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La ganadería bovina es una de las actividades más importante en Colombia y especialmente en el departamento de Córdoba, desde el punto de vista económico, social y cultura, y representa una de las principales fuentes de suministro de alimentos. En el desarrollo de esta actividad se generan varios subproductos, como la bilis, que no presentan una disposición final adecuada y que además podrían ser aprovechados. La bilis está compuesta por diversas sustancias, donde se destacan los ácidos biliares, que han despertado interés debido a sus importantes propiedades biológicas y farmacológicas. En este trabajo de investigación, se extrajeron los ácidos biliares presentes en la bilis del ganado (Bos taurus), la cual fue suministrada por FRIGOCER-EXPOCOL S.A.S (Cereté – Córdoba), para su identificación química fueron derivatizados como sus ésteres metílicos y analizados mediante Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas (CG-EM). Adicionalmente, a los ácidos biliares extraídos se le evaluó su actividad bactericida frente a Staphylococcus aureus y Pseudomona aeruginosa por el método de microdilución, empleando concentraciones entre 4000 μg/mL – 250 μg/mL. El potencial antioxidante fue evaluado frente al radical DPPH a una concentración de 100 μg/mL. Los resultados mostraron la presencia de 3 ácidos biliares mayoritarios, los ácidos cólicos, ácido desoxicólico y ácido 7alfa-hidroxi-3-oxo-colan-24-oico, representando más del 50% de la mezcla total de estos ácidos. La inhibición del crecimiento bacteriano se alcanzó en su totalidad con los dos microorganismos evaluados, aún a la concentración más baja utilizada (250 μg/mL). La actividad antioxidante de los ácidos biliares frente al radical DPPH fue muy baja, presentándose un porcentaje de inhibición de 8.9% a la concentración utilizada. Los ácidos biliares son agentes con pocos reportes sobre el estudio químico y el potencial bactericida y antioxidante en nuestro territorito, con este estudio se pretende dar una mejor disposición final a los subproductos del sacrificio del ganado bovino generado en nuestro departamento, y abrir la puerta a futuras investigaciones sobre el aprovechamiento de estos productos considerados de desecho 1. Introducción..........................................................................................................................................................................................................................................................................................................3 2. Objetivos............................................................................................................................................................................................................................................................................................................5 2.1. Objetivo General........................................................................................................................................................................................................................................................................................5 2.2. Objetivos Específicos ............................................................................................................................................................................................................................................................................5 3. Marco Teórico.................................................................................................................................................................................................................................................................................................6 3.1. Actividad Ganadera en el Mundo..................................................................................................................................................................................................................................................6 3.2. Sector Ganadero en Colombia........................................................................................................................................................................................................................................................7 3.2.1. Actividad ganadera en departamento de Córdoba......................................................................................................................................................................................................8 3.3. Generalidades del Ganado Bovino (Bos taurus).................................................................................................................................................................................................................8 3.4. Bilis de Ganado Vacuno....................................................................................................................................................................................................................................................................10 3.4.1. Ácidos biliares........................................................................................................................................................................................................................................................................................12 3.4.2. Metabolismo de los Ácidos Biliares.......................................................................................................................................................................................................................................14 3.5. Funciones Fisiológicas de los Ácidos Biliares......................................................................................................................................................................................................................15 3.6. Actividad Antioxidante.......................................................................................................................................................................................................................................................................16 3.7. Actividad Antimicrobiana ................................................................................................................................................................................................................................................................17 4. Materiales y Metodología.....................................................................................................................................................................................................................................................................19 4.1. Etapa de Muestreo.................................................................................................................................................................................................................................................................................19 4.1.1. Área de recolección............................................................................................................................................................................................................................................................................19 4.1.2. Recolección de material biológico........................................................................................................................................................................................................................................20 4.2. Etapa de Laboratorio .........................................................................................................................................................................................................................................................................20 4.2.1. Materiales, Reactivos y equipos...............................................................................................................................................................................................................................................20 4.2.2. Extracción de ácidos biliares......................................................................................................................................................................................................................................................21 4.2.3. Obtención de ésteres metílicos de ácidos biliares.....................................................................................................................................................................................................23 4.2.4. Caracterización química..............................................................................................................................................................................................................................................................23 4.2.5. Evaluación de la actividad antioxidante...........................................................................................................................................................................................................................24 4.2.5.1. Método de radical DPPH• (2,2-difenil-1-picrilhidrazil)............................................................................................................................................................................................24 4.2.6. Evaluación de la actividad bactericida...............................................................................................................................................................................................................................25 4.2.6.1. Método por microdilución.......................................................................................................................................................................................................................................................26 4.3. Análisis Estadístico..............................................................................................................................................................................................................................................................................26 5. Resultados y Discusión de Resultados......................................................................................................................................................................................................................................27 5.1. Obtención de los Extractos de Ácidos Biliares...................................................................................................................................................................................................................27 5.2. Análisis Químico....................................................................................................................................................................................................................................................................................29 5.2.1. Pruebas químicas preliminares................................................................................................................................................................................................................................................29 5.2.2. Elucidación estructural de los compuestos mayoritarios presentes la mezcla de ácidos biliares.............................................................................................31 5.2.2.1. Identificación de compuestos mayoritarios obtenidos del extracto de bilis bovina por el método de extracción por solvente.......................31 5.2.2.2. Identificación de compuestos mayoritarios obtenidos del extracto de bilis bovina por el método de extracción por SPE...............................37 5.3. Evaluación de la Actividad Antioxidante..............................................................................................................................................................................................................................43 5.4. Evaluación de la Actividad Bactericida.................................................................................................................................................................................................................................44 6. Conclusiones...............................................................................................................................................................................................................................................................................................47 7. Bibliografía....................................................................................................................................................................................................................................................................................................48 8. Anexos..............................................................................................................................................................................................................................................................................................................57 Pregrado Químico(a) Trabajos de Investigación y/o Extensión

Entre los diferentes enfoques para controlar la carga microbiana en los sistemas alimentarios se encuentra la adición de compuestos antimicrobianos naturales como aceites esenciales, extractos de plantas o bacteriocinas. Generalmente está considerado que un determinado compuesto es biocida cuando a una cierta concentración es capaz de reducir en al menos 3 unidades logarítmicas la carga inicial de microrganismo. Nos debemos preguntar por tanto, ¿cómo podría saber si una molécula es biocida? Si te encuentras en esa situación, lo que necesitas determinar es la concentración mínima bactericida de ese compuesto. Para ayudarte a enfrentarte a este problema, en el presente artículo docente podrás revisar el concepto de concentración mínima bactericida (CMB) y las diferentes opciones que tienes para determinarla., El presente artículo docente es una guía para la determinación de la actividad bactericida de un antimicrobiano de origen natural. Tanto si estás realizando una práctica de laboratorio, un TFG, TFM, tesis doctoral o un trabajo de I+D para una industria, piensa en las condiciones de aplicación de tu antimicrobiano y partir de aquí lee con detenimiento el documento, tratando de trasladar la teoría a tu caso práctico.

SUMMARY Purpose: We present a new Colombian product researched and developed by Seven Scientific Foundation, which has been very useful for the removal of the carious tissue in patients who have used this innovative product. Methods: We used a chemical-mechanical removal of dental caries. This product is made with 10% papain which is the active principle and works as a debriding agent, as well as being a bacteriostatic, bactericidal and anti-inflammatory agent; and also contain dragon's blood (Croton lechleri) sap which is an effective as analgesic/anti-inflammatory and especially as a healing agent. In this article, we present a case study of a patient, whose dental carious tissue was removed, using the dental new product. Description of the case report: In this article, we present a case study of a patient, whose dental carious tissue has been removed, using the new dental product, therefore this innovative technique of removal of the atraumatic carious tissue. Conclusions: This method is useful as it is a minimally invasive technique, without requiring the use of local anesthesia, or the additional use of dental instruments. It is used in the Colombian population of all ages and does not generate side effects in people who have used it so far. RESUMEN Propósito: se investigó y desarrolló un nuevo producto dental el cual ha sido muy útil para la remoción del tejido carioso en los pacientes colombianos que han utilizado este innovador producto para la remoción químico-mecánica de las caries dentales. Métodos: Este producto está hecho a base de papaína al 10 % el cual es el principio activo y funciona como un agente debridante lo cual cicatriza el tejido removido, además de ser un agente bacteriostático, bactericida y antiinflamatorio. Descripción de reporte de caso: en este artículo se presenta un estudio de caso de un paciente al cual se le removió el tejido carioso dental. Conclusiones: Por lo tanto, esta técnica innovadora de remoción del tejido carioso atraumático resulta útil por ser una técnica mínimamente invasiva, sin requerir el uso de anestesia local al tejido afectado ni el uso adicional de instrumentos dentales. Se utiliza en la población colombiana de todas las edades y no genera efectos colaterales en las personas que lo han utilizado hasta el momento.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and antioxidant activity of the essential oil and the hydroalcoholic extract of O. vulgare. For the extraction of the oil, the hydrodistillation technique was used with a Clevenger type apparatus and the extract was obtained by the maceration process in 70% ethanol. Phytochemical tests were performed showing the chemical classes present in the extract and essential oil. The evaluation of antimicrobial activity was performed using the disk diffusion technique, using strains of Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella sp. (ATCC 14028) and Staphylococcus aureus (ATCC 25923). The minimum inhibitory concentration (MIC), for each of the strains, was determined using the broth microdilution technique. In the analysis of antioxidant activity, the ABTS radical discoloration technique was applied. The essential oil of O. vulgare showed activity against all tested strains, the hydroalcoholic extract inhibited the growth of E. coli and Salmonella sp, but did not show activity against S. aureus. In the results obtained by the microdilution technique S. aureus showed the highest sensitivity with a MIC value of 150 µg / mL. No activity of hydroalcoholic extracts was verified by the microdilution technique at the tested concentrations. The antioxidant activity of the extract and essential oil was evidenced, with the best results observed for the extract. El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antimicrobiana y antioxidante del aceite esencial y el extracto hidroalcohólico de O. vulgare. Para la extracción del aceite se utilizó la técnica de hidrodestilación con un aparato tipo Clevenger y el extracto se obtuvo mediante el proceso de maceración en etanol al 70%. Se realizaron pruebas fitoquímicas que muestran las clases químicas presentes en el extracto y el aceite esencial. La evaluación de la actividad antimicrobiana se realizó mediante la técnica de difusión en disco, utilizando cepas de Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella sp. (ATCC 14028) y Staphylococcus aureus (ATCC 25923). La concentración mínima inhibitoria (MIC), para cada una de las cepas, se determinó mediante la técnica de microdilución en caldo. En el análisis de la actividad antioxidante se aplicó la técnica de decoloración radical ABTS. El aceite esencial de O. vulgare mostró actividad contra todas las cepas ensayadas, el extracto hidroalcohólico inhibió el crecimiento de E. coli y Salmonella sp, pero no mostró actividad contra S. aureus. En los resultados obtenidos por la técnica de microdilución S. aureus mostró la mayor sensibilidad con un valor de CMI de 150 µg/mL. No se verificó actividad de los extractos hidroalcohólicos mediante la técnica de microdilución a las concentraciones probadas. Se evidenció la actividad antioxidante del extracto y del aceite esencial, observándose los mejores resultados para el extracto. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana e antioxidante do óleo essencial e do extrato hidroalcoólico de O. vulgare. Para a extração do óleo utilizou-se a técnica de hidrodestilação com um aparelho tipo Clevenger e o extrato foi obtido pelo processo de maceração em etanol 70%. Foram realizados testes fitoquímicos demostrando as classes químicas presente no extrato e no óleo essencial. A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada pela técnica de difusão de disco, sendo utilizadas as cepas de Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella sp. (ATCC 14028) e Staphylococcus aureus (ATCC 25923). A concentração inibitória mínima (CIM), para cada uma das cepas, foi determinada com a utilização da técnica de microdiluição em caldo. Na análise da atividade antioxidante aplicou-se a técnica de descoloração do radical ABTS. O óleo essencial de O. vulgare apresentou atividade frente a todas as cepas testadas, o extrato hidroalcoólico inibiu o crescimento de E. coli e Salmonella sp, porém não apresentou atividade frente a S. aureus. Nos resultados obtidos pela técnica de microdiluição S. aureus apresentou a maior sensibilidade com um valor da CIM de 150 mg/mL. Não foi verificada atividade dos extratos hidroalcoólicos pela técnica de microdiluição nas concentrações testadas. Foi evidenciada a atividade antioxidante do extrato e óleo essencial, sendo os melhores resultados observados para o extrato.

Para evaluar los potenciales beneficios del uso de microrreactores para la síntesis continua de nanopartículas metálicas, se seleccionó la producción de plata y cobre: AgNp y CuNp respectivamente, ambos metales con actividad bactericida y con potenciales aplicaciones en remediación y control ambiental.La tesis se organiza en 5 capítulos. En el primer capítulo, a modo de introducción, se presentan los temas a tratar. Se describe de manera general a la nanotecnología y la síntesis de nanomateriales. Se detallan los diferentes métodos de preparación de nanopartículas, introduciendo específicamente los sistemas de síntesis en continuo. Se presenta bibliografía sobre la síntesis y propiedades bactericidas de AgNp y CuNp, haciendo hincapié en la importancia de la aplicación de metodologías de síntesis compatibles con el ambiente.El Capítulo 2 puntualiza las metodologías utilizadas para la síntesis de AgNp y CuNp y se especifican los microrreactores utilizados. Se describen las diferentes técnicas de caracterización aplicadas para evaluar las nanopartículas obtenidas y se presenta el protocolo para la determinación de la actividad bactericida.El Capítulo 3 se basa particularmente en el estudio de la síntesis de AgNp. A partir de búsqueda bibliográfica se presenta un protocolo de síntesis compatible con el ambiente que emplea AgNO3 como sal precursora de Ag, glucosa como agente reductor y almidón como agente estabilizante. Se realiza un estudio comparativo de las síntesis en sistema discontinuo y continuo, analizando la influencia de la temperatura y relación de reactivos en la calidad y estabilidad de las nanopartículas obtenidas.El Capítulo 4 estudia diferentes métodos de síntesis de CuNp dividido en cuatro secciones. Cada una trata un protocolo de síntesis diferente seleccionados de la bibliografía. La primera sección se basa en la síntesis de CuNp en medio orgánico (dietilenglicol) a partir de CuSO4 como sal precursora, NaH2PO2 como agente reductor y bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB) y polivinilpirrolidona (PVP) como agentes protectores. La segunda, parte de un protocolo en medio acuoso que utiliza Cu(NO3)2 como precursor, N2H4 como reductor y PVP como estabilizante. La tercera sección plantea la síntesis de CuNp empleando CuCl2 y dopamina (DOPA) como reductor y agente protector. Y finalmente, la cuarta sección plantea el un protocolo con CuCl2 y ácido ascórbico (AA) como agente reductor y protector. En los cuatro casos se abordaron distintas modificaciones con el objetivo de realizar un estudio comparativo de las síntesis en discontinuo y continuo analizando diferentes variables.En el Capítulo 5 se aplica un diseño experimental para determinar los factores más influyentes sobre la síntesis de CuNp basada en el uso de AA como agente reductor. Las diferentes experiencias del diseño seleccionado se evalúan en sistema discontinuo. Luego, con la información obtenida se lleva a cabo la síntesis de CuNp en sistema continuo con flujo segmentado y de fase continua.En el Capítulo 6 se analiza la aplicación de las AgNp y las CuNp como bactericidas contra cultivos de Escherichia coli.Finalmente, en el Capítulo 7 se resumen las conclusiones más relevantes obtenidas durante la Tesis Doctoral en Química. Fil: Giorello, Antonella. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Investigaciones en Catálisis y Petroquímica "Ing. José Miguel Parera". Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Investigaciones en Catálisis y Petroquímica "Ing. José Miguel Parera"; Argentina

La actividad antibacteriana de los sueros de bovino y de búfalo fue evaluada in vitro de manera indirecta con dos reacciones de inmunohemólisis: (i) un ensayo de hemólisis-hemoaglutinación sobre eritrocitos no sensibilizados de conejo y (ii) un ensayo de cinética de eritrocitos no sensibilizados de conejo frente a concentraciones crecientes de suero. La actividad bactericida de los sueros fue evaluada in vitro cuantificando la reducción de desarrollo de un inóculo de Escherichia coli en medio de cultivo enriquecido con suero de ambas especies. En el ensayo de hemólisis-hemoaglutinación, la hemólisis máxima se observó hasta la dilución 1:16 del suero de ambas especies. El mayor porcentaje de hemólisis se obtuvo con el suero de búfalo (84,7 ± 9,71%) respecto del suero bovino (71,0 ± 5,05%). Sin embargo no se hallaron diferencias en las diluciones de suero necesarias para obtener el 50% de la hemólisis total, siendo estas de 10,2 ± 2,48 para el suero de bovinos y de 11,8 ± 2,18 para el suero de búfalo. El suero de búfalo redujo el desarrollo bacteriano en un 69,8% respecto del 47,2% obtenido por el suero de bovino. No obstante estos resultados, se necesitarán estudios adicionales para corroborar estos hallazgos in vivo. SUMMARY. Characterization and comparison of the antibacterial activity of buffalo and bovine sera. The antibacterial activity of serum of bovine and buffaloes was evaluated in vitro indirectly by two immunohemolysis assays: (i) an unsensitized rabbit blood cells hemolysis-hemagglutination assay and (ii) and a hemolytic-kinetic of unsensitized rabbit blood cells in function of increasing serum concentrations. The serum bactericidal activity was evaluated in vitro by quantifying the reduction of the development of an Escherichia coli inoculum in a culture medium enriched with serum of both species. In the hemolysis-hemagglutination assay, the máximum haemolysis was observed until a 1:16 serum dilution for both species. The highest percentage of hemolysis was obtained with buffalo serum (84.7 ± 9.71%) with respect to bovine serum (71.0 ± 5.05%). However, no differences were found in the serum dilutions necessary to obtain 50% of the total hemolysis, being these 10.2 ± 2.48 for the serum of cattle and 11.8 ± 2.18 for the serum of buffalo. Buffalo serum reduced bacterial growth by 69.8% compared to 47.2% obtained by bovine serum. Despite these results, additional studies will be needed to corroborate these findings in vivo.

Objective. Asses the effect of supplementation with Humic substances (HS) over some innate immunity parameters (serum bactericidal activity, phagocytosis, bacterial agglutination, respiratory burst and lisozyme activity) in phase after fasting of layer hens. Materials and methods. 120 posfasting phase Hy Line Brown layer hens were taken which were distributed into four groups: The first and the second were supplemented with 0.1 and 0.2% of HS, respectively. The third group was supplemented with 0.25 mg/kg on levamisole hydrochloride and fourth group have no supplementation; during sixty days period. Blood samples were collected on 8th, 30th and 60th of experiment day. Results. The phagocytic index and respiratory burst increased significantly at day 30th in HS supplemented groups. Alike, serum bactericidal activity and lisozyme activity improved on 8 th day, nevertheless, changes were no evident latter. The bacterial agglutination was high in supplemented groups evaluated at everyone times. Conclusions. Results showed that HS behave as immunostimulant in the early phase after fasting layer hens. Objetivos. Evaluar el efecto de las sustancias húmicas (SH) sobre algunos parámetros de la inmunidad innata (actividad bactericida del suero, fagocitosis, aglutinación bacteriana, explosión respiratoria y actividad de la lisozima) en la fase posmuda de gallinas ponedoras. Materiales y métodos. Se utilizaron 120 gallinas ponedoras Hy Line Brown en la fase de posmuda, las cuales fueron divididas en cuatro grupos: Los dos primeros fueron suplementados con 0.1 y 0.2% de SH respectivamente, el tercer grupo fue suplementado con 0.25 mg/kg de Clorhidrato de levamisol y el cuarto grupo control sin suplemento; durante un período de 60 días. Las muestras sanguíneas se tomaron los días 8, 30 y 60 del experimento. Resultados. El Índice fagocítico y la explosión respiratoria se incrementaron significativamente a partir del día 30 de suplementación con SH. De la misma manera, la actividad bactericida del suero y la actividad de la lisozima aumentaron al día 8; no obstante no se evidenciaron cambios posteriores. La aglutinación bacteriana fue significativamente mayor en los grupos suplementados en todos los tiempos evaluados. Conclusiones. Los resultados demuestran que las SH se comportan como agentes inmunoestimulantes en la fase temprana de la posmuda en gallinas ponedoras Hy Line Brown.

Assays for Legionella detection in water samples are one of the aspects included in the Spanish legislation on prevention of Legionnaires ́ disease. The frequency of these assays, laboratories that carry out them, and the required actions that derive from them, regarding colony counts, are included in the maintenance plans when Legionella prevention is carried out in water installations (Real Decree 865/2003). The comparison of our legislation with other legislations or recommendations adopted in other countries (United Kingdom, France, Australia, America) allows to know our degree of demand of some parameters. Bacteria culture is the gold standard method for Legionella detection in water samples, and and there are several normalized assays, such as ISO 11731/98 and 2004 or NF T 90-431/2003 (AFNOR). To help the interpretation of the results, Legionella assays should reflect the standard in which they are based and the limit of detection of the method, that should not be over 100 ufc/L. Moreover, laboratories that carry out these assays should be acredited by our national accreditation body (ENAC). In the last years, fast methods have been developed for Legionella detection based on the amplification of chromosomal DNA in water samples by PCR reactions. PCR assays should not be used alone, but it should be a complement of culture assays, when normative actions are implemented in water installations. Los ensayos para la determinación de Legionella en muestras de agua son uno de los aspectos contemplados en la legislación española sobre prevención de legionelosis. La periodicidad de estos ensayos en función del tipo de instalación, los laboratorios que los realizan, y las acciones correctoras que derivan de ellos en función de los recuentos bacterianos son acciones incluidas en los planes de mantenimiento preventivo de las instalaciones consideradas de riesgo (Real Decreto 865/2003). La comparación de nuestra legislación con otras legislaciones o recomendaciones adoptadas en otros paises (Reino Unido, Francia, Australia, América) permite conocer nuestro grado de exigencia en relación a algunos de los parámetros contemplados. El cultivo de la bacteria es el método de referencia para la detección de Legionella en muestras de agua y existen varios ensayos normalizados, como los estándares ISO 11731/98 y 2004 y NF T 90- 431/2003 (AFNOR). Para ayudar a la interpretación de los resultados, los ensayos deben reflejar el estándar en el que se basan y el límite de detección del método, que no debe ser superior a 100 ufc/L. Además, los laboratorios que realizan estos ensayos deben estar acreditados por nuestra entidad de acreditación ENAC. En los últimos años se han desarrollado métodos rápidos de detección de la bacteria basados en la amplificación de ADN cromosómico en muestras de agua mediante reacciones de PCR. El desarrollo científico de estos métodos va por delante del desarrollo reglamentario, y los ensayos de PCR no deben desplazar a los ensayos de cultivo en cumplimiento de las normativas vigentes, sino que deben complementarlo.

Objective: to evaluate the antimicrobial activity of an ethanolic propolis extract from Santander province against Enterococcus faecalis.Methods: an experimental In vitro study was made. Starting from pristine propolis collected in the city of Lebrija (Santander), an ethanolic extract was obtained using a Soxhlet apparatus. The antimicrobial activity was measured using the macro dilution tube technique by counting the Colony Forming Units (CFU) per mL after 48 hours. Propolis solutions with concentrations in the range from 100 to 0.19 mg/mL were evaluated. Tubes containing dilutions of the antibiotic norfloxacin and solvent (96% ethanol) were used as reference and control.Results: the propolis solutions within the range from 100 mg/mL to 50 mg/mL inhibited 100% growing of E. faecalis. Propolis extract showed an inhibitory concentration 50 (IC50) of 1.19 mg/mL and an inhibitory concentration 90 (IC90) of 7.92 mg/mL respectively. Norfloxacin on the other hand was more effective with IC50 and IC90 of 0.06 and 2.39 µg/mL respectively. Ethanol showed non-antimicrobial activity at the concentration present within the extracts.Conclusion: with further studies support it would be possible to suggest the use of propolis from Santander as an alternative of irrigation and medication in endodontics because of its powerful effect against E. faecalis considering it is the most frequent pathogen found in persistent infections. Objetivo: evaluar la actividad antimicrobiana de un extracto etanólico de propóleo de Santander sobre Enterococcus faecalis.Materiales y métodos: se realizó un estudio experimental In vitro. A partir de un propóleo crudo del municipio de Lebrija (Santander), se obtuvo un extracto etanólico a través del método Soxhlet. La actividad antimicrobiana se determinó con una prueba de macrodilución en tubo y recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) por mL luego de 48 horas. Se evaluaron concentraciones de propóleo desde 100 hasta 0,19 mg/mL, como control se incluyeron diluciones del disolvente (etanol 96%) y se usó como medicamento de referencia la norfloxacina.Resultados: se determinó que concentraciones de propóleo de 100 mg/mL y 50 mg/mL inhibieron 100% de crecimiento de E. faecalis. El extracto de propóleo mostró Concentración Inhibitoria 50 (CI50) de 1,19 mg/mL y Concentración Inhibitoria 90 (CI90) de 7,92 mg/mL. Mientras que la norfloxacina fue más efectiva con CI50 y CI90 de 0,06 y 2,39 µg/mL. El etanol no mostró efecto antimicrobiano a las concentraciones presentes en el extracto.Conclusión: con el apoyo de estudios complementarios, es posible proponer al propóleo santandereano como una alternativa de irrigación y medicación en endodoncia, dado el potente efecto frente a E. faecalis siendo este el patógeno endodóntico más frecuente en infecciones persistentes.[Herrera LV, Piscioti MH, Ramos O, Neira LF, Pinzón JR, Herrera AV, Soto JA. Actividad antimicrobiana In Vitro de un propóleo de Santander sobre Enterococcus faecalis. Ustasalud 2012; 11: 73 - 78]

Fil: García Denegri, María Emilia. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Bustillo, Soledad. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agrimensura; Argentina. Fil: Romero Vargas, F. Universidad de Campinas. Instituto de Biología; Brasil. Fil: Leiva, Laura Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agrimensura; Argentina. Fil: Acosta, Ofelia Cristina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. El objetivo del trabajo fue evaluar actividades farmaco­lógicas (citotóxica, bactericida, agregante plaquetaria) y factores que afectan la actividad/ estabilidad de la fosfolipasa A2 (PLA2) aislada del veneno de Bothrops alternatus. Se utiliza­ron mioblastos/miotúbulos murinos (C2C12) y cepas bacterianas de Staphylococcus aureus (cepa ATCC 25923) y Escherichia coli (cepa ATCC 25922) para valorar respectivamente su acción miotóxica (in vitro) y bactericida, como así también líneas celulares epiteliales ma­marias normales (NMuMG) y tumorales (LM3) para detectar su posible aplicación en terapia oncológica. Con el fin de evaluar la acción inhibitoria de la PLA2 aislada sobre la agregación plaquetaria se empleó plasma rico en plaquetas y trombina como inductor fisiológico. Por último, se registraron los cambios en la actividad y estabilidad de la PLA2 a diferentes tem­peraturas (4-90ºC) mediante ensayo cinético, en tanto que, por hemólisis radial indirecta se hizo lo mismo para evaluar efecto del pH (2,5-10). La PLA2 mostró una acción inhibitoria so­bre la agregación plaquetaria dosis-dependiente. Presentó una alta estabilidad estructural al ser sometida a condiciones extremas de pH y temperatura durante varias horas, conservando la actividad catalítica prácticamente invariable. En cambio, cuando PLA2 fue evaluada sobre las diferentes líneas celulares, no produjo citotoxicidad (aún a dosis elevadas) ni efecto bac­tericida sobre las cepas utilizadas. Estos hallazgos amplían la caracterización de la enzima, una de las más abundantes del paquete proteico del veneno total de B. alternatus del nordeste argentino. A la vez, la inocuidad y estabilidad detectadas, permiten proponer a esta enzima como un inmunógeno alternativo en la producción de sueros antiofídicos. The aim of this work was to evaluate the pharmacological activities (citotoxicity, bactericidal, platelet aggregation) and the changes in the activity/stability of the isolated phospholipase A2 (PLA2 ) from Bothrops alternatus venom. In order to elucidate myotoxic and bactericidal activities, murine mioblast /miotubules (C2C12) and strains of Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Escherichia coli (ATCC 25922) were used, respectively. Also, normal mammary epithelial cell culture (NMuMG) and tumoral type (LM3) were tested for a possible role in oncological therapy. With the purpose of studying the inhibitory effect of the PLA2 on platelet aggregation, washed human platelet and thrombin as physiological inductor, were used. Finally, changes in the activity and stability of the isolated PLA2 at different temperatures (4-90ºC) by kinetic assays were recorded; while the enzyme was subjected to radial indirect hemolysis to evaluate the effect of different pH (2.5-10). The PLA2 presented dose-dependent inhibitory effect on thrombin-induced platelet aggregation. Also, it showed high structural stability when exposed to extreme conditions of temperature and pH during several hours, and catalytic activity remained almost unchanged. Nevertheless, this enzyme tested on different cells cultures did not induce cytotoxic (even at high doses) or bactericidal activities. These findings have a scientific value for toxicology since they expand the knowledge of the characterization (biological, biochemical and structural aspects) of one of the most abundant enzyme (PLA2 Ba SpII RP4) from the protein package of B. alternatus snake venom from the northeast of Argentina. Likewise, the confirmed safety and stability of this PLA2 strongly suggest that it could be proposed as an alternative immunogen for the antiserum production against Bothrops snake venom.

Lippia alba (Mill) N.E. Brown es una planta medicinal conocida en Colombia como "prontoalivio" y que se emplea para el tratamiento de múltiples dolencias gastrointestinales. El aceite esencial, los extractos acuosos y alcohólicos obtenidos de la planta han mostrado poder antibacteriano, antiviral, antiparasitario y antimicótico. En el presente estudio, se determinó el efecto antibacteriano in vitro del extracto acuoso de las hojas de Lippia alba contra tres aislados de Helicobacter pylori. Se requieren estudios adicionales que permitan establecer el potencial uso clínico del extracto acuoso en combinación con los tratamientos antibióticos. Lippia alba (Mill) N.E. Brown is a medicinal plant known in Colombia as "prontoalivio" (= fast relief). It is used for the treatment of multiple gastro-intestinal ailments. The essential oil, the aqueous and alcoholic extracts obtained from the plant have demonstrated antibacterial, antiviral, anti-parasitic and antimycotic power. In the current in vitro study of the aqueous extracts from Lippia alba leaves against three isolated Helicobacter pylori cultures, it was determined that there was an antibacterial effect. There are needed additional studies that allow to establish the potential clinical use of the aqueous extracts in combination with the antibiotic treatment.

En este trabajo se evaluó la actividad bactericida y se determinó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) del extracto etanólico y del aceite esencial de hojas de Rosmarinus officinalis L. sobre microorganismos de interés alimentario: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus y Lactobacillus plantarum. El aceite esencial exhibió un amplio espectro de acción antimicrobiana tanto para bacterias Gram positivas como Gram negativas con CIM entre 512 - 4096 ppm. El extracto etanólico mostró actividad antimicrobiana contra las bacterias S. sonnei, S. typhimurium y L. monocytogenes con CIM de 1024 ppm. La nisina, utilizada como control positivo, ocasionó una inhibición del crecimiento de todas las bacterias evaluadas con CIMs entre 2 y 1024 ppm, mientras que los conservantes usados comúnmente en la industria de alimentos presentaron una actividad antimicrobiana menor que la encontrada con el aceite esencial de R. officinalis. This work evaluated the bactericidal activity and determinated the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of ethanolic extract and essential oil from Rosmarinus officinalis L. leaves on microorganisms of interest in food industry: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus and Lactobacillus plantarum. The essential oil showed a broad spectrum of antimicrobial action for both Gram positive and Gram negative bacteria with MICs between 512 - 4096 ppm. The ethanolic extract showed antimicrobial activity against S. sonnei, S. typhimurium and L. monocytogenes with a MIC of 1024 ppm. Nisin was used as positive control and showed a strong growth inhibition of all bacteria tested with MICs between 2 and 1024 ppm. Our result shows that preservatives commonly used in the food industry have lower antimicrobial activity than those found in essential oil from R. officinalis L. leaves.

En el presente trabajo planteamos la evaluación de la actividad bactericida en suero de pacientes que reciben diferentes moléculas farmacéuticas de un antibiótico (piperacilina tazobactam) empleado en el tratamiento de enfermedades infecciosas, para lo cual se diseño un estudio es observacional analítico tipo corte trasversal. La población esta conformada por los pacientes hospitalizados en diferentes IPS de Bogotá adscritas a GREBO, que se encuentren bajo tratamiento endovenoso con Piperacilina tazobactam por sospecha o diagnostico de un proceso infeccioso. La muestra estará constituida por los primeros 15 pacientes por molécula de estudio (8 moléculas no innovadoras y una innovadora), que cumplan con los criterios de inclusión y exclusión planteados. Se registrarán las variables relacionadas con el hospedero y la patología infecciosa en tratamiento y a cada paciente se le tomaran muestras secuenciales de sangre al cabo del cuarto día de tratamiento para: 1. Establecer el comportamiento farmacocinético de las moléculas estudiadas, empleando la técnica de evaluación de actividad microbiológica en agar 2. Determinar la curva de actividad bactericida in vitro y sérica mediante el método de microdilución. Por último, para conocer el equivalente en potencia por vial (ampolla antibiótico), se evaluará la concentración del antimicrobiano mediante la técnica de actividad microbiológica en agar. Los ensayos se realizaran en el laboratorio de microbiología, Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias de la UN, empleando metodologías previamente estandarizadas y validadas. Para establecer la precisión de los resultados se realizaran 5 mediciones por cada muestra evaluada, así mismo las muestras serán codificadas para asegurar el cegamiento. El análisis de resultados empleará estadística descriptiva no paramétrica de las variables. / Abstract. This paper proposes the evaluation of bactericidal activity in serum of patients receiving different pharmaceutical molecules of an antibiotic (Piperacillin Tazobactam) used in the treatment of infectious diseases, for which we designed a Study Analytical Observational Transverse Sections. The population is made up of different patients hospitalized in IPS of Bogotá linked to GREBO, who are under treatment with intravenous piperacillin tazobactam on suspicion or diagnosis of an infectious process. The sample will be made up of the first 15 patients per molecule of study (8 molecules not innovative and 1 innovative), who meet the criteria of inclusion and exclusion faced. Recordings will be done for the variables related to the host and infectious disease treatment and each patient will be subject to sequential blood samples taken after the fourth day of treatment for the following: 1. To establish the pharmacokinetic behavior of the molecules studied, using the evaluation technique of microbiological activity in agar. 2. To determine the bactericidal activity curve in vitro and serum using the micro dilution method. Finally, to find the equivalent in potency per vial (ampoule antibiotic), will assess the concentration of the antimicrobial through the technique of microbiological activity in agar. The tests will be performed in the microbiology laboratory, Department of Pharmacy, Faculty of Sciences of the UN, using previously standardized and validated methodologies. To establish the accuracy of the results there will be 5 measurements performed for each sample tested, likewise the samples will be coded to ensure blinding. The analysis of results will use nonparametric descriptive statistics of variables. Otra

Introducción Los probióticos son microorganismos vivos con gran capacidad antagónica contra otros microorganismos, es por esto el marcado interés para ser utilizado como bioconservantes naturales, disminuyendo en parte el uso de conservantes químicos en alimentos. Objetivo Determinar el efecto bactericida del extracto crudo del L.cassei nativo sobre el crecimiento in Vitro de bacterias patógenas como E.coli. Materiales y métodos. El extracto crudo se obtuvo cultivando el microorganismo en 20 ml de caldo MRS a 37°C por 72h anaeróbicmente. Los ensayos se realizaron en tres tiempos: 5, 10 y 15 días, el método utilizado para detectar la actividad del extracto fue el ensayo de difusión en pozos, el que presentara un halo de inhibición superior a 2mm se consideraba con actividad. Los resultados encontrados se compararon con los de una cepa de Lactobacillus plantarum de uso comercial con actividad bactericida frente a Escherichia coli. Resultados. Se encontró que L.cassei presentó actividad antagónica contra E.coli, pues la zonas de inhibición leídas como variable de respuesta fueron mayores de 2mm hasta en la dilucion10-3 en los tres ensayos realizados en el tiempo, sin embargo en el día 15 la actividad bactericida del extracto disminuye considerablemente con respecto a la del día 5. Los análisis de Unidades de Actividad mostraron que el extracto de este aislado es activo aun en diluciones altas, lo cual significa que los extractos tiene actividad aun a muy pequeñas concentraciones. Conclusión. El aislado nativo de L.cassei produce sustancias antimicrobianas contra bacterias Gram negativa como E.coli pudiendo utilizarse probablemente como un bioconservante natural en alimentos. Introduction. Probiotics are living microorganisms with a great capacity against other microorganisms, this is why there is an interest in using them as natural bio-preservatives, reducing partially the use of chemical preservatives in food. Objective. To determine the bactericide effect of the raw extract of native L. cassei on the in Vitro growth of pathogenic bacteria, such as E.coli. Materials and methods. The raw extract was obtained by cultivating the microorganism in 20 ml of MRS breeding ground at 37°C Turing 72 h, anaerobically. The experiments were done in three periods of time: 5, 10 and 15 days. The method used to detect the activity of the extract was the experiment of diffusion in wells. Those that represented an inhibition halo above 2mm were considered as active. The results found were compared with those from a strain of Lactobacillus plantarum of for commercial use with a bactericide activity against Escherichia coli. Results. L.cassei represented hostile activity against E.coli, because the inhibition zones read as response variable were higher than 2mm until getting the 10-3 dilution in the three experiments made. However, on day 15 the bactericide activity of the extract was considerably reduced when compared to that from day 5. The analysis of activity units showed that the extract from this isolated is active even in high dilutions, which means that the extracts are active even at very low concentrations. Conclusion. The native isolated of L.cassei produces antimicrobials against Gram negative bacteria, such as E.coli, being available for their possible use as natural bio preservatives in food. Introdução. Os probióticos são microorganismos vivos com grande capacidade antagônica contra outros microorganismos, é por isto o marcado interesse para ser utilizado como bio-conservantes naturais, diminuindo em parte o uso de conservantes químicos em alimentos. Objetivo. Determinar o efeito bactericida do extrato cru do L.cassei nativo sobre o crescimento in vitro de bactérias patogênicas como E.coli. Materiais e métodos. O extrato cru se obteve cultivando o microorganismo em 20 ml de caldo MRS a 37°C por 72h anaerobicamente. Os ensaios se realizaram em três tempos: 5, 10 e 15 dias, o método utilizado para detectar a atividade do extrato foi o ensaio de difusão em poços, o que apresentasse um halo de inibição superior a 2mm se considerava com atividade. Os resultados encontrados se compararam com os de uma cepa de Lactobacilus plantarum de uso comercial com atividade bactericida frente a Escherichia coli. Resultados. Encontrou-se que L.cassei apresentou atividade antagônica contra E.coli, pois a zonas de inibição lidas como variável de resposta foram maiores de 2mm até na dilucion10-3 nos três ensaios realizados no tempo, no entanto no dia 15 a atividade bactericida do extrato diminui consideravelmente com respeito à do dia 5. As análises de Unidades de Atividade mostraram que o extrato deste isolado é ativo ainda em diluições altas, o qual significa que os extratos tem atividade ainda a muito pequenas concentrações. Conclusão. O isolado nativo de L.cassei produz substâncias antimicrobianas contra bactérias Gram negativa como E.coli podendo utilizar-se provavelmente como um bio-conservante natural em alimentos.

En esta investigación se trabajó con dos cepas nativas de Lactobacillus plantarum y Lactobacillus brevis, aisladas de productos fermentados; estas crecen en medios de cultivo y producen un extracto complejo de ácidos orgánicos y péptidos con actividad bactericida. Los extractos de estas cepas mostraron capacidad bactericida frente a Salmonella sp. y Escherichia coli. Los ensayos para determinar su acción se realizaron con el extracto crudo y centrifugado provenientes de cada una de las cepas, a diferentes tiempos de almacenamiento, temperatura y pH. Se observó una mejor actividad antibacteriana y estabilidad de la actividad, en el extracto crudo almacenado a temperatura de 0°C y 4°C. A pH 5.5 se presento la mejor actividad en los dos extractos frente a las cepas de estudio. Se concluyó que los extractos sintetizados por ambas cepas tienen un alto potencial bactericida contra estas dos patógenos que son responsables de toxi-infecciones alimentarias. In this investigation, two native stocks of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus brevis isolated from fermented products were studied; these grow in culture media and produce a complex extract of organic acids and peptides with bactericidal activity. The extracts of these stocks showed bactericidal capacity with Salmonella sp. and Escherichia coli. The tests to determine their action were made with crude and centrifuged extract originating of each one of the stocks, with different storage times, temperatures and pHs. A superior antibacterial activity and stability of the activity was observed in the crude extract stored in temperatures of 0°C and 4°C. With pH 5,5 the best activity of the two extracts against the study stocks was obtained. It is concluded that the extracts synthesized by both stocks have a high bactericidal potential against these two pathogens that are responsible for nutritional toxi-infections.

Searching for new solutions for disinfection OX-CTA researches and develops effective products and accurate application protocols improving those traditionally and widely spread.According to the results OX products, based on peroxides, are a good solution to treat and prevent Legionella pneumophila in comparison with the widely used hypochlorite. OX-CTA en la búsqueda de alternativas para desinfección investiga y desarrolla productos eficaces y protocolos de aplicación correctos mejorando los ya utilizados e incluso ampliamente extendidos.Según los resultados obtenidos los productos OX, basados en peróxidos son una buena alternativa para el tratamiento de Legionella pneumophila frente a la utilización del hipoclorito sódico ampliamente utilizado.

RESUMEN La región tropical es muy rica en especies vegetales y animales, muchas de ellas con potenciales aplicaciones aún desconocidas para la ciencia a pesar del uso tradicional que se les a dado a través de los siglos. En este estudio se realizó una evaluación de la actividad antibacteriana y fungicida presente en las plantas: Plantago australis Lam. (llantén); Petiveria alliacea L. (mapurite); Mangifera indica L. (mango); Luffa cylindrica (L.) Roem. (esponjilla); Psidium guineense Sw. (guayabo agrio) y Phthirusa sp. (pajarito); sobre las cepas microbianas Escherichia coli enterotoxigénica, Escherichia coli enteroinvasiva y Escherichia coli enteropatógena; Klebsiella pneumoniae; Candida krusei y Candida albicans. Los resultados indican que el extracto de Mangifera indica presentó la mayor actividad fungicida y bactericida, seguido del extracto de Psidium guineense Sw. ABSTRACT Tropical regions are very rich in animal and plant species, many of them with unknown potential applications for Science, although traditional uses for centuries. We have performed an evaluation of the fungicide and bactericide activity found in the following plants: Plantago australis Lam. (llantén); Petiveria alliacea L. (mapurite); Mangifera indica L. (mango); Luffa cylindrica (L.) Roem. (esponjilla); Psidium guineense Sw. (guayabo agrio) y Phthirusa sp. (pajarito); on strands of microorganism Escherichia coli enterotoxigenic, Escherichia coli enteroinvasiv and Escherichia coli enteropatogenic; Klebsiella pneumoniae; Candida krusei and Candida albicans. The results showed that the higher fungicide and bactericide activity was found in Manguifera indica extract, followed for the extract of Psidium guineense Sw.