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O metabolismo de fármacos visa transformá-lo em um intermediário com menor atividade e fácil de ser excretado. Dentre os diversos sistemas enzimáticos responsáveis por esse processo, destaca-se o citocromo P450. Este sistema oxidativo compreende 57 genes que codificam enzimas, sendo as mais importantes as CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP3A4 e CYP3A5 que, conforme o polimorfismo presente, pode aumentar ou reduzir esta metabolização. Já é observado que em certas populações, respostas anormais a medicamentos se dão devido a uma variabilidade na farmacocinética que é totalmente ligada aos genes do citocromo P450. Com o desenvolvimento da biologia molecular, o uso de biomarcadores genéticos vem aparecendo como uma ferramenta a mais para prever o comportamento individual de um paciente, frente às opções terapêuticas. É necessário estudar estes determinantes genéticos para poder identificar novos alvos terapêuticos. Porém, no Brasil há alguns fatores que impedem este processo como a miscigenação da população e testes genéticos onerosos.

Resumen Introducción. El citocromo CYP2C9 metaboliza, aproximadamente, el 15 % de los fármacos prescritos. Su gen presenta alelos cuyas frecuencias difieren entre grupos étnicos y poblaciones. Los alelos CYP2C9*2 y CYP2C9*3 dan cuenta de una enzima con actividad disminuida cuya frecuencia no ha sido determinada en la población mestiza peruana. Objetivo. Caracterizar la frecuencia de las variantes *2 (rs1799853) y *3 (rs1057910) del gen CYP2C9 en muestras de población mestiza peruana provenientes de Lima, Tacna y Junín. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo, observacional y prospectivo, con muestreo no probabilístico, por conveniencia e incidental. Se incluyeron 218 sujetos según los criterios de inclusión y exclusión; todos los participantes otorgaron su consentimiento informado. El ADN genómico se obtuvo mediante hisopado de mucosa oral, y la detección de los genotipos para los alelos CYP2C9*2 y CYP2C9*3 se hizo mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real, utilizando sondas TaqMan™. Resultados. Las variantes de CYP2C9*2 y CYP2C9*3 están presentes en la población mestiza peruana con frecuencias de 0,046 y 0,062, respectivamente. El análisis de las frecuencias genotípicas observadas permitió predecir que la frecuencia de fenotipos metabolismo intermedio sería del 15,13 % (CYP2C9*1/*2: 5,96 %; CYP2C9*1/*3: 9,17 %), y la de fenotipos de metabolismo lento, del 3,22 % (CYP2C9*2/*2: 1,38 %; CYP2C9*3/*3: 1,38 %; CYP2C9*2/*3: 0,46 %). Conclusiones. Se lograron determinar las frecuencias genotípicas y alélicas para las variantes *2 y *3 del gen CYP2C9 en una muestra no probabilística de población mestiza peruana. Las frecuencias obtenidas (0,046 y 0,062, respectivamente) están entre las esperadas para una población mestiza sudamericana con ascendencia amerindia, europea, africana y asiática. Abstract Introduction: CYP2C9 metabolizes approximately 15% of the prescribed drugs. Its gene has alleles whose frequencies differ between ethnic groups and populations. The alleles CYP2C9*2 and CYP2C9*3 account for an enzyme with decreased activity and their frequencies have not been determined in the Peruvian mestizo population. Objective: To characterize the frequencies of the allelic variants *2 (rs1799853) and *3 (rs1057910) of CYP2C9 gen in the Peruvian mestizo population from Lima, Tacna y Junín. Materials and methods: We conducted an observational, prospective cross-sectional study with non-probabilistic, by convenience, and incidental sampling. We included 218 subjects according to the inclusion and exclusion criteria, all of whom had signed the informed consent. We obtained the genomic DNA from oral mucosa swab. For the detection of the CYP2C9*2 and CYP2C9*3 genotypes, we used real-time-polymerase chain reaction with TaqMan® probes. Results: The genotyping revealed that CYP2C9*2 and CYP2C9*3 variants have low frequencies (0.046 and 0.062, respectively). The frequency of intermediate metabolizers was 15.13% (CYP2C9*1/*2: 5.96%; CYP2C9*1/*3: 9.17%) and that of slow metabolizers was 3.22% (CYP2C9*2/*2: 1.38%; CYP2C9*3/*3: 1.38%; CYP2C9*2/*3: 0.46%). Conclusions: It was possible to determine the genotypic and allelic frequencies for the variants *2 and *3 of the CYP2C9 gene in a non-probabilistic sample of the Peruvian mestizo population. The frequencies obtained (0.046 and 0.062, respectively) corresponded to those expected for a South American mestizo population with Amerindian, European, African and Asian ancestry.

[ES] Dividida en cuatro artículos, en el primero de ellos se centra en un trabajo de revisión bibliográfica que nos acerca al tema a tratar desde lo más general a lo más concreto. El segundo artículo consiste en la descripción de un caso clínico que expone la realidad del tema a investigar. El tercer artículo es un extenso trabajo en el campo de la investigación del tema a tratar. Por último, el cuarto artículo es un trabajo en el que se intenta aplicar los resultados de la investigación anterior en la práctica clínica., [EN] Divided into four articles, the first of them focuses on a review of the literature on the topic we treat from the general to more specific. The second article is the description of a case that exposes the reality of the research topic. The third article is an extensive work in the field of research about the topic. Finally, the fourth article is a work which tries to apply the results of previous research in clinical practice.

[ES]El dolor agudo postoperatorio es una de las complicaciones más frecuentes en Cirugía Mayor Ambulatoria, constituyendo un problema de considerable incidencia desde el postoperatorio inmediato hasta la recuperación tardía en el domicilio. Se ha demostrado que el mal control del dolor postoperatorio, incrementa la necesidad de personal sanitario y disminuye el flujo de pacientes, aumentando los costes y disminuyendo la eficacia del sistema. El analgésico ideal para la CMA, debería reunir las siguientes condiciones: cómoda dosificación oral y parenteral; rápida respuesta analgésica; buena tolerancia gastrointestinal; no interacción con fármacos habituales del período postoperatorio; y que permita disminuir la dosis de opioides y con ello sus efectos secundarios. La combinación óptima será aquella que proporcione la mejor relación entre analgesia y efectos secundarios. La combinación paracetamol-AINE presenta un eficacia analgésica superior a la del AINE solo, sin aumentar el número de efectos secundarios. Asimismo cuando se asocia el paracetamol a un opioide mejora a eficacia analgésica y permite reducir la dosis de opioide. Asociaciones de analgésicos no opioides (paracetamol, AINE) y opioides (codeína, tramadol) presentan menor riesgo de efectos indeseables, y combinados con técnicas de anestesia regional tienen gran aceptación en cirugía sin ingreso. La combinación de tramadol y paracetamol en dosis fijas es una alternativa atractiva para el tratamiento del dolor moderado a grave, presentando ventajas como menor incidencia de eventos adversos y mayor comodidad posológica. Su acción es rápida y prolongada, ya que el paracetamol se absorbe antes y provee de analgesia inicial, y el tramadol, con una vida media más prolongada, provee analgesia más duradera. La Farmacogenética es la ciencia que se ocupa del estudio de los factores genéticos que influyen en la variabilidad interindividual en la respuesta farmacológica, tanto en la eficacia como en la tolerancia. Dentro de estas variaciones se incluyen los polimorfismos de un sólo nucleótido (Single Nucleotide Polymorphism o SNP), inserciones o deleciones que pueden incluir el gen completo, y repeticiones. La forma más común de todas es la sustitución de una base o SNP. El tramadol se metaboliza en el hígado, en la fase I dependiente del Citocromo P450 se forma el mono-O-desmetiltramadol (metabolito activo) y en la fase II por desmetilación, glucoronización y sulfatación produciendo metabolitos inactivos. El paracetamol una cuarta parte de la dosis experimenta en el hígado un metabolismo de primer paso. También es metabolizada en el hígado la mayor parte de la dosis terapéutica, produciéndose conjugados glucurónicos y sulfatos, que son posteriormente eliminados en la orina. Entre un 10-15% de la dosis experimenta un metabolismo oxidativo mediante las isoenzimas de citrocromo P450, siendo posteriormente conjugado con cisteína y ácido mercaptúrico.

Introducción. CYP2C9 metaboliza aproximadamente un 15% de los fármacos prescritos. Su gen presenta alelos cuyas frecuencias difieren entre grupos étnicos y/o poblaciones. Los alelos CYP2C9*2 y CYP2C9*3, dan cuenta de una enzima con actividad disminuida, y no ha sido determinada su frecuencia en población mestiza peruana. Objetivo. Caracterizar la frecuencia de las variantes *2 (rs1799853) y *3 (rs1057910) del gen CYP2C9 en muestras de población mestiza peruana provenientes de las ciudades de Lima, Tacna y Junín. Revisado por pares

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz A infertilidade é um problema de saúde pública que afeta cerca de 16% dos casais em todo o mundo. Associado a este problema de saúde surgem outros a nível psicológico como a ansiedade e a depressão. O tratamento da infertilidade torna-se bastante complexo, uma vez que a fisiopatologia pode afetar desde o sistema endócrino até aos órgãos do sistema reprodutor. Uma vez que este problema de saúde afeta tanto homens como mulheres, os fatores que afetam cada um dos géneros são diferentes. Na mulher a infertilidade pode ter como etiologia os fatores hormonais, ovulatórios e anatómicos, onde se inclui a endometriose. Nos homens a infertilidade pode ser devida a alterações nos espermatozoides, fatores hormonais e anatómicos, como o varicocelo. Os fatores anatómicos podem ser corrigidos através de procedimentos cirúrgicos enquanto que os fatores hormonais são, normalmente, tratados com terapêuticas farmacológicas. Dependendo da causa da infertilidade e do caso clínico podem ser considerados procedimentos de Reprodução Medicamente Assistida, como a FIV e ICSI. O passo inicial destas técnicas é a estimulação ovárica controlada. A resposta à estimulação ovárica controlada pode variar dependendo do perfil genético de cada mulher. Desta forma, pretende-se que a farmacogenética preveja a resposta de cada mulher ao tratamento, minimizando os efeitos secundários e adaptando cada tratamento ao seu perfil genético. Os polimorfismos nos genes que podem afetar a resposta à estimulação ovárica encontram-se no gene do Recetor da Hormona Folículo-estimulante, da Subunidade Beta da Hormona Luteinizante, do Recetor da Hormona Luteinizante / Gonadotrofina Coriónica Humana, na Proteína de Transporte das Hormonas Sexuais, no Recetor de Estrogénio, no Recetor da Hormona Antimulleriana e nos genes que codificam para as enzimas de metabolização de fase I, Citocromo P450, CYP19 e CYP2D6. Infertility is a public health problem that affects about 16% of couples worldwide. Associated with this health problem arise psychological problems such as anxiety and depression. The treatment of infertility becomes quite complex, since the pathophysiology can affect from the endocrine system to the organs of the reproductive system. Since this health problem affects both men and women, the factors that affect each gender are different. In women, infertility can be explained by hormonal, ovulatory and anatomical factors, including endometriosis. In men infertility may be due to changes in sperm, hormonal and anatomical factors, such as varicocele. Anatomical factors can be corrected through surgical procedures whereas hormonal factors are usually treated with pharmacological therapies. Depending on the cause of infertility and the clinical case, Medically Assisted Reproduction procedures such as IVF and ICSI may be considered. The initial step of these techniques is controlled ovarian stimulation. The response to controlled ovarian stimulation may vary depending on the genetic profile of each woman. In this way, pharmacogenetics is expected to predict each woman's response to treatment, minimizing side effects and adapting each treatment to her genetic profile. Polymorphisms in genes that may affect the response to ovarian stimulation are in the Follicle-stimulating hormone receptor, in the Luteinizing Hormone beta-Subunit, in the Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor, in Sex Hormone-Binding Globulin, in the Estrogen Receptors, Antimullerian Hormone Receptor and in the genes that code for the enzymes of phase I metabolism, Cytochrome P450, CYP19 and CYP2D6. Keywords: Pharmacogenetics

Objetivo: Correlacionar el perfil genético de los genes TPMT y NUDT15 con los efectos secundarios del tratamiento en pacientes pediátricos con Leucemia Linfoide Aguda que se encuentren en tratamiento de mantenimiento en la Fundación HOMI Hospital de la Misericordia durante el 2017. Métodos: estudio observacional analítico, de corte longitudinal, en el que se determinaron los genotipos de los genes TPMT y NUDT15 mediante PCR de discriminación alélica con sondas TaqMan® a 70 pacientes que durante el 2017 se encontraban recibiendo quimioterapia en fase de mantenimiento en la Unidad de Oncohematología Pediátrica del Hospital de la Misericordia. Resultados: un total de 70 pacientes fueron incluidos en el presente estudio, de estos, se logró realizar los análisis genéticos para NUDT15 y TPMT (rs1800462 y rs1800460) a 68 pacientes, en tanto que para el polimorfismo rs1142345 del gen TPMT, se logró la tipificación en 42 pacientes. 4 pacientes fueron heterocigotos para la variante mutada de NUDT15, igual número de pacientes fueron heterocigotos para rs1800462 y rs1142345 de TPMT, en tanto que para rs1800460 se identificó a 6 pacientes heterocigotos. No se identificó ninguna asociación estadísticamente significativa entre las variantes genéticas y los desenlaces de interés. Conclusiones: las variantes genéticas de NUDT15 y TPMT no mostraron asociación con los efectos secundarios de mercaptopurina en la muestra de estudio. Se requieren estudios con mayor tamaño poblacional así como la evaluación de otras variantes genéticas que puedan influenciar el desarrollo de efectos secundarios durante la quimioterapia de mantenimiento. Abstract: Objective: To correlate the genetic profile of the TPMT and NUDT15 genes with the side effects of treatment in pediatric patients with Acute Lymphoblastic Leukemia who are undergoing maintenance therapy at the HOMI Hospital de la Misericordia during 2017. Methods: this is an analytical, longitudinal observational study in which the genotypes of the TPMT and NUDT15 genes will be determined by allelic discrimination PCR with TaqMan® probes to 70 patients who were receiving chemotherapy during the maintenance phase in the Pediatric Hematology and Oncology Unit at HOMI Hospital de la Misericordia during 2017. The sociodemographic and clinical characteristics corresponding to the first 6 months of their maintenance chemotherapy have been collected. And the correlation between the genotypes obtained and the development of side effects of maintenance chemotherapy in these patients will be evaluated. Results: a total of 70 patients were included in the present study, of these, genetic analyzes were made for NUDT15 and TPMT (rs1800462 and rs1800460) to 68 patients, while for the rs1142345 polymorphism, typing was achieved in 42 patients. 4/68 patients were heterozygous for NUDT15, the same number of patients were heterozygous for rs1800462 and rs1142345, while for rs1800460 6 heterozygous patients were identified. No statistically significant association was identified between the genetic variants and the outcomes of interest. Conclusions: the genetic variants of NUDT15 and TPMT showed no association with the side effects of mercaptopurine in the study sample. Studies with larger population size are required as well as the evaluation of other genetic variants that may influence the development of side effects during maintenance chemotherapy. Otra

[Resumen]: El trasplante cardíaco (TC) continúa siendo el tratamiento de elección para pacientes con insuficiencia cardíaca (IC) avanzada. Una de las principales complicaciones tras un TC es la aparición de rechazo mediado por anticuerpos (RMA), para evitarlo es imprescindible una correcta terapia inmunosupresora. La ciclosporina A (CsA) es uno de los fármacos más utilizados en el tratamiento inmunosupresor de los pacientes con TC. Sin embargo, presenta una gran variabilidad farmacocinética y farmacodinámica, que dificultan la adaptación de la terapia. Se ha estimado que la genética puede ser responsable de entre el 20% al 95% de esta variabilidad. En este estudio se analizarán las variantes presentes en 11 genes (ABCB1, CYP3A4, CYPA5, PPIA, NOD2, XPC, MTRR, PAX4, GAN, POR, CYP2C9) que intervienen en la farmacodinámica y la farmacocinética de la CsA, el RMA así como en el desarrollo de nefrotoxicidad. Para ello se analizarán datos de una cohorte de 29 pacientes tratados con CsA a los que se les ha practicado un TC. Se clasifican en dos grupos, uno “RMA” y otro “Control”, según presenten o no RMA. Además se realizará una segunda clasificación en otros dos grupos, “NEFTX” y “Control” según presentaran o no nefrotoxicidad. Nuestro objetivo es determinar la asociación entre la presencia en estos genes de polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) y la aparición de RMA o nefrotoxicidad. Se identificaron 66 SNPs y una mutación en los 11 genes analizados. Sin embargo, no se encontró asociación entre estas variantes y el desarrollo de RMA o nefrotoxicidad. Ampliar la cohorte de estudio mediante un estudio multicéntrico y monitorizar la concentración plasmática del fármaco podría esclarecer las implicaciones de estas variantes en la farmacogenética de la CsA. Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2018/2019

[Resumen]: El trasplante cardíaco (TC) es un tratamiento eficaz cuando no existen alternativas en los casos de insuficiencia cardíaca avanzada y es una técnica capaz de salvar al 80% de los pacientes con alta probabilidad de fallecimiento al año. El tratamiento inmunosupresor ha determinado una mejoría en el pronóstico de los pacientes con TC y ha reducido la incidencia de rechazo del injerto. No obstante los episodios de rechazo, en el que cabe destacar el rechazo mediado por anticuerpos (RMA), constituyen una de las principales complicaciones tras el TC. Diferentes estudios apoyan la existencia de variantes genéticas asociadas a un fracaso en la inmunosupresión que puede estar relacionado con la aparición del RMA. El objetivo de este trabajo es identificar variantes en 9 genes relacionados con la farmacocinética y farmacodinámica del tacrolimus, y estudiar su asociación con el RMA. Para ello, se analizaron datos genéticos de 26 pacientes tratados con tacolimus, de los cuales 15 presentaron RMA y 11 no presentaron RMA (Control). Tras el análisis se identificaron 25 polimorfismos en los genes seleccionados. Sin embargo, ninguno de estos polimorfismos presentaba asociación significativa con el RMA. También, se han encontrado dos mutaciones en pacientes Control, por un lado, p.Gln117Ter en el gen CYP3A5 que podría no expresarse por sistemas de reparación del ADN y por otro lado, p.Ser425Tyr en el gen FOXP3, que se considera benigna según las predicciones bioinformáticas utilizadas. Aunque en nuestro trabajo no hayamos encontrado asociación entre variantes de genes implicados en la farmacocinética y farmacodinámica del tacrolimus y el RMA, no podemos descartar un posible efecto de estos genes en la farmacogenética del tacrolimus debido al limitado número de pacientes a estudio. Por ello, aumentar la cohorte con estudios multicéntricos sería una alternativa para determinar si existe asociación significativa con los genes a estudio. Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2018/2019

Objetivo: desarrollar y validar un modelo farmacocinético – farmacodinámico (PKPD) poblacional de capecitabina que proporcione información útil en la personalización del tratamiento en pacientes con carcinoma colorrectal. Métodos: estudio prospectivo observacional post-autorización desarrollado en el Hospital Universitario Doctor Peset de Valencia entre febrero de 2015 y agosto 2016 en pacientes con carcinoma colorrectal. Las determinaciones de las concentraciones plasmáticas de CAP y sus metabolitos (5-DFUR y 5-FU) se realizaron a partir de muestras de sangre obtenidas 1h, 2h y 3h post-administración. Los recuentos absolutos de neutrófilos (RAN) se realizaron entre los días 15-24 post-administración. Resultados: 48 pacientes fueron incluidos en el estudio farmacocinético (PK) realizándose 432 determinaciones de niveles plasmáticos. Se asumió la absorción y el metabolismo de primer orden a partir de CAP a 5-FU a través de 5-DFUR y se asumieron procesos de eliminación de primer orden para CAP y 5-FU. Los valores de aclaramiento de CAP, 5'-DFUR y 5-FU fueron 294, 8,97 y 12,8 L/h, respectivamente. El volumen aparente de distribución de CAP (Vd2) fue de 449 L, mientras que V3 (5-DFUR) y V4 (5-FU) fueron fijados a 1L. Se recogieron un total de 85 covariables (78 polimorfismos y 7 variables demográficas, antropométricas, biométricas y relacionadas con el tratamiento). El modelo PK final incorporó las siguientes covariables: oxaliplatino en el periodo de latencia, rs6720173 en el aclaramiento de 5-DFUR y rs2271862 en el aclaramiento de 5-FU. 48 pacientes fueron incluidos en el estudio farmacodinámico (PD) realizándose 349 RAN. La base estructural siguió lo descrito en la publicación de Friberg et al. El basal de RAN (E0) fue de 3,87 x109/L y la pendiente de 0,0309 ml/mcg. El modelo PD incorporó como covariable el oxaliplatino sobre la pendiente. Según los ejercicios de simulación realizados el riesgo de neutropenia es inferior si presentan genotipo rs2271862 mutado, por lo que en estos pacientes podría incrementarse las dosis de capecitabina sin comprometer la seguridad. Este hallazgo cobra mayor importancia cuando el tratamiento con capecitabina se realiza de forma concomitante con oxaliplatino, dado que en estos casos, los pacientes salvajes podrían recibir dosis de hasta 588 mg/m2/24h, mientras que los pacientes mutados podrían recibir dosis de hasta 1.176 mg/m2/24h. Conclusión: la determinación genética del polimorfismo de nucleótido único rs2271862 presente en el gen ABC y la monitorización farmacocinética de 5-FU tras la administración de capecitabina por vía oral permitiría disponer de información útil para personalizar el tratamiento con capecitabina en pacientes con carcinoma colorrectal.

Ana Sabater,1 Carlos J Ciudad,2 Marc Cendros,1 Denis Dobrokhotov,1 Juan Sabater-Tobella11Department of Information Technology, EUGENOMIC, Barcelona 08012, Spain; 2Department of Biochemistry and Physiology, University of Barcelona, Barcelona 08028, SpainAbstract: We present g-Nomic, a pharmacogenetics interpretation software that analyzes globally a prescribed medication taking into account the personal background genetics, drug–drug interactions, lifestyle, nutritional supplements, inhibitors, inducers, and other risks to analyze primary or secondary metabolism pathways. G-Nomic provides a set of recommendations describing the suitability of a given combination of drugs for each patient according to their genes and polymedication. G-Nomic is updated monthly including data from the new drugs to be included, their known interactions, and the relevant pharmacokinetic biomarkers. For the interactions, the list is curated manually, only keeping those with clinical relevance. For each drug, their FDA and EMA drug labels are accessed, to check for relevant enzymes and transport proteins that influence its pharmacokinetics, and for their ability to induce or inhibit other enzymes, particularly the CYP-450 system. When this information is not available, a PubMed search is made to look for these characteristics. In addition, a distinction is made between drugs and prodrugs. A query on the g-Nomic software begins with entering the medication by either their common or commercial name. Non-pharmacological substances can be also added or selected under “lifestyle habits”. The lifestyle list is dynamic, showing only the substances known to interact with the drugs that are currently selected, and includes herb compounds, such as St. John’s wort, as well as proper lifestyle substances such as grapefruit or cigarette smoking. The software provides a list of the genes classified as primary biomarkers as candidates for genetic testing, and a list of the interactions that have been detected. If genetic information is available then, or is made available at a later point, these results can also be entered and the software returns pharmacogenetics recommendations regarding specific genotypes. g-Nomic takes all the above-mentioned parameters in an easy and user-friendly tool making prescription safer.Keywords: pharmacogenetics, SNP, drug-drug interaction, drug-lifestyle, drug-herb, software

Tuberculosis is a health problem worldwide with one-third of the population infected with the Mycobacterium tuberculosis bacilli. The first-line of treatment for tuberculosis includes the drugs Isoniazid (INH) and Rifampicin (RIF) metabolized in the liver. Drug metabolism is directly related to the genetic variation of NAT2 and CYP2E1 (associated with INH metabolism) and AADAC (associated with RIF metabolism), and the effects produced in an individual may be a fast, intermediate or slow metobolizer. Polymorphisms in genes of people in standard tuberculosis treatment can cause effects on drug metabolism with consequences of hepatotoxicity and even drug resistance. Countries have began clinical trials focusedon personalization of tuberculosis treatment to reduce the consequences for patients in treatment. In countries like Peru, where high rates of tuberculosis are recorded and therefore more people in treatment, the pharmacogenomic of individuals becomes a crucial tool for an optimum tuberculosis treatment. This review highlights the importance of having pharmacogenomic studies and having the identification of polymorphisms associated to the metabolism of theanti-tuberculosis drugs in our Peruvian population. La tuberculosis es un problema de salud Pública a nivel mundial con un tercio de la población infectada por el bacilo Mycobacterium tuberculosis. El tratamiento de primera línea incluye a las drogas isoniazida (INH) y rifampicina (RIF) metabolizadas en el hígado. La metabolización de drogas está directamente relacionada con la variación genética de NAT2 y CYP2E1 (asociados a metabolismo de INH) y AADAC (asociados a metabolismo de RIF), y los efectos pueden producir que un individuo sea metabolizador rápido, intermedio o lento. Los polimorfismos en genes de personas con tratamiento estándar de tuberculosis pueden ocasionar efectos en el metabolismo de drogas con consecuencias de hepatoxicidad e, incluso, posible drogorresistencia. Algunos países han empezado ensayos clínicos enfocados en la personalización del tratamiento a tuberculosis para reducir las consecuencias en pacientes en tratamiento. En países como el Perú, donde se registran altos índices de tuberculosis y, por consiguiente, más población en tratamiento, la farmacogenómica de individuos se convierte en una herramienta crucial para un óptimo tratamiento. La presente revisión destaca la importancia de tener estudios en farmacogenómica e identificar los polimorfismos asociados al metabolismo de las drogas antituberculosas en nuestra población peruana.

Fil: Naranjo, María Eugenia G. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Naranjo, María Eugenia G. Universidad de Extremadura; España Fil: Rodrigues Soares, Fernanda. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Rodrigues Soares, Fernanda. Universidade Federal de Minas Gerais; Brasil Fil: Rodrigues Soares, Fernanda. Faculdade Uninassau; Brasil Fil: Peñas Lledó, Eva M. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Peñas Lledó, Eva M. Universidad de Extremadura; España Fil: Tarazona Santos, Eduardo. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Tarazona Santos, Eduardo. Universidade Federal de Minas Gerais; Brasil Fil: Tarazona Santos, Eduardo. Prisma; Perú Fil: Fariñas, Humberto. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Fariñas, Humberto. Universidad de Extremadura; España Fil: Rodeiro, Idania. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Rodeiro, Idania. Instituto de Ciencias del Mar; Cuba Fil: Terán, Enrique. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Terán, Enrique. Universidad San Francisco de Quito; Ecuadro Fil: Grazina, Manuela. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Grazina, Manuela. University of Coimbra; Portugal Fil: Moya, Graciela E. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Moya, Graciela E. Pontificia Universidad Católica Argentina. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Biomédicas; Argentina Fil: López López, Marisol. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: López López, Marisol. Universidad Autónoma Metropolitana; México Fil: Sarmiento, Alba P. Pontifica Universidad Javeriana; Colombia Fil: Calzadilla, Luis R. Centro Comunitario de Salud Mental de la Habana Vieja; Cuba Fil: Calzadilla, Luis R. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Ramírez Roa, Ronald. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua; Nicaragua Fil: Ramírez Roa, Ronald. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Ortiz López, Rocío. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Ortiz López, Rocío. Tecnológico de Monterrey; México Fil: Estévez Carrizo, Francisco E. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Estévez Carrizo, Francisco E. Universidad de Montevideo; Uruguay Fil: Sosa Macías, Martha. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Sosa Macías, Martha. Instituto Politécnico Nacional; México Fil: Barrantes, Ramiro. Universidad de Costa Rica Fil: Barrantes, Ramiro. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Llerena Adrián. RIBEF Ibero-American Network of Pharmacogenetics and Pharmacogenomics; España Fil: Llerena Adrián. Universidad de Extremadura; España Abstarct Pharmacogenetic variation in Latin Americans is understudied, which sets a barrier for the goal of global precision medicine. The RIBEF-CEIBA Network Consortium was established to characterize interindividual and between population variations in CYP2D6, CYP2C9, and CYP2C19 drug metabolizing enzyme genotypes, which were subsequently utilized to catalog their "predicted drug metabolism phenotypes" across Native American and Ibero American populations. Importantly, we report in this study, a total of 6060 healthy individuals from Ibero-America who were classified according to their self-reported ancestry: 1395 Native Americans, 2571 Admixed Latin Americans, 96 Afro-Latin Americans, 287 white Latin Americans (from Cuba), 1537 Iberians, and 174 Argentinean Ashkenazi Jews. Moreover, Native Americans were grouped into North-, Central-, and South Amerindians (from Mexico, Costa Rica, and Peru, respectively). All subjects were studied for the most common and functional CYP2D6, CYP2C9, and CYP2C19 allelic variants, and grouped as genotype-predicted poor or ultrarapid metabolizer phenotypes (gPMs and gUMs, respectively). Native Americans showed differences from each ethnic group in at least two alleles of CYP2D6, CYP2C9, and CYP2C19. Native Americans had higher frequencies of wild-type alleles for all genes, and lower frequency of CYP2D6*41, CYP2C9*2, and CYP2C19*17 (p

El proyecto del estudio que constituye esta tesis fue galardonado con el Premio Especial en Medicina Personalizada en la VII Edición de los premios Best in Class 2012., Introducción: Clopidogrel ha demostrado efectos beneficiosos en el síndrome coronario agudo y en la intervención coronaria percutánea, sin embargo, diferentes polimorfismos genéticos reducen su eficacia. El objetivo de este estudio fue comprobar si una estrategia de guiar el tratamiento antiagregante en base a los genotipos CYP2C19 / ABCB1 reduce la tasa de eventos cardiovasculares y sangrado. Método: Estudio experimental no randomizado que incluyó pacientes sometidos a intervención coronaria percutánea con stent. Una estrategia prospectiva guiada por genotipo (grupo de intervención) se comparó con una estrategia retrospectiva no guiada (grupo control). El objetivo principal de eficacia fue el compuesto de muerte cardiovascular, síndrome coronario agudo y/o accidente cerebrovascular durante 12 meses después de la intervención. El objetivo secundario fue comparar la eficacia de las diferentes terapias antiagregantes utilizadas en condiciones de genotipado. Resultados: El estudio incluyó a 719 pacientes intervenidos con stent, más del 86% con síndrome coronario agudo. El objetivo primario se produjo en 32 pacientes (10,1%) en el grupo de genotipado y en 59 pacientes (14,1%) en el grupo control (HR 0,63; IC 95%: 0,41-0,97; p = 0,037). No hubo diferencias estadísticamente significativas entre los dos grupos en las hemorragias mayores y menores (4,1% vs. 4,7%, HR = 0,80; IC del 95%: 0,39-1,63; p=0,55). En el grupo de intervención, el 59% de los pacientes no portaban genotipo de riesgo y recibieron clopidogrel; el otro 41% eran portadores, y fueron tratados con los nuevos antiagregantes. No hubo diferencias estadísticamente significativas entre los tratados con clopidogrel en comparación con los nuevos antiagregantes ni en la tasa de eventos (9,1% vs 11,5% p = 0,44), ni en sangrados (3,7% frente a 4,6%, p = 0,69). Conclusiones: La estrategia de selección del fármaco antiagregante guiada por genotipo reduce la tasa de eventos cardiovasculares y hemorragias durante 12 meses después de la intervención coronaria percutánea en comparación con una estrategia no guiada., Tesis Univ. Granada. Programa Oficial de Doctorado en: Medicina Clínica y Salud Pública, Consejería de Salud y Bienestar Social de la Junta de Andalucía en el año 2012. Subvención: PI-057/2012

Tesis Univ. Granada. Programa Oficial de Posgrado en: Farmacia

La farmacogenética estudia la gran cantidad de genes que pueden afectar a la acción, al metabolismo y a la toxicidad de los medicamentos. La mayoría de los fármacos en sus dosificaciones convencionales no producen efectos uniformes en todos los pacientes, la respuesta del paciente a los medicamentos, por tanto, tiene una base metabólica que involucra algunos polimorfismos genéticos en las enzimas clave de la transformación de los mismos, por lo que es importante comprender los avances en la farmacogenética de patologías clínicas frecuentes, tales como las enfermedades cardiovasculares. Centrándonos en éstas encontramos factores de riesgo que pueden venir determinados genéticamente como diabetes, hipercolesterolemia o hipertensión arterial. El nivel de riesgo general del individuo determina la probabilidad de padecer una dolencia cardiovascular. Los estudios revisados coinciden en exponer la potencial utilidad de la farmacogenómica como herramienta en clínica cardiovascular, frente a la frecuencia de las variaciones individuales en la respuesta a los fármacos y la necesidad de avanzar hacia tratamientos más personalizados en las enfermedades cardiovasculares, haciendo uso de los conocimientos y tecnologías que tenemos a partir del descubrimiento del genoma humano, pudiendo así aumentar la eficacia y disminuir los efectos adversos del tratamiento. Hay una serie de fármacos comunes en la terapia cardiovascular, que han sido investigados y de los que se tiene información sobre las posibles variantes genéticas que pueden afectar a su respuesta individual, y de los que se han obtenido datos confirmados por numerosos estudios que ya pueden integrarse en la clínica cardiovascular, permitiendo una medicina más personalizada, eficaz y segura; dichos fármacos son warfarina, clopidogrel y simvastatina. Se han hecho grandes avances, pero la implementación en la práctica clínica se encuentra aún en etapas iniciales, debido a la dificultad para identificar y validar asociaciones de genes con respuestas específicas. Universidad de Sevilla. Grado en Farmacia

Indexación: Scopus; Scielo. Cancer is the second leading cause of death in the world, causing 8.8 million deaths in 2015 according to the World Health Organization (WHO). Risk factors for cancer include smoking and alcohol consumption. In Chile, 33.6% of the population and 21.2% of young people smokes. Alcohol consumption in the Chilean population is 74.5% and 12.2% in young people. Among the physiological factors that influence the development of cancer, the genetic factor plays a relevant role. It has been shown that the presence of genetic polymorphisms that alter the ability of the body to eliminate contaminants increase the risk of developing cancer. The same applies to polymorphisms that prevent DNA repair due to damage caused by environmental pollutants such as cigarette smoke. The objective of this review is to analyze the state of the art of the relationship between pharmacogenetics, smoking, and alcohol consumption as risk factors for the development of cancer. In conclusion, the results suggest that the presence of polymorphisms that alter the function of biotransformation enzymes phase I (CYP1A1, CYP1E1) and phase II (GST), as well as polymorphisms in DNA repair enzymes (ERCC1 / ERCC2), increase the risk of cancer induced by smoking and alcohol consumption. This association is important considering that smoking and drinking alcohol are highly prevalent among the Chilean population. © 2018, Sociedad Chilena de Pediatria. All rights reserved. Cancer is the second leading cause of death in the world, causing 8.8 million deaths in 2015 according to the World Health Organization (WHO). Risk factors for cancer include smoking and alcohol con sumption. In Chile, 33.6% of the population and 21.2% of young people smokes. Alcohol consump tion in the Chilean population is 74.5% and 12.2% in young people. Among the physiological factors that influence the development of cancer, the genetic factor plays a relevant role. It has been shown that the presence of genetic polymorphisms that alter the ability of the body to eliminate contami nants increase the risk of developing cancer. The same applies to polymorphisms that prevent DNA repair due to damage caused by environmental pollutants such as cigarette smoke. The objective of this review is to analyze the state of the art of the relationship between pharmacogenetics, smoking, and alcohol consumption as risk factors for the development of cancer. In conclusion, the results suggest that the presence of polymorphisms that alter the function of biotransformation enzymes phase I (CYP1A1, CYP1E1) and phase II (GST), as well as polymorphisms in DNA repair enzymes (ERCC1 / ERCC2), increase the risk of cancer induced by smoking and alcohol consumption. This association is important considering that smoking and drinking alcohol are highly prevalent among the Chilean population. https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0370-41062018005000709&lng=en&nrm=iso&tlng=en

Resumen: El cáncer es la segunda causa de muerte en el mundo, según datos de la Organización Mundial de la Salud (OMS) en el año 2015 ocasionó 8,8 millones de muertes. Dentro de los factores de riesgo para el desarrollo de cáncer se encuentran el tabaquismo y el consumo de alcohol. En Chile el 33,6% de la población fuma y un 21,2 % de los jóvenes. El consumo de alcohol en la población chilena es de 74,5 % y en los jóvenes de un 12,2 %. Entre los factores fisiológicos que influyen en el desarrollo de cáncer, el factor genético juega un rol relevante, habiéndose demostrado que la presencia de polimorfismos genéticos alteran la capacidad del organismo de eliminar contaminantes y aumentan el riesgo de desarrollar cáncer. Lo mismo ocurre con polimorfismos que impiden la reparación de ADN debido a daños producidos por efecto de contaminantes ambientales como el humo de cigarrillo. El objetivo de esta revisión es analizar el estado del arte de la relación entre farmacogenética, tabaco y alcohol como factores de riesgo para el desarrollo de cáncer. Los resultados sugieren que la presencia de po limorfismos que alteran la función de enzimas de biotransformación fase I (CYP1A1, CYP1E1) y fase II (GST), además de polimorfismos en enzimas de reparación del ADN (ERCC1/ERCC2) aumentan el riesgo de cáncer inducido por el hábito tabáquico y alcohólico. Esta asociación es importante, si consideramos que en la población chilena el hábito de fumar y beber alcohol es altamente prevalente. Abstract: Cancer is the second leading cause of death in the world, causing 8.8 million deaths in 2015 according to the World Health Organization (WHO). Risk factors for cancer include smoking and alcohol con sumption. In Chile, 33.6% of the population and 21.2% of young people smokes. Alcohol consump tion in the Chilean population is 74.5% and 12.2% in young people. Among the physiological factors that influence the development of cancer, the genetic factor plays a relevant role. It has been shown that the presence of genetic polymorphisms that alter the ability of the body to eliminate contami nants increase the risk of developing cancer. The same applies to polymorphisms that prevent DNA repair due to damage caused by environmental pollutants such as cigarette smoke. The objective of this review is to analyze the state of the art of the relationship between pharmacogenetics, smoking, and alcohol consumption as risk factors for the development of cancer. In conclusion, the results suggest that the presence of polymorphisms that alter the function of biotransformation enzymes phase I (CYP1A1, CYP1E1) and phase II (GST), as well as polymorphisms in DNA repair enzymes (ERCC1 / ERCC2), increase the risk of cancer induced by smoking and alcohol consumption. This association is important considering that smoking and drinking alcohol are highly prevalent among the Chilean population.

Introduction: CYP2C9 metabolizes approximately 15% of the prescribed drugs. Its gene has alleles whose frequencies differ between ethnic groups and populations. The alleles CYP2C9*2 and CYP2C9*3 account for an enzyme with decreased activity and their frequencies have not been determined in the Peruvian mestizo population. Objective: To characterize the frequencies of the allelic variants *2 (rs1799853) and *3 (rs1057910) of CYP2C9 gen in the Peruvian mestizo population from Lima, Tacna y Junín. Materials and methods: We conducted an observational, prospective cross-sectional study with non-probabilistic, by convenience, and incidental sampling. We included 218 subjects according to the inclusion and exclusion criteria, all of whom had signed the informed consent. We obtained the genomic DNA from oral mucosa swab. For the detection of the CYP2C9*2 and CYP2C9*3 genotypes, we used real-time-polymerase chain reaction with TaqMan® probes. Results: The genotyping revealed that CYP2C9*2 and CYP2C9*3 variants have low frequencies (0.046 and 0.062, respectively). The frequency of intermediate metabolizers was 15.13% (CYP2C9*1/*2: 5.96%; CYP2C9*1/*3: 9.17%) and that of slow metabolizers was 3.22% (CYP2C9*2/*2: 1.38%; CYP2C9*3/*3: 1.38%; CYP2C9*2/*3: 0.46%). Conclusions: It was possible to determine the genotypic and allelic frequencies for the variants *2 and *3 of the CYP2C9 gene in a non-probabilistic sample of the Peruvian mestizo population. The frequencies obtained (0.046 and 0.062, respectively) corresponded to those expected for a South American mestizo population with Amerindian, European, African and Asian ancestry.Introducción. El citocromo CYP2C9 metaboliza, aproximadamente, el 15 % de los fármacos prescritos. Su gen presenta alelos cuyas frecuencias difieren entre grupos étnicos y poblaciones. Los alelos CYP2C9*2 y CYP2C9*3 dan cuenta de una enzima con actividad disminuida cuya frecuencia no ha sido determinada en la población mestiza peruana. Objetivo. Caracterizar la frecuencia de las variantes *2 (rs1799853) y *3 (rs1057910) del gen CYP2C9 en muestras de población mestiza peruana provenientes de Lima, Tacna y Junín. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo, observacional y prospectivo, con muestreo no probabilístico, por conveniencia e incidental. Se incluyeron 218 sujetos según los criterios de inclusión y exclusión; todos los participantes otorgaron su consentimiento informado. El ADN genómico se obtuvo mediante hisopado de mucosa oral, y la detección de los genotipos para los alelos CYP2C9*2 y CYP2C9*3 se hizo mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real, utilizando sondas TaqMan™. Resultados. Las variantes de CYP2C9*2 y CYP2C9*3 están presentes en la población mestiza peruana con frecuencias de 0,046 y 0,062, respectivamente. El análisis de las frecuencias genotípicas observadas permitió predecir que la frecuencia de fenotipos metabolismo intermedio sería del 15,13 % (CYP2C9*1/*2: 5,96 %; CYP2C9*1/*3: 9,17 %), y la de fenotipos de metabolismo lento, del 3,22 % (CYP2C9*2/*2: 1,38 %; CYP2C9*3/*3: 1,38 %; CYP2C9*2/*3: 0,46 %). Conclusiones. Se lograron determinar las frecuencias genotípicas y alélicas para las variantes *2 y *3 del gen CYP2C9 en una muestra no probabilística de población mestiza peruana.

Submitted by Priscila Akemi Yamamoto (pri.yamamoto@hotmail.com) on 2018-06-26T15:52:28Z No. of bitstreams: 1 PAY_Dissertação_Final1.pdf: 31830400 bytes, checksum: 981fac1ab1e382b40846240d405f165e (MD5) Approved for entry into archive by Maria Irani Coito null (irani@fcfar.unesp.br) on 2018-06-26T20:34:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 yamamoto_pa_me_arafcf_par.pdf: 31785267 bytes, checksum: cf79d227d3e02929b6d444027ff2975f (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-26T20:34:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 yamamoto_pa_me_arafcf_par.pdf: 31785267 bytes, checksum: cf79d227d3e02929b6d444027ff2975f (MD5) Previous issue date: 2018-06-15 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A gabapentina (GAB) é um anticonvulsivante indicado para o tratamento de epilepsia e dor crônica. Possui cinética não linear relacionada a saturação do processo de absorção, não é metabolizada e é eliminada principalmente por excreção renal. Estudos sugerem a atividade dos transportadores de cátions orgânicos (OCT2 e OCTN1) na secreção renal da GAB. O objetivo do estudo foi investigar a influência dos polimorfismos genéticos de OCT2 e OCTN1 e outras possíveis covariáveis na disposição cinética da GAB em pacientes tratados com doses múltiplas. Os métodos de cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por ultravioleta (CLAE-UV) para determinação da concentração de GAB no plasma e na urina foram desenvolvidos e validados segundo a RDC nº 27/2012 da ANVISA. Foi utilizado como agente derivatizante o 1-flúor-2,4-dinitrobenzeno, e como padrão interno o anlodipino. Os métodos apresentaram linearidade na faixa de 200-14.000 ng/mL de plasma e 2-120 µg/mL de urina. Foram investigados 66 participantes (35 mulheres e 31 homens), com idade média de 54 anos e com dor crônica tratados com GAB por pelo menos 7 dias. Os participantes foram genotipados como GG (n=58) e GT (n=8) para o polimorfismo SLC22A2 c.808G>T e CC (n=31), CT (n= 27) e TT (n=8) para o polimorfismo SLC22A4 c.1507C>T. As concentrações plasmáticas mínima de GAB no estado de equilíbrio variaram de 402,0 a 11.937,9 ng/mL durante tratamento com doses diárias que variaram de 600 a 3.600 mg. A idade e a taxa de filtração glomerular estimada apresentaram correlação significativa com a razão concentração plasmática mínima de GAB/dose diária. Outras variáveis (sexo, peso corporal e índice de massa corporal) não apresentaram correlação. A taxa de filtração glomerular estimada e a dose diária foram as covariáveis relevantes para predizer a concentração plasmática mínima de GAB no estado de equilíbrio, explicando 68% da variabilidade na concentração plasmática. A análise populacional indicou que apenas a taxa de filtração glomerular possui efeito sob o clearance de GAB. Os polimorfismos SLC22A2 c.808G>T e SLC22A4 c.1507C>T não apresentaram influência na razão concentração plasmática mínima da GAB/dose diária e nos parâmetros farmacocinéticos populacionais estimados (constante de absorção, volume de distribuição e clearance). Em conclusão, a farmacocinética clínica da GAB é fortemente influenciada pela função renal e pela saturação dos processos de absorção e não pela farmacogenética de OCT2 e OCTN1. Gabapentin (GAB) is an anticonvulsant indicated for the treatment of epilepsy and chronic pain. It has nonlinear kinetics due to the saturation of absorption process, is not metabolized and is mainly eliminated by renal excretion. Studies suggest the activity of organic cation transporters (OCT2 and OCTN1) in the renal excretion of GAB. The aim of this study is to investigate the influence of genetic polymorphisms of OCT2 and OCTN1 and other possible covariates on the kinetic disposition of GAB in patients treated with multiple doses. High performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) methods for the determination of GAB plasma and urine concentration were developed and validated according to RDC nº 27/2012 of ANVISA. 1-fluoro-2,4-dinitrobenzene was used as derivatization agent, and amlodipine as internal standard. The methods showed linearity in the range of 200-14,000 ng/mL of plasma and 2-120 µg/mL of urine. Sixty-six participants (35 women and 31 men), with mean age of 54 years and with chronic pain treated with GAB for at least 7 days were investigated. They were genotyped as GG (n=58) and GT (n=8) for SLC22A2 c.808G>T polymorphism and as CC (n=31), CT (n=27) and TT (n=8) for SLC22A4 c.1507C>T polymorphism. GAB steady-state minimum plasma concentrations ranged from 402.0 to 11,937.9 ng/mL during the treatment with daily doses ranging from 600 to 3,600 mg. Age and estimated glomerular filtrate rate showed significant correlation with the plasma concentration of GAB/daily dose ratio. Other variables (gender, body weight and body mass index) were not correlated. The estimated glomerular filtration rate and daily dose were found as significant covariates to predict GAB minimum plasma concentration at steady-state, explained 68% of plasma concentration variability. The population pharmacokinetics showed that GAB clearance was affected only by the glomerular filtration ratio. SLC22A2 c.808G>T and SLC22A4 c.1507C>T polymorphisms did not influence the GAB minimum plasma concentration/daily dose ratio and the estimated population pharmacokinetic parameters (first-order absorption rate constant, volume of distribution and clearance). In conclusion, gabapentin clinical pharmacokinetics is strongly influenced by renal function and the absorption process saturation and not by the pharmacogenetics of OCT2 and OCTN1.

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Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2018-05-24T17:30:38Z No. of bitstreams: 1 keniadeassisboy.pdf: 53006692 bytes, checksum: 65f398b7012273fa08a2843e4d1f6878 (MD5) Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-06-14T11:54:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 keniadeassisboy.pdf: 53006692 bytes, checksum: 65f398b7012273fa08a2843e4d1f6878 (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-14T11:54:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 keniadeassisboy.pdf: 53006692 bytes, checksum: 65f398b7012273fa08a2843e4d1f6878 (MD5) Previous issue date: 2018-03-20 FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais A doença falciforme (DF) é um grave problema de saúde pública mundial, com grande impacto na morbimortalidade da população acometida. Até o momento, a hidroxiureia (HU) é considerada a terapia farmacológica de maior sucesso para a DF, pois promove redução do número e gravidade dos eventos falcêmicos, melhora os parâmetros hematológicos, reduz o número de internações e aumenta a expectativa e qualidade de vida dos pacientes. Ainda que sejam evidentes os benefícios do tratamento com HU, existe grande variabilidade interindividual de resposta farmacológica e os fatores genéticos parecem estar associados, em parte, a essa variação. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar se polimorfismos de um único nucleotídeo (SNPs) em quatro genes candidatos relacionados à farmacocinética e farmacodinâmica da HU afetam a resposta hematológica a tal fármaco. Para tanto, foram avaliados 185 pacientes com DF tratados (n=93) ou não tratados (n=92) com HU. Os níveis médios de hemoglobina (Hb), hematócrito (Hct), reticulóticos (Rtc) e leucometria global (LG) foram medidos em cinco diferentes tempos ao longo de 18 meses, enquanto a concentração de hemoglobina fetal (HbF) foi analisada antes e após o tratamento farmacológico. Os pacientes foram agrupados como "respondedores" à HU se os níveis de HbF estivessem maiores que 20%, enquanto aqueles pacientes com níveis inferiores a esse foram considerados como "não respondedores". O DNA genômico foi extraído a partir do sangue total e amostras foram então genotipadas por PCR em tempo real (qPCR) para os polimorfismos G>T (rs1799983) e T>C (rs2070744) no gene da eNOS, C>T (rs17599586) da ARG1, A>C (rs766432) e G>A (rs4671393) do BCL11A e G>A (rs9960464) do gene do UTA. As análises de associação entre as variáveis categóricas foram feitas pelo teste do qui-quadrado ou teste exato de Fisher. Para as variáveis contínuas com distribuição normal, as análises foram realizadas utilizando ANOVA seguido pelo teste t não pareado e as variáveis que não seguiram distribuição normal foram analisadas pelos testes de Wilcoxon, Kruskal-Wallis seguidos por Mann-Whitney. As análises por regressão multivariada e logística foram realizadas através do método stepwise pelo software R. A população estudada apresentou idade de 15,8 ± 11,3 anos e foi constituída de 54% de voluntários do sexo masculino. As frequências genotípica e alélica para os seis SNPs estudados apresentaram-se em equilíbrio de Hardy-Weinberg e foram semelhantes àquelas encontradas em outras populações. Pacientes com o genótipo GT para o polimorfismo no rs1799983 do gene da eNOS apresentaram maiores valores de Hb quando comparados aos homozigotos para o alelo G (r=0,364; p=0,033). Adicionalmente, a frequência dos genótipos AC e CC no gene BCL11A (polimorfismo A>C rs766432) foi maior entre os pacientes respondedores quando comparado ao grupo dos não respondedores (p=0,03). Além disso, pacientes com o genótipo GA para o polimorfismo no gene UTA também responderam melhor à terapia com HU quando comparados àqueles com o genótipo GG (p=0,005). Não foram encontradas outras influências significativas nos demais polimorfismos avaliados após análise por regressão logística. Em conclusão, este trabalho é pioneiro ao avaliar a influência de polimorfismos nos genes da eNOS, ARG1, BCL11A e UTA na resposta à HU em pacientes com doença falciforme em Minas Gerais. Os achados nos sugerem que pacientes com genótipo GT no rs1799983 do gene da eNOS apresentam maiores valores de Hb quando comparados com genótipo GG. Os polimorfismos A>C (rs766432) no gene do BCL11A (p=0,001) e G>A (rs9960464) do gene UTA (p=0,005) parecem afetar a resposta hematológica à HU, sendo que pacientes que possuem pelo menos uma cópia do alelo de menor frequência possivelmente apresentam maior chance de resposta ao tratamento farmacológico. Sickle cell disease (SCD) is a serious global public health problem, with great impact on the morbidity and mortality of the affected population. To date, hydroxyurea (HU) is considered the most successful pharmacological therapy for SCD since it promotes a reduction in the number and severity of sickle cell events, improves hematological parameters, reduces the number of hospitalizations and increases the expectation and quality of life of the patients. Although the benefits of the treatment with HU are evident, there is a large inter-individual variability of pharmacological response and genetic factors seem to be partially associated with this variation. Thus, the aim of the present study is to investigate whether single nucleotide polymorphisms (SNPs) in four candidates genes related to the pharmacokinetics and pharmacodynamics of HU affect the hematological response to such a drug. For this, 185 patients were evaluated with SCD, treated with HU (93) or untreated (92). The mean hemoglobin (Hb), hematocrit (Hct), reticulocytes (Rct) and global leukometry (LG) levels were measured at five different times over 18 months, while fetal hemoglobin (HbF) levels were analyzed before and after pharmacological treatment. Patients were grouped as "responders" to HU if HbF levels were higher than 20%, while those patients with levels below this value were considered "non-responders". Genomic DNA was extracted from the whole blood and samples were then genotyped by real-time PCR (qPCR) for the polymorphisms G>T (rs1799983) and T>C (rs2070744) on the eNOS gene, C>T (rs17599586) of ARG1 gene, A>C (rs766432) and G>A (rs4671393) of the gene BCL11A and G>A (rs9960464) of the UTA gene. The analysis of the association between the categorical variables was done by chi-square test or Fisher's exact test. For continuous variables with normal distribution, analyses were performed using ANOVA followed by the unpaired t-test and the variables that did not follow normal distribution were analyzed by the Wilcoxon, Kruskal-Wallis tests followed by Mann-Whitney. The multivariate and logistic regression analyses were performed through the stepwise method by software R. The population studied presented a mean age of 15.8 ± 11.3 years and was made up of 54% of male volunteers. The genotypic and allelic frequencies for the six SNPs studied were in Hardy-Weinberg equilibrium and were similar to those found in other populations. Patients with the GT genotype for rs1799983 polymorphism of the eNOS gene showed higher Hb values when compared to patients homozygous for the G allele (r=0,364; p=0,033). In addition, the frequency of AC and CC genotypes in the BCL11A gene (A>C polymorphism rs766432) was higher among the responders when compared to the non-responders group (p=0,03). In addition, patients with the GA genotype for the UTA gene polymorphism also responded better to HU therapy when compared to those with the GG genotype (p=0,005). No other significant influences were found in the other polymorphisms evaluated after logistic regression analysis. In conclusion, this work is a pioneer in evaluating the influence of polymorphisms in eNOS, ARG1, BCL11A and UTA genes in the response to HU in patients with sickle cell disease in Minas Gerais. The findings suggest that patients with the GT genotype for rs1799983 of the eNOS gene showed higher Hb values when compared to GG genotype. The A> C polymorphisms (rs766432) in the BCL11A (p=0,001) and G> A gene (rs9960464) of the UTA gene (p=0,005) appear to affect the hematological response to HU, and patients who have at least one copy of less frequent allele may present higher chance of respond to pharmacological treatment.

El cáncer de seno está conformado por un grupo de enfermedades multigénicas con gran impacto a nivel mundial, además es el cáncer en mujeres con mayor tasa de mortalidad en Colombia. Para su tratamiento, existen diversas alternativas terapéuticas, una de ellas, la hormonoterapia; donde tamoxifeno (TAM) es el medicamento de primera elección. El tamoxifeno es un profármaco, que requiere la acción de diversas enzimas para su biotransformación y es conocido que la variabilidad genética de estas enzimas, condiciona la presencia de diversos fenotipos que inciden en la capacidad de metabolizar tamoxifeno. En este contexto, se propuso establecer y validar las frecuencias alélicas de variantes en Citocromos de la familia P450 (CYP450) en una muestra de 30 pacientes con cáncer ductal infiltrante que acuden al Hospital Universitario San Ignacio (HUSI) para establecer su asociación con respuesta a tratamiento con TAM, desenlace clínico y sobrevida de pacientes con cáncer de seno así como en 21 mujeres que no presentaban cáncer de seno, para la generación de un prototipo de prueba molecular basado en sondas taqman. Se seleccionaron las variantes genéticas mediante revisión de la literatura. Posteriormente se tomó una muestra de sangre total, con el fin identificar los genotipos y metabolitos intermediarios de TAM (4 hidroxi TAM (4HT), endoxifeno, N desmetil TAM (ND TAM)) y TAM. Adicionalmente, las pacientes diligenciaron cuestionarios y se realizó seguimiento clínico a 12 meses, con el fin de evaluar respuesta al tratamiento y sobrevida. Mediante el panel de Farmacogenética General de “QuantStudio™ 12K Flex Real-Time PCR System” y análisis de asociación, se identificó que los fenotipos de CYP2D6 tienen la mayor correlación con los concentraciones de endoxifeno. Las variantes funcionales con actividad normal en las pacientes fueron: CYP2D6*1, CYP2D6*2A y CYP2D6*35 mostraron frecuencias de 0,393, 0,295 y 0,032 respectivamente, para el caso de las variantes no funcionales se identificaron CYP2D6*3 y CYP2D6*4 con frecuencias de 0,032 y 0,016; finalmente para las variantes con actividad reducida se identificaron CYP2D6*9, CYP2D6*17 y CYP2D6*41 con frecuencias de 0,032, 0,016 y 0,016 respectivamente, siendo la primera vez que se identifica la variante CYP2D6*9 en población colombiana. Por otra parte, en las mujeres sin cáncer de seno se identificaron las variantes funcionales con actividad normal: CYP2D6*1, CYP2D6*2A y CYP2D6*35 con frecuencias 0,18, 0,14 y 0,02 respectivamente. Para el caso de las variantes no funcionales se identificó CYP2D6*4 con frecuencia de 0,06 y finalmente para las variantes con actividad reducida se identificaron CYP2D6*17 y CYP2D6*29 con frecuencias de 0,01 cada uno. Es la primera vez que se identifica la variante CYP2D6*29 en población colombiana. Por otra parte el modelo usado para el análisis no encontró estadísticamente ninguna asociación entre el estado de los polimorfismos seleccionados y las características histopatológicas, así como tampoco se evidencio el fallecimiento de ninguna de las pacientes motivo por el cual no se evalúo sobrevida. Posteriormente, se generó un prototipo de prueba molecular para tamizaje rápido mediante el uso de sondas y primers que permitió comprobar los genotipos para las variantes CYP2D6*4, CYP2D6*9 y CYP2D6*29, este prototipo podría evaluarse para ser usado a futuro como una alternativa para la evaluación previa de pacientes candidatas a consumir tamoxifeno. Abstract: Breast cancer is a group of multigenic diseases with global burden, being the type of cancer with the highest mortality rate in Colombia. Tamoxifen (TAM) is the first choice drug for hormone therapy. Since tamoxifen is a prodrug, it requires the action of several enzymes for biotransformation, and it is known that the genetic variability of these enzymes, conditions the presence of various phenotypes that affect the ability to metabolize tamoxifen. In this context it was proposed to establish and validate the allelic frequencies of variants in Cytochromes of the P450 family (CYP450) in a sample of 30 patients with infiltrating ductal cancer who come to the University Hospital San Ignacio (HUSI) to establish their association with response to treatment with TAM, clinical outcome and survival of patients with breast cancer as well as in 21 women who did not have breast cancer, for, to contrast its association with the response to TAM treatment, clinical outcome and survival of patients with breast cancer to generate a molecular test prototype based on taqman probes. The genetic variants were selected by reviewing the literature. Subsequently a whole blood sample was taken, in order to identify the genotypes and intermediary metabolites of TAM (4 hydroxy TAM (4HT), endoxifen, N desmetil TAM (ND TAM)) and TAM. Additionally, the patients completed questionnaires and a 12-month clinical follow-up was carried out, in order to evaluate response to treatment and survival. Through the General Pharmacogenetics panel of "QuantStudio ™ 12K Flex Real-Time PCR System", it was identified that CYP2D6 phenotypes have the highest correlation with endoxifen concentrations. Functional variants with normal activity were identified; CYP2D6*1, CYP2D6*2A and CYP2D6*35 with frequencies of 0.393, 0.295 and 0.032 respectively. For the non-functional variants, CYP2D6*3 and CYP2D6*4 were identified with frequencies of 0.032 and 0.016. Finally, the variants with reduced activity identified were CYP2D6*9, CYP2D6*17 and CYP2D6*41 with frequencies of 0.032, 0.016 and 0.016 respectively, being the first time that the variant CYP2D6*9 was identified in Colombian population. When assigning genotypes it was established that 17 of the patients were intermediate metabolizers (MI), 10 extensive metabolizers (ME), 2 women as poor metabolizers (MP) and 1 ultra-fast metabolizer (MU). It was established that the concentration of endoxifen correlates with the patient´s metabolizing state of extensive and poor metabolizers. For controls, functional variants with normal activity were identified; CYP2D6*1, CYP2D6*2A and CYP2D6*35 with frequencies 0.18, 0.14 and 0.02 respectively. For non-functional variant, CYP2D6*4 a frequency of 0.06 was identified. Finally, the variants CYP2D6*17 and CYP2D6*29 with reduced activity had frequencies of 0.01 and 0.01 respectively, being the first time that the variant CYP2D6*29 was identified in Colombian population. After the identification of the variants, CYP2D6*4, CYP2D6*9, CYP2D6*17, CYP2D6*29 and CYP2D6*41 were chosen because for their mayor clinical relevance. They produce phenotypes of poor and intermediate metabolism, a test for rapid screening was generated using the probes and primers for variants CYP2D6*4, CYP2D6*9 and CYP2D6* 29, which is proposed as an alternative for the previous evaluation of the candidates to consume tamoxifen. On the other hand, the model used for the analysis did not find statistically any association between the state of the selected polymorphisms and the histopathological characteristics, nor was the death of any of the patients, reason for which no survival was evaluated. Subsequently, a molecular test prototype was generated for rapid screening by using probes and primers that allowed to check the genotypes for the variants CYP2D6 * 4, CYP2D6 * 9 and CYP2D6 * 29, this prototype could be evaluated to be used in the future as an alternative for the previous evaluation of patients candidates to consume tamoxifen. Doctorado

La fenitoína es uno de los antiepilépticos más empleados por su gran utilidad para diferentes tipos de crisis y bajo costo. Sin embargo, su uso se ve limitado por los efectos adversos, en particular los que afectan al sistema nervioso central. Este caso ilustra una intervención farmacéutica exitosa basada en la farmacogenética, para optimizar la farmacoterapia con fenitoína en un paciente metabolizador intermedio, con signos francos de neurotoxicidad por este medicamento. Phenytoin is one of the most used antiepileptics because of its great utility for different types of crisis and low cost. However, its use is limited because the adverse effects, particularly those that affect the central nervous system. This case shows asuccessful pharmaceutical intervention based on pharmacogenetics, to optimize pharmacotherapy with phenytoin in an intermediate metabolizer patient with clear signs of neurotoxicity for this drug.

Cytochrome P450 (CYP450), sulfotransferase (SULT), and glucuronidase (UGT) enzymes play roles in the phase I and phase II metabolism of most clinically prescribed drugs. As polymorphisms in these genes may alter enzyme activities, most prescribed drugs will differ in their efficacy and side effects. In prior work, we showed that besides polymorphisms in CYP450, those in SULT and UGT also give rise to different serum levels of some drug metabolites than detected in wild-type carriers of the genes [1]. [...]

A doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais frequente na espécie humana. A etiologia da DP é multifatorial, com muitos fatores ambientais e genéticos atuando em conjunto para sua determinação. Ao nível patológico ela caracteriza-se pela destruição seletiva de neurônios dopaminérgicos da substantia nigra pars compacta e pelo acúmulo de corpos de Lewy no cérebro. Em aproximadamente 90% dos casos da DP, a suscetibilidade parece ser determinada por variantes comuns no genoma que podem interagir com o ambiente. Dentre os fatores ambientais que modulam o risco para a DP estão: uso de pesticidas, exposição ocupacional a tóxicos, consumo de café e cigarro. A variabilidade na resposta à principal medicação da DP, a levodopa, parece também estar relacionada à genética do indivíduo. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo a melhor compreensão dos fatores genéticos e suas interações com o ambiente envolvidos na suscetibilidade à DP e no tratamento com levodopa. Pacientes com DP e seus controles foram recrutados no ambulatório de distúrbios do movimento e no ambulatório de medicina interna do Hospital de Clínicas de Porto Alegre e da Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre, respectivamente. Os resultados obtidos foram organizados em cinco artigos. No primeiro estudo, foram considerados oito polimorfismos previamente associados à DP. Na nossa população, os indivíduos que possuíam sete ou mais alelos de risco desses polimorfismos apresentaram um odds ratio de 2,54 quando comparados a quem possuía seis alelos ou menos (95% IC 1,66-3,89; P = 1,80E−05). Esse ponto de corte foi escolhido porque o número médio de alelos de risco na amostra foi 7. No segundo artigo, portadores do genótipo TT do polimorfismo rs1021463 e dos genótipos TT ou GT do polimorfismo rs30196 do gene SV2C apresentaram um maior risco a DP quando expostos ocupacionalmente a tóxicos, quando comparado a não-expostos (respectivamente, OR 2,53; 95% IC 1,33-4,69; Pinteração = 0,008 e OR 2,30; 95% IC 1,21-4,36; Pinteração = 0,033). O terceiro artigo mostra uma associação em que fumantes com o haplótipo T- não G -T do transportador ABCB1 apresentaram menor risco a DP quando comparados a portadores do 9 haplótipo C-G-C (OR 0,34, 95% IC 0,15-0,72; Pinteração = 0,012). No quarto trabalho, foi constatada uma interação entre o gene NOS1 e a cafeína modulando o risco da DP (OR 0,24; 95% IC 0,10-0,54; Pinteração = 0,0002). O último artigo trata da farmacogenética da levodopa, em que foi proposto um modelo com variáveis genéticas, biológicas e farmacológicas que explicou 23% da variabilidade na dose (F = 11,54; P < 0,000001). Observou-se uma redução da média de dose em aproximadamente 76 mg/dia por cada alelo C nos genótipos do polimorfismo rs30196 do gene SV2C. Estes trabalhos enriqueceram o conhecimento da variabilidade da DP tanto em aspectos de suscetibilidade quanto farmacogenética. Os dados obtidos serão importantes na continuação das pesquisas para identificar biomarcadores para prevenção e tratamento da DP. Parkinson’s disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease in humans. PD etiology is multifactorial, due to several environmental and genetic factors. Pathologically, it is characterized by a selective destruction of dopaminergic neurons in substantia nigra pars compacta and by the accumulation of Lewy bodies in brain. In approximately 90% of PD cases, susceptibility seems to be driven by common variants in the genome that might interact with the environment. Among environmental factors that modulate PD risk, pesticides, occupational exposure to toxics, smoking and coffee consumption were identified. The variability in patients’ response to the main medication of PD, levodopa, seems also to be related to genetics. Therefore, the present work had the objective to understand the genetic factors and their interaction with the environment involved in PD susceptibility and in the treatment with levodopa. Patients and controls were recruited at the movement disorders ambulatory and at the internal medicine ambulatory at the Hospital de Clínicas de Porto Alegre and at Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre respectively. The main results obtained were organized in five manuscripts. In the first, eight polymorphisms previously associated with PD were considered. In our population, individuals with 7 or more risk alleles presented an odds ratio of 2.54 for PD when compared to those with 6 or less alleles (95% CI 1.66-3.89; P = 1.80E−05). This cut off was chosen because the average number of risk alleles in the sample was 7. In the second manuscript, SV2C rs10214163 TT genotype carriers and SV2C rs30196 TT/GT genotypes carriers showed a higher PD risk in subjects exposed to environmental toxics compared to those not exposed (respectively, OR 2.53; 95% CI 1.33-4.69; Pinteraction = 0.008 and OR 2.30; 95% CI 1.21-4.36; Pinteraction = 0.033). The third manuscript shows the association between ABCB1 T-non G-T haplotype and smoking (OR 0.34, 95% CI 0.15-0.72; Pinteraction = 0.012). In the fourth manuscript, an interaction between NOS1 gene and caffeine, modulating PD risk, was observed (OR 0.24; 95% CI 0.10-0.54; Pinteraction = 0.0002). The last manuscript reports a 11 model with genetic, biological and pharmacological variants in response to levodopa. This model explained 23% of dose variability (F = 11.54; P < 0.000001). The presence of each rs30196 C allele reduced the average dose in approximately 76 mg/day. All these work enriched the knowledge of the variability of PD in both susceptibility and pharmacogenetic areas. The data obtained will be important to identify biomarkers for disease prediction and treatment.

La enfermedad de Alzheimer (EA) es un trastorno poligénico / complejo en el que los factores genómicos, epigenómicos, cerebrovasculares, metabólicos y ambientales convergen para definir un fenotipo neurodegenerativo progresivo. La farmacogenética es un determinante importante del resultado terapéutico en la EA. Las diferentes categorías de genes están potencialmente involucradas en la red farmacogenética responsable de la eficacia y seguridad de los medicamentos, incluidos los genes patógenos, mecánicos, metabólicos, transportadores y pleiotrópicos. Sin embargo, la mayoría de los medicamentos ejercen efectos pleiotrópicos que están regulados de manera promiscua para diferentes productos genéticos. Solo el 20% de la población caucásica son metabolizadores extensos para haplotipos tetragénicos que integran las variantes CYP2D6-CYP2C19-CYP2C9-CYP3A4 / 5. Los pacientes que albergan fenotipos genéticos pobres (PM) y / o ultrarrápidos relacionados con el CYP muestran perfiles más irregulares en el metabolismo de los fármacos que los metabolizadores extensivos (EM) o intermedios (IM). Entre los 111 haplotipos pentágenos (APOE-APOB-APOC3-CETP-LPL) asociados con el metabolismo de los lípidos, los portadores del haplotipo H26 (23-TT-CG-AG-CC) exhiben los niveles más bajos de colesterol, y los pacientes con el haplotipo H104 (44 -CC-CC-AA-CC) son severamente hipercolesterolémicos. Además, las variantes de APOE, NOS3, ACE, AGT y CYP influyen en la respuesta terapéutica a los fármacos hipotensores en pacientes con AD con hipertensión. En consecuencia, la implementación de procedimientos farmacogenéticos puede optimizar la terapéutica en pacientes con AD bajo regímenes de polifarmacia para el tratamiento de trastornos vasculares concomitantes. © 2018 por los autores. Licenciatario MDPI, Basilea, Suiza.

[spa] El trastorno obsesivo compulsivo (TOC) de inicio en la infancia y la adolescencia es un trastorno psiquiátrico con una prevalencia de alrededor del 1-3%, caracterizado por la presencia de obsesiones y compulsiones recurrentes que generan una elevada ansiedad y malestar en el paciente. Además, el debut temprano de estos pacientes conlleva un mayor riesgo de cronificación y un peor pronóstico. El conocimiento actual sobre los factores de riesgo y los mecanismos etiopatogénicos del TOC continúa siendo limitado. Una de las hipótesis más recientes plantea que las alteraciones en el sistema inmunitario podrían estar implicadas en el desarrollo de esta enfermedad. En cuanto al abordaje terapéutico, el principal tratamiento farmacológico utilizado en estos pacientes es la fluoxetina. A pesar de su eficacia en el control de la sintomatología obsesivo-compulsiva, existe una elevada variabilidad interindividual en la respuesta terapéutica. La presente tesis doctoral tiene como objetivo profundizar en las bases biológicas implicadas en la susceptibilidad a padecer TOC de inicio en la infancia y la adolescencia, centrándose en el papel que juegan los factores genéticos y las alteraciones inmunológicas, con el objetivo final de identificar nuevas dianas terapéuticas. Además, se pretende evaluar la influencia de los factores genéticos en la respuesta al tratamiento con fluoxetina en niños y adolescentes, con el fin de mejorar el tratamiento farmacológico actual. Los resultados obtenidos indican la presencia de alteraciones en el sistema inmunitario a distintos niveles en los niños y adolescentes con TOC. En concreto, estos pacientes presentan una frecuencia superior de determinados alelos HLA de clase II, así como una mayor concentración de monocitos circulantes proinflamatorios en comparación con individuos control. Además, estos monocitos en cultivo liberan mayores cantidades de citoquinas proinflamatorias y presentan un perfil de expresión en genes relacionados con el sistema inmunitario distinto al de los controles. En cuanto a la farmacogenética de la fluoxetina, variantes genéticas y epigenéticas en genes relacionados con el sistema serotoninérgico (HTRB1 y TPH2) parecen tener un efecto importante en la respuesta terapéutica. Los hallazgos obtenidos proporcionan nuevas evidencias sobre la fisiopatología y la farmacología del TOC, útiles para el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas y para la mejora del tratamiento farmacológico actual., [eng] Obsessive-compulsive disorder (OCD) in childhood and adolescence is a psychiatric disorder with a prevalence of around 1-3%, characterized by the presence of recurrent obsessions and compulsions that generate high anxiety and discomfort in the patient. In addition, the early debut of these patients entails a greater risk for chronicity and a worse prognosis. Current knowledge about the risk factors and the etiopathogenic mechanisms of OCD is still limited. One of the most recent hypotheses proposes that alterations in the immune system could be involved in the development of this disease. Regarding the therapeutic approach, the main pharmacological treatment used in these patients is fluoxetine. Despite its efficacy in the control of obsessive- compulsive symptoms, there is a high interindividual variability in the clinical response. The present doctoral thesis aims to deepen the biological basis involved in the susceptibility to develop OCD in childhood and adolescence, focusing on the role played by genetic factors and immune alterations, with the ultimate goal of identifying new therapeutic targets. In addition, we evaluated the influence of genetic factors on fluoxetine response in children and adolescents, in order to improve the current pharmacological treatment. The results obtained indicate the presence of immune alterations at different levels in children and adolescents with OCD. Specifically, these patients showed a higher frequency of certain HLA class II alleles, as well as a higher concentration of circulating proinflammatory monocytes compared to control individuals. In addition, the cultured monocytes from OCD patients released higher amounts of proinflammatory cytokines and showed different expression profiles in genes related to the immune system compared to those from controls. Regarding the pharmacogenetics of fluoxetine, genetic and epigenetic variants in genes related to the serotonin system (HTRB1 and TPH2) seem to have an important effect on the therapeutic response. These findings provide new evidence on the pathophysiology and pharmacology of OCD, useful for the development of new therapeutic strategies and for the improvement of current pharmacological treatment.

The efficacy of methadone maintenance treatment (MMT) in opioid use disorder is well established but responses vary. The influence of methadone pharmacodynamics and pharmacokinetics on dose requirements and program outcomes remains controversial despite the increasing number of studies evaluating genetic influences on response to methadone treatment. Furthermore, patients require different doses (usually between 60 and 100 mg/day), and there are no clear data on a plasma concentration associated with treatment success. We review the evidence regarding the influence of genetics on pharmacokinetic and pharmacodynamic factors in terms of MMT outcome. We also analyse the influence of genetics on the occurrence of severe adverse events such as respiratory depression and ventricular arrhythmia in methadone treatment. The outcomes of MMT may be influenced by a combination of environmental, drug-induced, and genetic factors. The influence of pharmacokinetic genetic variability can be clinically managed by modifying the posology. A better understanding of pharmacodynamic factors could help in selecting the best opioid for substitution treatment, but patient phenotype must still be considered when establishing a maintenance treatment. Pharmacogenetic studies represent a promising field that aims to individualize treatments according to genetic backgrounds, adapting medication and doses according to possible outcomes and the risk of adverse events.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Superior de Ciências da Saúde Egas Moniz O comportamento agressivo tem geralmente origem em transtornos psiquiátricos e doenças neurológicas. A farmacogenética permite conhecer as principais alterações genéticas, ao nível de cada polimorfismo envolvido, que desencadeiam estes comportamentos anormais permitindo pesquisar e desenvolver fármacos que os possam contrariar/inibir. Por outro lado, também podem surgir comportamentos agressivos induzidos pela utilização de determinados fármacos, verificando-se, nesses casos, a necessidade de se suspender essa terapêutica, realizando-se a substituição da mesma por outra que não apresente estes efeitos secundários. Os genes humanos mais importantes associados a comportamentos agressivos anormais são os que se relacionam com as hormonas sexuais, as vias dopaminérgicas e as serotoninérgicas. Consequentemente, a farmacogenética permite estudar e conhecer os mecanismos que influenciam o comportamento agressivo e, deste modo, detetar quais os fármacos que podem provocar respostas agressivas, salientando-se os antiepilépticos e as benzodiazepinas como os mais críticos. Contudo, também existem fármacos que se aconselham para o tratamento agressivo e diminuição de tentativas de suicídio, destacando-se o lítio, antidepressivos, anticonvulsionantes, antipsicóticos, betabloqueadores e buspirona. Para a realização desta monografia foi necessário efetuar uma revisão da literatura existente sobre o tema proposto tendo em conta o comportamento agressivo, os genes associados, as possíveis correlações entre os fármacos prescritos e o comportamento agressivo e, por último, a sua terapêutica.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Superior de Ciências da Saúde Egas Moniz A Fibromialgia (FM) é considerada uma doença reumática que se caracteriza por apresentar um processo de sensibilização central, que afeta predominantemente o sexo feminino. De diagnóstico difícil o que dificulta a sua identificação e caracterização. Contudo existem diversos fatores que podem estar envolvidos no aparecimento da FM. Esta patologia é caracterizada por apresentar uma vasta sintomatologia em que se inclui: dor crónica, fadiga, rigidez, ansiedade e alterações no sono. Na terapêutica farmacológica da FM recorre - se a diversas classes de fármacos que permitam o alívio dos sintomas. Há que ter em consideração que o principal objetivo será inibir a recaptação da serotonina (5 - HT) e da noradrenalina (NA), uma vez que as mesmas são responsáveis pela transmissão da dor. Para complementar a terapêutica farmacológica recorre - se à terapêutica não farmacológica nomeadamente à prática de terapias alternativas, exercício físico, terapia cognitivo - comportamental (TCC) e educação do doente, de modo a que se aliviem os sintomas das pessoas e permita assim melhorar a qualidade de vida das mesmas. É necessário que o aconselhamento da terapêutica farmacológica seja individualizado pelo que se recorre ao estudo da farmacogenética. Esta constitui uma área de investigação, que permite a análise das variações genéticas aquando da administração de um fármaco permite avaliar a maneira de como cada pessoa irá responder a cada fármaco e qual o seu metabolismo. Nesse sentido, a aplicação da farmacogenética à múltipla variedade farmacológica usada na terapêutica em FM é muito complexa. Os fármacos mais utilizados são metabolizados por enzimas de metabolização de fase I nomeadamente as CYP em que se destacam as CYP1A2, CYP2C19 e CYP2D6. Por vezes numa determinada população existe predominância de um determinado metabolismo. A investigação nas variações destes genes são as de maior importância para o tratamento da FM.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Superior de Ciências da Saúde Egas Moniz A Farmacogenética é a ciência que permite a otimização dos regimes terapêuticos, em termos de segurança e efetividade, com base nas características genéticas dos doentes. Cada vez mais os cuidados em saúde estão centrados nos doentes e as novas abordagens estão mais direcionadas para atuarem de acordo com as características individuais destes, com o objetivo de garantir uma melhor qualidade de vida aos doentes, proporcionando-lhes tratamentos mais sofisticados e efetivos. A realização de testes farmacogenéticos permite identificar polimorfismos genéticos que influenciam o sucesso de uma terapêutica; através da administração de tratamentos personalizados é possível aumentar a taxa de resposta e diminuir a ocorrência de reações adversas, com o, consequente, aumento de adesão. A rápida proliferação das células cancerígenas e a gravidade dos sintomas tornaram a oncologia numa das áreas preferenciais para a aplicação dos testes farmacogenéticos; é fundamental que o medicamento administrado seja o correto. A existência de mutações somáticas ou germinativas impedem que alguns fármacos não sejam efetivos ou seguros. Sendo estes resultados previsíveis, é fundamental a realização de testes farmacogenéticos que determinem tais polimorfismos previamente à instituição das terapêuticas. Existem alguns obstáculos que impedem a implementação da Farmacogenética na prática clínica, nomeadamente as questões éticas subjacentes à realização dos testes farmacogenéticos, a falta de evidência que suporte as suas vantagens ou ainda o elevado investimento económico. É fundamental estabelecer metas e novos desafios que permitam incluir esta abordagem terapêutica inovadora como parte imprescindível da farmacoterapia quer em ambiente hospitalar, quer em ambulatório. Dada a sua formação extensa e abrangente nas ciências do medicamento, os farmacêuticos assumem um papel bastante importante no aconselhamento sobre farmacoterapia aos clínicos e doentes. Cada vez com maior relevo, os conhecimentos científicos que permitem a personalização da terapêutica, como a farmacogenética e a farmacodinâmica e farmacocinética, devem ser apreendidos e aplicados pelos farmacêuticos clínicos em prole do aumento da qualidade de vida do doente, por intermédio de uma maior eficácia e segurança dos medicamentos.

RESUMENLas enfermedades cardiovasculares constituyen un importante problema de salud pública al ser la principal causa de morbilidad y mortalidad en el mundo. Por ello, existe la creciente necesidad de tratamientos farmacoterapéuticos más eficaces y seguros. Sin embargo, a pesar de que los médicos prescriben fármacos sobre la base de las características farmacológicas del medicamento y la probabilidad de obtener resultados clínicamente reproducibles, muchos de los fármacos son eficaces sólo entre 25-60% de los pacientes. En este sentido es que la Farmacogenómica, a través del estudio de variantes genéticas de proteínas involucradas en la farmacocinética y farmacodinamia de los medicamentos, persigue maximizar su eficacia y seguridad.Este trabajo pretende dar una visión general acerca de farmacogenómica cardiovascular y la posibilidad de utilizar, en la consulta clínica, herramientas genéticas para apoyar la decisión farmacoterapéutica, con el objeto de mejorar la respuesta al tratamiento de enfermedades cardiovasculares, un paso hacia la medicina personalizada en Chile.SUMMARYCardiovascular disease is a major public health problem being the leading cause of morbidity and mortality worldwide. Therefore, there is a growing need for safer and more effective pharmacotherapeutic treatments. However, although physicians prescribe drugs based on pharmacological properties of each drug and the probability of obtaining clinically reproducible results, many drugs are effective only in 25-60% of patients. In this respect, pharmacogenomics, through the study of genetic variants of proteins involved in the pharmacokinetics and pharmacodynamics of drugs, pursues to maximize their efficacy and safety.This paper aims to give an overview of cardiovascular pharmacogenomics and the possibility to use, in clinical practice, genetic tools to support pharmacotherapeutical decisions, in order to improve the response to treatment of cardiovascular diseases, a step toward personalized medicine in Chile.

[eng] The calcineurin inhibitor Tacrolimus (Tac) is used to prevent acute rejection after renal transplant. Unfortunately, the clinical use of Tac is complicated by its considerable toxicity, narrow therapeutic window, and high interindividual pharmacokinetic variability. Therapeutic drug monitoring is commonly applied to individualize Tac therapy in renal transplant recipients using trough concentrations. When concentrations are out of the target range, the physicians roughly estimate what should be the appropriate change of dose. Despite trough concentrations are the most used exposure parameters, the Area Under the Curve (AUC) correlates better with the clinical outcomes. In the clinical setting, an AUC tiered-dosing is not feasible, thus an alternate approach is that based on limited-sampling strategy by means of Bayesian prediction. In this sense, the use of a population pharmacokinetic (PPK) model can assist for the first dose calculation at the start of treatment but also for dose adaptation based on predefined target by means of Maximum A Posteriori Bayesian forecasting technique, supporting therapeutic drug monitoring. Recent discovery of new polymorphism has led to further investigations on that file aiming to reduce the unexplained interindividual variability in Tacrolimus exposure. The main objective of the present work was to design a population-based Bayesian prediction tool for initial dose calculation and dose adaptation during the post-transplant period through: 1. Characterizing the Tacrolimus population PK using an intensive sampling and confirming the best limiting sampling strategy to be applied during dose adaptation. 2. To deeply Investigate in tacrolimus pharmacogenetic predictors of interindividual variability 3. Implementing new genetic information as well as other clinical factors to generate a refined population pharmacokinetic model reducing unexplained variability. A Tacrolimus population PK model was designed to characterize accurately the population absorption phase as well as quantify the inter and intra-individual variability. The first population PK model led to obtain an optimal sampling strategy using only trough concentrations for dose tailoring through Bayesian prediction. The CYP3A4*22 and CYP3A5*3 alleles are all independently associated with Tac exposure during the first year after transplantation. Proofs that a combined CYP3A4 and 5 genotype cluster is of relevant importance when deciding on the initial Tac dose. Poor metabolizers patients related to the cluster of CYP3A4*1/*22 and CYP3A5*3/*3, had lower dose requirements to achieve the target concentrations. Extensive metabolizers patients related to the cluster of CYP3A4*1/*1 and CYP3A5*1/*3, had higher dose requirements to achieve the target concentrations. A new refined PPK model was then developed using the combination of the cluster of CYP3A5*3 and CYP3A4*22 polymorphisms, age and hematocrit to describe Tacrolimus pharmacokinetics. The CYP3A extensive metabolizers patients may require about 2-fold higher doses compared to poor metabolizers. Moreover, intermediate metabolizers may require about 1.5-fold higher doses compared to poor metabolizers., [cat] El Tacrolimus (Tac), un inhibidor de la calcineurina, s’utilitza per prevenir el rebuig agut en transplantament renal. La utilització en clínica del Tac resulta complicada degut a la seva considerable toxicitat, marge terapèutic estret i elevada variabilitat interindividual en la seva farmacocinètica. La monitorització de les concentracions mínimes del Tac s’utilitza habitualment en la individualització de dosi. No obstant, quan els valors de concentracions estan fora del marge terapèutic, les correccions de dosi es realitzen de manera empírica. La utilització de un model farmacocinètic (PK) poblacional del Tac pot ajudar al càlcul per la dosi inicial així com en l’ajust de dosi posterior a través d’eines de predicció Bayesiana que donin suport a la monitorització terapèutica. Recents descobriments en nous polimorfisme que afecten el metabolisme del Tac han portat a noves investigacions per tal de reduir la variabilitat inexplicada en l’exposició del Tac. L’objectiu principal d’aquesta tesi doctoral ha sigut dissenyar un eina poblacional de predicció Bayesiana pel càlcul de la dosi inicial de Tac i futures canvis de dosi durant el període post-trasplant: 1. Caracteritzant la farmacocinètica poblacional del Tacrolimus utilitzant un mostreig intensiu i confirmant la millor estratègia de mostreig durant la fase d’adaptació de la dosi 2. Investigant els predictors farmacogenòmics de la variabilitat interindividual del Tac 3. Implementant les noves informacions genètiques així com altres factors clínics per tal de refinar un nou model de farmacocinètica poblacional reduint la variabilitat inexplicada. Un model de PK poblacional del Tac va ser dissenyat per tal de definir acuradament la fase d’absorció i quantificar les variabilitats intra- e inter-individuals. La utilització de mostrejar concentracions pre-dosi va demostrar-se com una òptima estratègia de mostreig. Els polimorfismes CYP3A4*22 i CYP3A5*3 van demostrar-se independentment associats a l’exposició de Tac durant el primer any post-trasplant. La combinació dels dos polimorfismes es rellevant en l’elecció de la dosi inicial de Tac. S’ha dissenyat un nou model PK poblacional combinant un nou clúster dels polimorfismes CYP3A4*22 I CYP3A5*3, edat I hematòcrit per descriure la PK del Tac. Els metabolitzadors extensius pel CYP3A poden requerir aproximadament el doble de dosi respecte els metabolizadors lents.

INTRODUCCIÓN: Los polimorfismos genéticos del metabolismo en Fase I pueden dar lugar a individuos con capacidad metabólica nula (Metabolizadores lentos ML) o anormalmente alta (Ultrarrápidos MU). Este hecho se corresponde con la presencia de reacciones adversas o fracasos terapéuticos, que en último caso puede relacionarse con mayor utilización de los servicios de salud (USS). OBJETIVOS: Determinar si existe relación entre los fenotipos metabólicos, factores demográficos, clínicos y el uso de los servicios de salud. MATERIAL Y MÉTODOS: Se analizaron en una cohorte de 804 pacientes atendidos en un Centro de Atención Primaria salud los polimorfismos genéticos de CYP2D6, CYP2C9 y CYP2C19; la edad, sexo, IMC, TA y patología cardiovascular y el uso de los SS. RESULTADOS Y DISCUSIÓN: El 41% de la población presenta un fenotipo metabolizador extremo. La población estudiada mayoritaria fueron mujeres (63%) de edad entre 41 y 60 años. El uso de los SS (número de visitas) fue como promedio una al mes a Consultas del Centro de Salud (VCS), al trimestre a Especializada (VE) y al año a Urgencias hospitalarias (VH). El género (mujer) se relaciona con VE, urgencias (VU) y VH. Edad (>50) se relaciona con VCS y VE. La patología cardiovascular se relaciona con VCS, VE y VH, la hipertensión con VCS. Los ML de CYP2C9 visitan con más frecuencia el hospital. CONCLUSIÓN: Los factores relacionados con la utilización de SS, son género femenino, edad (> 50), HTA, patología cardiovascular y polimorfismos CYP2C9 (MLs)., BACKGROUND: Considering that Poor (PMs) and Ultrarapid (UMs) metabolizers of the most relevant CYPs, show differences in the metabolism of drugs and endogenous substrates and consequently in drug response and vulnerability to some diseases, they are expected to show differences in the use of Health Care Services (HCS). AIMS: To analyze whether there is a relationship between metabolic phenotypes, demographic, clinical factors and the use of HCS. METHODOLOGY: A cohort of 804 patients attending a Primary Health Care Center was genotyped for CYP2C9, CYP2C19 and CYP2D6 and evaluated for the use of HCS measured by the number of visits to primary health care (VPC), medical specialists (VMS), emergency medical service (VE), and hospitalizations (VH). Demographic (gender, age) and clinical diagnosis (cardiovascular diseases -CVD-, obesity -OB- or hypertension -HT) were also analyzed. RESULTS AND DISCUSSION: A total of 41% of the subjects were classified as either PMs or UMs. The population studied was characterized to be mostly women (63%), with an age range about 41-60 years. The use of HCS (number of visits) was on average once a month to VPC, a trimester to VMS, a year to VE. Gender (women) was related to VMS, VE and VH; Age (more than 50 years) to VPC and VMS. Among diseases, CVD was related to VPC, VMS, and VH, HT to VPC. CYP2C9 gPMs was related to VH. CONCLUSION: Gender (female), age (>50 years), CVD, HT and CYP2C9 genetic polymorphisms (PMs) were related to the use of HCS.

[ES] El acenocumarol ((RS)-4-hidroxi-3-[1-(4-nitrofenil)-3-oxobutil]cromen-2-ona) es un anticoagulante de la familia de las cumarinas comercializado como Sintrom. Su mecanismo de acción se basa en actuar como antagonista de la vitamina K, siendo su diana la enzima VKORC1. Este fármaco se administra en numerosos pacientes con problemas cardiovasculares. Sin embargo, existe una amplia variabilidad interindividual en la respuesta, por lo que el ajuste de la dosis es crítico para evitar episodios tromboembólicos o hemorragias. Dado que existen estudios farmacogenéticos que han demostrado la asociación con ciertas variaciones genéticas, es posible administrar una terapia más personalizada, mejorando la eficacia del tratamiento y reduciendo el daño generado por dosis incorrectas. El presente TFG está enfocado en apoyar el desarrollo de un dispositivo innovador y de altas prestaciones que permita el genotipado de polimorfismos de un único nucleótido relacionados con la farmacodinámica y farmacocinética del acenocumarol. La información obtenida permitirá administrar un tratamiento de acuerdo a la subpoblación alélica determinada. Las tareas de investigación se centran en la puesta a punto de dos estrategias alelo específicas para determinar la variante polimórfica rs9923231 del gen VKORC1, evaluando el efecto que posee el origen del tejido analizado en el ensayo. La recogida de muestras se realizó mediante métodos no invasivos y sencillos (epitelio bucal y cabello). La extracción de ADN genómico, en ambos casos, presentó unos rendimientos promedio adecuados (70 ng/µL y 14 ng/µL, respectivamente), así como buenos valores de pureza (A260/280≥ 1,80). La amplificación de la región diana y del gen endógeno mostró que no había diferencias significativas entre el ADN genómico de ambos orígenes. Respecto al método de discriminación entre subpoblaciones alélicas, la primera aproximación consistió en la amplificación utilizando cebadores alelo específicos tipo ARMS y posterior detección mediante técnicas de fluorescencia, electroforesis e hibridación. Particularmente, la detección basada en un ensayo de hibridación con sondas inmovilizadas en un chip, fue la estrategia que presentó mejor selectividad, discriminando el alelo nativo y mutante. Los resultados obtenidos en la asignación de los genotipos se correlacionaron totalmente con los resultados obtenidos mediante la técnica de referencia (secuenciación Sanger). La segunda aproximación consistió en la ligación alelo específica combinada con amplificación universal. Se han logrado avanzar en la generación de controles positivos y negativos y en el estudio del efecto que poseen las condiciones experimentales en el resultado del ensayo. Aunque la perfecta discriminación de las subpoblaciones no se ha logrado, los resultados muestran el potencial de esta estrategia. En conclusión, ambas aproximaciones de genotipado estudiadas son prometedores para su integración en un dispositivo transferible a un laboratorio clínico., [EN] Acenocoumarol ((RS) -4-hydroxy-3- [1- (4-nitrophenyl) -3-oxobutyl] chromen-2-one) is a coumarin anticoagulant and commercialized as Sintrom. Its mechanism of action is based on vitamin K antagonism, its target is the enzyme VKORC1. It is administered to many patients with cardiovascular problems. However, the drug response has high interindividual variability, so dose adjustment is critical to avoid thromboembolic events or bleeding. Since there are several pharmacogenetic studies that have shown the important role played by genetic variations in acenocoumarol dose requirements, it is possible to use a more personalized that would be more efficient and less harming that the administration of inadequate doses. This bachelor thesis is focused on supporting the development of an innovative and high performance device that allows for the genotyping of single nucleotide polymorphisms related to the pharmacodynamics and pharmacokinetics of acenocoumarol. The achieved information will allow administering treatment for the specific allelic subpopulation. Research activities concentrates on the development of two allele-specific strategies to determine the polymorphic variant rs9923231 of VKORC1 gene, evaluating the effect on the origin of the tissue examined in the assay. Samples were collected using non-invasive and simple methods (buccal epithelium and hair). Genomic DNA extraction, in both cases, showed adequate avarege yields (70 ng/μL and 14 ng/μL, respectively) as well as good purity values (A260/280 ≥1,80). Amplification of the target region and the endogenous gene showed that there were no significant differences between the genomic DNA of both origins. In relation to the method of discrimination among allelic subpopulations, the first approach consisted of amplification using ARMS allele-specific primers and subsequent detection techniques like fluorescence measurement, agarose electrophoresis and hybridization. Particularly, the detection based on a hybridization assay with immobilized probes on a chip, was the strategy that presented better selectivity, discriminating the wild-type allele and mutant. The results obtained in genotypes’ assignment were totally correlated with the results obtained by reference technique (Sanger sequencing). The second approach was based on allele-specific ligation combined with universal amplification. Ligation’s progress has been made in the generation of positive and negative controls and in the studies on the effect of the experimental conditions on assay results. Although perfect discrimination of subpopulations has not been achieved, the results show the potential of this strategy. In conclusion, both studied approaches of genotyping are promising for their integration into a device transferable to a clinical laboratory.

Doentes com dislipidemia grave necessitam de tomar medicação antidislipidémica para diminuir as concentrações elevadas de colesterol de forma a reduzirem o seu elevado risco cardiovascular. Distintos tipos e/ou doses de estatinas levam a diferentes níveis de redução dos níveis de LDL-C, mas existe uma grande variação interpessoal na resposta, que se pensa estar associada a variantes nos genes envolvidos na farmacodinâmica e farmacocinética desta classe de fármacos. Este trabalho tem como objetivo determinar a prevalência de genótipos associados a uma menor eficácia ou a um maior risco de efeitos secundários adversos no tratamento com estatinas na população portuguesa. Foram genotipados vários SNPs envolvidos no metabolismo, absorção, transporte e/ou excreção dos vários tipos de estatinas numa amostra de adultos da população portuguesa proveniente das diferentes regiões do país. A variante SLCO1B1*5, associada com um maior risco de desenvolver miopatia com o tratamento com sinvastatina, tem uma frequência 2 vezes superior na nossa amostra do que o descrito nas bases de dados populacionais. Este fato, aliado ao grande aumento de consumo nacional de estatinas, principalmente de sinvastatina, é um fator importante que deve ser considerado na tomada de decisão da prescrição de antidislipidémicos. Patients with severe dyslipidaemia need to take antidislipidemic medication to lower the high cholesterol concentrations to decrease their increased cardiovascular risk. Different types and/or dose of statins lead to different levels of LDL-C reduction, but there is a large interpersonal variation in the response, which is thought to be associated with variants in genes involved in pharmacodynamics and pharmacokinetics of this class of drugs. This work aims to determine the prevalence of genotypes associated with a lower efficacy or a higher risk of adverse side effects in the treatment with statins in the Portuguese population. Several SNPs involved in the metabolism, absorption, transport and/or excretion of the various types of statins were genotyped in a sample of adults from the Portuguese population from different regions of the country. The SLCO1B1*5 variant, associated with an increased risk of developing myopathy on simvastatin treatment, has a frequency 2 times higher in our sample than described in the population databases. This fact, coupled with the large increase in national consumption of statins, mainly simvastatin, is an important factor that should be considered in the decision-making of the prescription of antidislipidemics. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Treball 1: Caracterització de les diferents alteracions de FLT3 en LLA i LMA en una sèrie de pacients pediàtrics: incidència, impacte pronòstic i correlació amb altres variables clínico-biològiques En aquest treball s’analitza l’estat mutacional i nivell d’expressió en mostres de 204 pacients pediàtrics afectes de diferents subtipus de leucèmia aguda (LLA-B: 144; LLA-T: 23; LMA: 36 i una MPAL), uniformement tractats en el nostre centre segons protocols de la Sociedad Española de Hematología y Oncología Pediátricas (SEHOP). A més de la caracterització de l’estat de FLT3 també vam analitzar la correlació amb altres variables clínico-biològiques i l’impacte pronòstic de la sobreexpressió de FLT3. En la nostra sèrie de pacients el número de mutacions de FLT3 va ser escàs. Vàrem observar que l’expressió de FLT3 es correlacionava amb el llinatge de la leucèmia i el subtipus genètic; així, els pacients amb LLA-MLL+ són els que mostraren una expressió més elevada. En el cas de les LLA-B la sobreexpressió s’associava significativament a l’edat (lactants), leucocitosi i reordenament MLL. Cal destacar que la sobreexpressió de FLT3 no va mostrar una importància pronòstica (SG ni SLE) en els pacients amb LLA-B, LLA-T ni LMA. Nogensmenys, sí que vàrem demostrar un impacte pronòstic d’altres factors ja descrits clàssicament com l’edat, la hiperleucocitosi, l’afectació del SNC, la categorització en subgrups de risc genètic, la presència del reordenament de MLL i la presència de MRM al final d’inducció. Treball 2: Correlació de FLT3 amb el transport intracel·lular de citarabina per hENT1. Impacte de diferents inhibidors de FLT3 sobre el transport i efectivitat de la citarabina Es tracta d’un treball on s’analitza la relació funcional entre el receptor FLT3 i els principals transportadors d’anàlegs de nucleòsids en mostres de 50 pacients pediàtrics amb diferents subtipus de leucèmia aguda (LLA-B: 44; LLA-T: 2; LMA: 4), uniformement tractats segons protocols de la Sociedad Española de Hematología y Oncología Pediátricas (SEHOP), en el cas de les LLA: SHOP-LAL-99, 05, 13 i en el cas de les LMA SHOP-LAM-00 & 07. Descrivim la correlació positiva entre FLT3 i hENT1 a nivell genòmic, proteic i funcional, és a dir, com FLT3 modula el transport de citarabina a l’interior de la cèl·lula. A més, demostrem com la inhibició de FLT3 mitjançant fàrmacs inhibidors (PKC402, AC220) disminueix significativament el transport de citarabina, posant de manifest que l’ordre com s’administren aquests fàrmacs és important i pot tenir efectes sobre la seva eficàcia., FLT3 abnormalities are negative prognostic markers in acute leukemia. Infant leukemias are a subgroup with frequent MLL (KMT2A) rearrangements, FLT3 overexpression and high sensitivity to cytarabine, but dismal prognosis. Cytarabine is transported into cells by Human Equilibrative Nucleoside Transporter-1 (hENT1, SLC29A1), but the mechanisms that regulate hENT1 in acute leukemia have been scarcely studied. We explored the expression and functional link between FLT3 and main cytarabine transporters in 50 pediatric patients diagnosed with acute lymphoblastic leukemia and MLL rearrangement (ALL-MLL+) and other subtypes of leukemia, and in leukemia cell lines. A significant positive correlation was found between FLT3 and hENT1 expression in patients. Cytarabine uptake into cells was mediated mainly by hENT1, hENT2 and hCNT1. hENT1-mediated uptake of cytarabine was transiently abolished by the FLT3 inhibitor PKC412, and this effect was associated with decreased hENT1 mRNA and protein levels. Noticeably, the cytotoxicity of cytarabine was lower when cells were first exposed to FLT3 inhibitors (PKC412 or AC220), probably due to decreased hENT1 activity, but we observed a higher cytotoxic effect if FLT3 inhibitors were administered after cytarabine. FLT3 regulates hENT1 activity and thereby affects cytarabine cytotoxicity. The sequence of administration of cytarabine and FLT3 inhibitors is important to maintain their efficacy.

A varfarina é amplamente utilizada na prevenção de eventos tromboembólicos. A Razão Normalizada Internacional (RNI) constitui o parâmetro de escolha para monitorar a resposta à varfarina e o tempo em que o RNI permanece na faixa terapêutica (TTR) é utilizado na avaliação da qualidade da anticoagulação. O objetivo desse estudo foi (1) avaliar a associação dos polimorfismos CYP2C9*2 (rs1799853), CYP2C9*3 (rs1075910) e VKORC1-G1639A (rs9923231) e fatores não genéticos com doses de varfarina e TTR e (2) criar algoritmos de predição de doses de varfarina e TTR. Estudo de coorte retrospectivo que incluiu 312 pacientes em uso crônico de varfarina recrutados em clínica de anticoagulação (CA) de hospital universitário brasileiro. A indicação da anticoagulação oral incluiu fibrilação atrial (FA), prótese mecânica de válvula cardíaca ou histórico de acidente vascular encefálico isquêmico. Os genótipos foram determinados utilizando Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)em tempo real e o TTR foi calculado pelo método de Rosendaal. Foi investigada a associação de dados sociodemográficos, clínicos, comportamentais, farmacoterapêuticos e genéticos com doses de varfarina e RNI registrados entre 2009-2015. Para análise dos dados, foi feita regressão multivariada e construção da Curva Característica de Operação do Receptor (ROC). A idade média dos pacientes foi 60,4 (±13,5) anos, sendo 59,9% do sexo feminino. Poucos pacientes (12,8%) utilizaram doses semanais 60%) e 64 (20,5%) ótima qualidade da terapia anticoagulante (TTR 75%). Em análise multivariada, o aumento do número de relatos de não administração à varfarina (RC 1,60, IC 1,112,35; p=0,013), o aumento do número de absenteísmo nas consultas de controle do RNI (RC 1,66, IC 1,22 2,30; p=0,002) e o aumento do número de ajustes de dose da varfarina (RC 2,32, IC 1,87 2,96; p 60%) and 64 (20.5%) had an excellent quality of anticoagulation (TTR 75%). In multivariate analysis, the increase in the number of reports of non-adherence to warfarin (OR 1.60, CI 1.11-2.35, p=0.013), the increase in absenteeism in the INR control visits (OR 1.66, CI 1.22-2.30, p=0.002) and the increase in the number of warfarin dose adjustments (OR 2.32, CI 1.87-2.96, p

La leucemia mieloide crónica (LMC) se caracteriza por el rearreglo BCR-ABL1 sin embargo no se conocen losfactores genéticosque pueden influir en el desarrollo de la enfermedad y en la respuesta al tratamiento. El objetivo de este trabajo fue evaluar diversos polimorfismos genéticos a fin de identificar nuevos marcadores de susceptibilidad y de respuesta farmacogenética en LMC. Se evaluaron 23 polimorfismos en los genes CYP1A1, CYP1B1, ABCB1, ABCC3, hOCT1, NQO2, GSTP1,GSTM1, GSTT1 y TP53en 141 pacientes con LMC bajo tratamiento con inhibidores de tirosina kinasas (ITKs). Se demostró que la combinación de los genotipos GSTP1-GG con GSTM1-nulo oGSTT1-nulo son factores de riesgo para la enfermedad y que el polimorfismo en TP53 es un factor protector. Por otro lado, se encontróque los polimorfismos en los genes NQO2, ABCB1y el haplotipo de NQO2, se asociaron con mal pronóstico ycon falta de respuesta a los ITKs.Además, los pacientes con 2 o más copias de GSTM1 mostraron peor respuesta al tratamiento.Por último, se determinó unscore genético estableciendo que los portadores de 3-4genotipos de riesgo de los genes CYP1B1, TP53, NQ02 y GSTP1 tienen significativamente menor sobrevida libre de eventos. A su vez, los portadores de 1-2genotipos de riesgo de los genesABCB1y GSTP1 tienen mayor riesgo de fallar al tratamiento.En conclusión, los resultados obtenidos sugieren que los polimorfismos evaluados son co-factores de susceptibilidad al desarrollo de LMC y además son biomarcadores con valor pronóstico y predictivo de la eficacia del tratamiento con ITKs. Chronic myeloid leukemia (CML) is associated to BCR-ABL1 oncogene however genetic factors that may influences disease susceptibility and treatment response are still unknown. The aim of this study was to characterize several genetic polymorphisms in order to identify susceptibility and pharmacogenetic markers in CML. Genetic polymorphisms in CYP1A1, CYP1B1, ABCB1, ABCC3,hOCT1, NQO2, GSTP1, GSTM1, GSTT1 and TP53 genes were evaluated in 141 patients with CML treated with tyrosine kinase inhibitors (TKIs). The combinations of GSTP1-GG with GSTM1-null orGSTT1-null genotypes were risk factors for disease susceptibility but the polymorphism in TP53 has a protective role for CML development. Moreover, genetic polymorphisms in NQO2, ABCB1 and the haplotypes in NQO2, were associated with poor prognosis and lack of response to TKIs. In addition, patients with 2 or more copies of GSTM1showed worse treatment response. Finally, a genetic score was determined showing that patients with 3-4 risk genotypes of CYP1B1, TP53, NQ02 and GSTP1 genes had a significantly lower event free survival. Moreover, patients carrying 1-2 risk genotypes of ABCB1 and GSTP1 genes are more likely to fail TKI treatment. In conclusion, this study suggests that the genetic polymorphisms of these genes are involved in the disease susceptibility and are prognostic and predictive biomarkers of ITKs treatment efficacy. Fil: Weich, Natalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.