrida. Numa segunda etapa, foram avaliados o valor exato de pH, a concentração final do modificador orgânico, a temperatura e o fluxo. O método desenvolvido foi utilizado para avaliação das características químicas de sete amostras comerciais de erva mate obtidas no comércio da cidade de Ponta Grossa. O cromatograma fingerprint foi utilizado para a realização de um estudo quimiométrico que permitiu classificar as amostras quanto a semelhanças e diferenças químicas decorrentes da região de plantio, procedimento de processamento empregado e solvente extrator usado. Ainda, a corrida cromatográfica obtida possibilitou avaliação quantitativa de três marcadores químicos (ácido clorogênico, cafeína e teobromina). Os teores dos marcadores encontrados nas amostras avaliadas, através do método cromatográfico validado variaram entre as amostras de extrato aquoso (A) e hidroalcoólico (H), devido à diferença de potencial extrativo entre esses solventes/procedimentos. O maior teor de cafeína foi encontrado na amostra 5 (92, 7 mg/100 g de folhas secas (A) e 349,19 mg/100g (H)). A mesma amostra apresentou o menor teor de teobromina no extrato hidroalcoólico (45,88 mg/100g), provavelmente porque as duas xantinas dividem a mesma rota de biossíntese. O ácido clorogênico foi encontrado em maior proporção na amostra 2 (388,15 mg/100g (H) e 110,42 mg/100g (A)). Os achados deste estudo reforçam o uso da cromatografia líquida, como um método analítico que associado a ferramentas estatísticas possibilitam incrementar as estratégias de controle de qualidade da erva-mate enquanto matéria-prima vegetal.
- Published
- 2014
24. ESTUDO FITOQUÍMICO E AVALIAÇÃO ANTITUMORAL DO LÁTEX DE Synadenium grantii Hook. f. (Euphorbiaceae)
- Author
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Oliveira, Thais Latansio de, Beltrame, Flávio Luis, Campos, Francinete Ramos, and Faveró, Giovani Marino
- Subjects
antitumoural ,Synadenium grantii ,euphol and citrostadienol ,antitumoral ,Euphorbiaceae ,Euphorbiacea ,citrostadienol ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,eufol - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 THAIS LATANSIO DE OLIVEIRA.pdf: 1760436 bytes, checksum: 6934360fd3823c3b79ce5e2d581fe222 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 The Synadenium grantii Hook f. species is a plant of the Euphorbiaceae family and is popularly known as cega-olho, leitosinha, janaúba, cola-nota among other names. Its latex has been used traditionally in the region of “Campos Gerais” as "garrafada", obtained from this dilution in water (18 drops into 1 liter). Its medicinal applications are widespread in Brazilian popular culture to cure various types of cancer, among other diseases, such as inflammation and ulcers. However, there are no scientific studies that prove these effects besides little is known about the chemical constitution of the species. The aims of this study was to conduct a phytochemical study of S. grantii latex; evaluate its antitumor activity in vitro against melanoma cell line (B16F10); analyze the changes in the distribution of tumor cells in cell cycle phases and also to evaluate the antitumor activity of latex in vivo and histological changes in animals treated with the popular way to use latex plant. The evaluation phytochemical latex was carried out by chromatographic procedures (column chromatography and thin layer chromatography) and spectroscopic procedures (1H NMR and 13C) from which was obtained the isolation and characterization of a triterpenoid and steroid identified as euphol respectively and citrostadienol. Evaluation of the cytotoxicity was determined by the reduction method of MTT ([3 - (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) and by exclusion with Trypan Blue. For the tests in vitro, látex concentrations of 0.012 μg/well to 48.8 mg/well were tested and also two isolated compounds (Euphol and Citrostadienol) at concentrations of 2.5 mg/mL - 250μg/mL. To assess changes in the cell cycle, the cells were analyzed by flow cytometry and histological evaluation was performed by hematoxylin-eosin. The cytotoxic assays demonstrated that the S. grantii latex was able to reduce the growth and viability of the cell lines showing concentration and time dependent effect in both methodologies evaluated. In addition, induced cell cycle arrest in S- G2/M phase. Isolated substances only citrostadienol showed a reduced cytotoxic activity in vitro against B16F10 lineage. In vivo assays demonstrated a reduction of 40% in the size of tumours in mice treated with the popular way to use latex but the histological evaluation of organs analyzed (tumor, lung, liver and lymph nodes) was similar in the treated and untreated animals. A espécie Synadenium grantii Hook. f. é uma planta pertencente a família Euphorbiaceae, sendo conhecida popularmente como cega-olho, leitosinha, janaúba, cola-nota e outros. Seu látex tem sido usado tradicionalmente na região dos Campos Gerais na forma de uma “garrafada”, obtida da diluição deste em água (18 gotas em 1 litro). Suas aplicações medicinais são muito difundidas na cultura popular brasileira para a cura de vários tipos de câncer, além de outras enfermidades, como inflamações e úlcera. No entanto, não existem estudos científicos que comprovem esses efeitos além de pouco se saber sobre a constituição química da espécie. Assim, os objetivos deste trabalho foram realizar um estudo fitoquímico do látex de S. grantii; avaliar sua atividade antitumoral in vitro frente a linhagem celular de melanoma (B16F10); analisar as modificações na distribuição das células tumorais nas fases do ciclo celular e ainda avaliar a atividade antitumoral do látex in vivo bem como as alterações histológicas dos animais tratados com a forma popular de uso do látex da planta. A avaliação fitoquímica do látex foi realizada através de procedimentos cromatográficos (cromatografia em coluna e cromatografia em camada delgada) e espectroscópicos (RMN de 1H e 13C) da qual se obteve o isolamento e caracterização de um triterpeno e um esteroide identificados como eufol e citrostadienol respectivamente. A avaliação da citotoxicidade foi determinada pelo método de redução do MTT (brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio) e pelo método de exclusão com Azul de Trypan. Para a realização dos ensaios in vitro, foram testadas concentrações do látex entre 1,7 μg/poço a 4,88 mg/poço e também as duas substâncias isoladas (Eufol e Citrostadienol) nas concentrações de 2,5 μg/mL - 250μg/mL. Para avaliação das modificações no ciclo celular, as células foram submetidas à análise por citometria de fluxo e a avaliação histológica foi realizada através da coloração hematoxilina-eosina. Os ensaios citotóxicos demonstraram que o látex de S. grantii foi capaz de diminuir o crescimento e a viabilidade das linhagens celulares em estudo apresentando efeito concentração e tempo dependentes nas duas metodologias avaliadas. Além disso, induziu parada do ciclo celular na fase S-G2/M. Das substâncias isoladas somente o citrostadienol apresentou uma reduzida atividade citotóxica in vitro frente a linhagem B16F10. Nos ensaios in vivo pode se observar uma diminuição em 40% no tamanho dos tumores dos camundongos tratados com a forma popular de uso do látex mas a avaliação histológica dos órgãos analisados (tumor, pulmão, fígado e linfonodos) foi semelhante no grupo tratado e não tratado.
- Published
- 2013
25. AVALIAÇÃO FITOQUÍMICA E DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE E ANTIMICROBIANA DE CASCAS DO CAULE DE Synadenium grantii Hook. f. (Euphorbiaceae)
- Author
-
Munhoz, Antonio Carlos Mattar, Beltrame, Flávio Luis, Vellosa, José Carlos Rebuglio, Kist, Airton, and Martins, Lúcia Regina Rocha
- Subjects
atividade antimicrobiana ,antimicrobial activity ,Synadenium grantii ,terpenos ,Euphorbiaceae ,atividade antioxidante ,antioxidant activity ,HPLC ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,terpenes - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio Carlos Mattar Munhoz.pdf: 1942364 bytes, checksum: 27beadc3c2442dbed10751b6f4c34610 (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná The Synadenium grantii specie is a shrub that reaches between 3 and 5 meters high, native of tropical Africa, producing of toxic latex. It is known in Brazil as janauba, tiborna or leitosinha and its latex is popularly used as remedy for reducing warts, treatment of cancer, gastric and inflammatory diseases. From its latex and aerial parts, some terpenes, anthocyanins, glycoproteins as lectin and serine proteases were already isolated. Biological studies report antitumor, antiparasitic, anti-haemostatic and anti-ulcer activities. The current study aimed to isolate and indentify bioactive compounds, as well as to identify the antioxidant and antimicrobial potential of the crude stem bark extract of S. grantii and its fractions. The chemical study was performed with the chloroform fraction, obtained from the crude stem bark extract (CE) using column and thin layer chromatographic techniques what enabled to isolate three triterpenes: eufol, and for the first time from this specie friedelin and 3 friedelinol. The compounds were identified by NMR and IR spectrometry and compared with literature data. With HPLC technique it was detected the presence of flavonoids in the CE, result that was reinforced with the quantification of total phenolics, by Folin-Ciocalteaumethod, for both CE and its fractions. It was observed that this specie is source of antioxidant compounds, due to the pronounced CE action for both chemical (ABTS+•, DPPH•, O2, HOCl) and enzymatic (MPO) in vitro systems, as well as ex vivo system (free radical induced haemolysis) indicating potential not only to neutralize, but for reduce formation of free radicals, as protect cells (erythrocytes) of free radicals deleterious action. In addition, an antimicrobial study was performed using disc-diffusion and MIC methods with the following microorganisms: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa,Enterococcus faecalis and Candida albicans. The last one exhibited sensibility to CE in both disc-diffusion and MIC (312 μg/mL). A Synadenium grantii é uma planta arbustiva que atinge entre 3 e 5 metros de altura, nativa da África tropical, produtora de um látex tóxico. É conhecida no Brasil como janaúba, tiborna ou leitosinha e seu látex é popularmente utilizado como remédio para a redução de verrugas, tratamento de câncer, doenças gástricas e inflamatórias. Do látex e partes aéreas da planta já foram isolados alguns terpenos, antocianinas e glicoproteínas como lectina e serino-proteases. Pesquisas biológicas já realizadas com esta espécie indicam ação antitumoral, antiparasitária, anti-hemostática e antiúlcera. O presente estudo objetivou isolar e identificar compostos bioativos, bem como identificar o potencial antioxidante e antimicrobiano do extrato bruto das cascas do caule da S. grantii e suas frações. O estudo químico foi realizado com a fração clorofórmica obtida do extrato bruto (EB) utilizando-se técnicas de cromatografia em coluna e camada delgada o que possibilitou o isolamento de três triterpenos: o eufol e também, pela primeira vez nesta espécie, a friedelina e o 3-friedelinol. As substâncias foram identificadas por espectroscopia de RMN e IV, comparando os dados obtidos com os existentes na literatura. Pela técnica de HPLC foi detectada a presença de compostos flavonoídicos no EB, resultado corroborado com a quantificação de fenólicos totais pelo método de Folin-Ciocalteau realizado tanto com o extrato bruto quanto com suas frações. Observou-se que esta espécie é fonte de compostos antioxidantes, devido à acentuada ação do extrato, tanto em sistemas químicos (ABTS+•, DPPH•, O2 •-, HOCl) e enzimáticos (MPO) in vitro, quanto em sistema ex vivo (hemólise induzida por radicais livres) indicando o potencial não apenas para neutralizar, mas também para reduzir a formação, bem como proteger células (eritrócitos) da ação deletéria de radicais livres. Ainda, um estudo antimicrobiano utilizando-se as técnicas de disco-difusão e CIM foi conduzido com os micro-organismos Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis e Candida albicans. Esta última demonstrou sensibilidade ao EB tanto na técnica de disco-difusão quanto na técnica de CIM (312 μg/mL).
- Published
- 2013
26. SCREENING FITOQUIMICO E ESTUDO BIOLÓGICO DE Synadenium grantii Hook.f.(EUPHORBIACEAE)
- Author
-
Costa, Larissa Lima Gonçalves, Beltrame, Flávio Luis, Silva, Rosi Zanoni da, Cortez, Diógenes Aparício Garcia, and Kanunfre, Carla Cristine
- Subjects
Latex ,Synadenium grantii ,cytotoxicity ,gastroprotective ,CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA [CNPQ] ,Látex ,citoxicidade, gastroprotetor - Abstract
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Larissa Costa.pdf: 1496969 bytes, checksum: f2789534183e9d45cff02658f91ba9fc (MD5) Previous issue date: 2011-10-25 The Synadenium grantii Hook. f. species is a plant of the Euphorbiaceae family and is popularly known as cega-olho, leitosinha, janaúba, cola-nota among other names. It has been used for many years in the form of prepared diluted latex (18 drops/1 liter of water) for the treatment of gastric disorders, and neoplastic diseases. However, there are currently no scientific studies that prove these effects, no information about the safe use of this plant by humans, as well as few phytochemical studies about this species. Therefore, the objectives of this work were: to conduct a phytochemical screening of the species; to determine the toxicity (LC50) of latex and crude extract in a lethality test with Artemia salina Leach; to evaluate the biochemical parameters (white blood cell count, determination of alanine aminotransferase [ALT], aspartate aminotransferase [AST], albumin, creatinine and C-reactive protein); to evaluate the toxicological parameters (macroscopically evaluate organs such as liver, spleen, kidneys, pancreas, uterus, ovaries, adrenal glands and stomach in animal experiments); and to determine its antiulcer activity with the aim of enhancing academic and popular knowledge about this species. Phytochemical screening was performed using the hydroalcoholic crude extract of the bark and the latex, in both of which the presence of several classes of secondary metabolites of pharmacological interest, including: coumarins, tannins, anthraquinones, saponifiable compounds and terpenes were found. Toxicity tests against A. salina were performed using the fresh latex and crude bark extract at concentrations of 10 - 0.05% (v/v) and 1000 to 1 μg/mL respectively. The results showed that in the tested concentrations, the latex has marked toxicity (LC50 = 26.58 μg/mL) while the crude extract of the bark showed low toxicity (LC50 = 778.66 μg /mL). In acute toxicity tests, it was possible to determine that a dose of 2.4 g/kg (0.5 ml) of S. grantii latex presented biochemical changes related to the AST, ALT parameters that were evaluated. To determine the antiulcer activity we used adult female Wistar rats that suffered from ulcers induced by two models (ethanol and indomethacin). The fresh latex showed a gastroprotective effect in relation to both the evaluated models and a 90 % rate of inhibition in the formation of ulcers, whilst the prepared latex showed a 5.7 % inhibition when the ethanol model was utilised to induce ulcers. The results of this study indicate the importance and need for additional studies in the search for evidence of biological activity for this popularly propagated plant species and the need for more studies regarding the safety of using it. A espécie Synadenium grantii Hook. f. é uma planta da família Euphorbiaceae, sendo conhecida popularmente como cega-olho, leitosinha, janaúba, cola-nota e outros. Há muitos anos é utilizada sob a forma de preparado do látex diluído (18 gotas/1 litro de água), para o tratamento de distúrbios gástricos, e de doenças neoplásicas. No entanto, não existem estudos científicos que comprovem esses efeitos, nem informações sobre a segurança de utilização dessa planta pelos seres humanos além de haver poucos estudos fitoquímicos sobre esta espécie. Assim, os objetivos deste trabalho foram realizar a triagem fitoquímica da espécie; determinar a toxicidade (CL50) do látex e extrato bruto em teste de letalidade com Artemia salina Leach; avaliar parâmetros bioquímicos (contagem de leucócitos; determinação de alanina-amino transferase (TGP), aspartato-amino transferase (TGO), albumina, creatinina e proteína C reativa) e toxicológicos (avaliar macroscopicamente os órgãos (fígado, baço, rins, pâncreas, útero, ovários, glândulas suprarrenais e estômago), frente a modelos experimentais com ratos Wistar e determinar a atividade antiulcerogênica, visando contribuir para incrementar o conhecimento popular e acadêmico acerca desta espécie. A triagem fitoquímica foi realizada com o extrato bruto hidroalcoólico do caule e com o látex, nos quais se constatou a presença de diversas classes de metabólitos secundários de interesse farmacológico, entre eles: cumarinas, taninos, antraquinonas, compostos saponificáveis e terpenos. Os testes de toxicidade frente a A. salina foram realizados utilizando o látex e o extrato bruto do caule nas concentrações de 10 - 0,05% (v/v) e 1000 - 1 μg/mL respectivamente. Os resultados encontrados demonstraram que, nas concentrações testadas, o látex apresenta toxicidade acentuada (CL50=26,58μg/mL) enquanto que o extrato bruto do caule demonstrou baixa toxicidade (CL50=778,66μg/mL). Nos testes de toxicidade aguda, pode-se determinar que na dose de 2,4g/kg (0,5 mL) o látex de S. grantii apresentou alterações bioquímicas frente os parâmetros TGO, TGP avaliados. Para a determinação da atividade antiulcerogênica foram utilizados ratos Wistar fêmeas adultas que sofreram indução de úlcera por dois modelos: etanol e indometacina. O látex apresentou efeito gastroprotetor frente aos dois modelos avaliados e com inibição na formação de úlceras em 90%, já o preparado do látex demonstrou uma inibição de 5,7% quando realizado o modelo do etanol para indução de úlcera. Os resultados obtidos nesse trabalho indicam a importância e a necessidade de estudos adicionais na busca de comprovação das atividades biológicas popularmente propagadas para esta espécie vegetal e a necessidade de mais estudos em relação à segurança de utilização desta.
- Published
- 2011
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