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Sabe-se que o melanoma cutâneo é uma doença maligna que ocorre devido a diversas condições que causam alterações nos melanócitos. A princípio, inicia-se com coloração nivelada e externa na pele e, com o decorrer da doença, ocorre progressão vertical. Dessa forma, mostram-se como métodos eficazes de diagnóstico o exame físico, a dermatoscopia, a biópsia e a tomografia computadorizada. Assim, é importante analisar a assimetria, a irregularidade das bordas, a pigmentação e o diâmetro da lesão. Visto que esta patologia possui índice elevado de mortalidade e considerando que a população desconhece sobre as lesões suspeitas, é relevante que sejam realizadas orientações a respeito da prevenção para reduzir as taxas de incidência desta doença. O objetivo desta revisão de literatura é abordar as particularidades do melanoma cutâneo, abordando as características clínicas e histopatológicas, e analisar as estatísticas do Instituto Nacional do Câncer (INCA) a respeito das estimativas para o ano de 2022. Para isso, foram realizadas pesquisas nas bibliotecas virtuais Scielo e MedLINE, buscando artigos do período de 2017 a 2022 e, ademais, foram realizadas análises das estatísticas do INCA para o ano de 2022.

40 p. La metástasis es la responsable del 90% de la mortalidad asociada al cáncer y es un proceso de especial relevancia en el melanoma cutáneo debido a su elevada tendencia metastásica. Este proceso se sustenta tanto en alteraciones a nivel de las células tumorales como en el microambiente que las rodea (TME). La adquisición de motilidad por parte de las células tumorales es un evento esencial, al igual que la activación de fibroblastos o células funcionalmente análogas de otros órganos como las estrelladas hepáticas (HSC). En consecuencia, es necesario, sobre todo en el melanoma, la identificación de proteínas clave relacionadas con la progresión tumoral maligna. La proteína inductora de migración celular y de unión a hialuronano (CEMIP) se ha relacionado con la migración de varios modelos tumorales y con la capacidad de desarrollar metástasis, si bien no existen datos en relación al melanoma. Así mismo, se desconoce su efecto sobre células estromales susceptibles de formar el TME. La histamina y el TGF-β son moléculas relacionadas con la inmunomodulación y la fibrosis, aspectos estrechamente relacionados con la modulación del TME en contextos tumorales. Además, se ha observado su capacidad para regular los niveles endógenos de CEMIP en fibroblastos dérmicos. Por ello, en este estudio, se han modulado los niveles de CEMIP con histamina y TGF-β y se ha analizado el papel de la proteína en la motilidad y la activación de células humanas de melanoma metastásico (A2058, Colo800) y de células del estroma de órganos íntimamente ligados al desarrollo del melanoma cutáneo (fibroblastos dérmicos Detroit551, HSC LX-2). Los tratamientos con histamina y TGF-β aumentaron y disminuyeron, respectivamente, los niveles endógenos de CEMIP en las líneas Detroit551 y LX-2. Las líneas de melanoma no respondieron a esta regulación. Por ello, se analizó la correlación entre dicha regulación y la motilidad de los modelos celulares que respondieron a la misma. La modulación indirecta de los niveles endógenos de CEMIP con histamina y TGF- β se correlacionó con la motilidad de las líneas Detroit551 y LX-2. La implicación de CEMIP en la motilidad de la línea LX-2 se corroboró mediante ensayos de sobrexpresión de dicha proteína. Dado que la activación de fibroblastos asociados al tumor (CAFs) implica la adquisición de un fenotipo miofibroblástico caracterizado por la adquisición de motilidad y la expresión de α-SMA, se analizó la interrelación entre niveles celulares de CEMIP y α-SMA. Ni la IV modulación directa (sobreexpresión), ni la indirecta (histamina y TGF-β) de CEMIP se relacionaron con la expresión α-SMA en las líneas Detroit551 y LX-2, lo que sugiere que CEMIP podría inducir un perfil de activación diferente caracterizado por la adquisición de motilidad y por la expresión de otros marcadores diferentes de α-SMA. Quedan por determinar las consecuencias de lo observado sobre la propia progresión del melanoma cutáneo.

[ES] El melanoma es el tipo de cáncer de piel más mortífero y peligroso, ya que tumores de pequeño tamaño pueden generar metástasis. Hasta la fecha, se ha tratado de clasificar desde el punto de vista clínico, epidemiológico y molecular, empleándose actualmente el nivel de exposición solar y la localización del tumor como criterios principales para dividir en distintos grupos a los pacientes de melanoma. En 1998, David Whiteman y colaboradores propusieron un "modelo de vías divergentes" para el desarrollo del melanoma. Este presentaba dos vías: una vinculada a la proliferación melanocítica (nevogénica) y otra relacionada con la exposición solar crónica (CSD). Corroborado desde el punto de vista clínico y epidemiológico, todavía no se ha aportado una caracterización molecular en profundidad. A nivel general se habían identificado genes cuyas mutaciones eran relevantes para el desarrollo del melanoma, como por ejemplo KIT. Sin embargo, todavía se había de estudiar con más detalle la distribución de estas mutaciones entre los distintos subgrupos de melanoma, así como su posible valor pronóstico. En esta tesis se han empleado técnicas de secuenciación - masiva y tradicional - para caracterizar los perfiles mutacionales de las poblaciones del modelo de vías divergentes. Encontramos diferencias tanto en el número de mutaciones como en los genes afectados. También hemos visto cómo los melanomas con mutaciones en KIT parecen desarrollarse por una vía independiente de la etiopatogenia conocida, careciendo el estatus mutacional de este gen de valor pronóstico para la supervivencia de los pacientes., [CA] El melanoma és el tipus de càncer de pell més mortífer i perillós, ja que fins els tumors de menor mida poden acabar generant metàstasi. Al llarg dels anys, s'ha tractat de classificar des del punt de vista clínic, epidemiològic i molecular. Les classificacions actuals utilitzen el nivell d'exposició solar i la localització tumoral per dividir en diferents grups als pacients de melanoma. Al 1998, David Whiteman i col·laboradors proposaren un model de desenvolupament del melanoma que anomenaren "model de vies divergents". Aquest presentava dos vies per la melanomagènesi: una vinculada a la proliferació melanocítica (nevogènica) i l'altra relacionada amb l'exposició solar crònica (CSD). Malgrat aquest model fou corroborat des del punt de vista clínic i epidemiològic, encara no s'ha aportat una caracterització molecular en profunditat. A nivell general s'havien identificat gens les mutacions dels quals eren rellevants per al desenvolupament del melanoma, com el gen KIT. Però, encara s'havia d'estudiar amb més cura la distribució d'estes mutacions entre els distints subgrups de melanoma, així com el seu possible valor pronòstic. En aquesta tesi s'han emprat tècniques de seqüenciació -massiva i tradicional- per caracteritzar els perfils mutacionals de les dues poblacions proposades pel model de vies divergents, trobant diferències tant al nombre de mutacions com als gens afectats. També hem vist com els melanomes mutats en KIT semblen desenvolupar-se per una via independent de l'etiopatogènia coneguda, mancant l'estatus mutacional d'aquest gen de valor pronòstic per la supervivència dels pacients., [EN] Melanoma is the deadliest and most dangerous type of skin cancer, given that a small tumor can spread and result in metastasis. Over the years, classifications have been made either from a clinical, epidemiological or molecular point of view. Current classifications use the degree of solar exposure and tumoral location to divide into different melanoma groups. In 1998, David Whiteman and collaborators proposed the divergent pathway model for melanoma development. This presented two pathways to melanomagenesis: one related to melanocytic proliferation (nevogenic) and the other related to chronic sun exposure (CSD). Despite corroborations of this model from the clinic and epidemiology, it is yet to be molecularly characterized in depth. At a general level, different genes had been identified with relevant mutations for the development of melanoma, as is the gene KIT. However, there was a lack of knowledge on how these mutations were distributed among different melanoma subgroups, as well as the potential prognostic value. In this thesis we have implemented sequencing techniques - both massive and traditional - to characterize the mutational profile of the two populations proposed by the divergent pathways model. We found differences both in the number of mutations and in the genes carrying the mutations. We have also seen how melanomas harboring KIT mutations seem to develop in a way which is independent from the known etiology, and how the mutational status of this gene lacks prognostic value on the outcome of the patients.

A male 15-year-old captive Siberian tiger (Panthera tigris altaica) developed pelvic limb hypermetry over the past 10 years. Recently, an ulcerated black nodule located caudally to the right ear was observed. The animal was submitted to surgery for removing the tumor, but died during anesthetic recovery. At necropsy, another infiltrative nodule was observed caudally to the right ear. Histologically, both nodules corresponded to melanocytic neoplasia, varying from heavily pigmented to amelanotic, with metastasis to mediastinal lymph nodes, spleen and lung. Lipofuscinosis and corpora amylacea were histologically observed in the central nervous system. Macroscopic and histologic findings confirmed the diagnosis of skin metastatic melanoma in a captive adult Siberian tiger. RESUMO Um tigre-siberiano (Panthera tigris altaica) de cativeiro, macho, de 15 anos de idade, apresentou hipermetria dos membros pélvicos nos últimos 10 anos, e recentemente, foi observado um nódulo preto e ulcerado caudalmente à orelha direita. O animal foi submetido à cirurgia para remoção do nódulo e morreu durante a recuperação anestésica. À necropsia, outro nódulo infiltrativo, foi detectado caudalmente a orelha direita. Histologicamente, ambos os nódulos correspondiam à neoplasia melanocítica, com células variando de fortemente pigmentadas a amelanóticas, com metástase para linfonodos mediastinais, baço e pulmão. Havia lipofucsinose e corpora amilácea no sistema nervoso central. Os achados macroscópicos e histológicos confirmam o diagnóstico de melanoma cutâneo metastático em um tigre-siberiano adulto de cativeiro.

La funció del sistema immunitari és eliminar qualsevol agent infecciós o cèl·lula danyada, propocionant una protecció a llarg termini contra aquests. A més a més, disposa de diferents mecanismes de selecció i tolerància per tal de controlar als limfòcits autoreactius. Defectes en la regulació d’aquests mecanismes poden donar lloc a l’aparició de malalties autoimmunitàries com la Diabetis Tipus 1 (T1D), la qual es caracteritza per la destrucció selectiva de les cèl·lules β pancreàtiques. Malgrat aquestes són la principal diana de l’atac autoimmunitari, no són la única. Alteracions en les neurones sensorials aferents que innerven el pàncrees i que tenen els seus cossos cel·lulars als ganglis dorsals raquidis (DRG), s’han relacionat amb el desenvolupament de la T1D. En el present treball, es va realitzar un anàlisi de l’expressió de ARNm en cèl·lules dels DRG que demostra la presència d’alteracions funcionals en aquest tipus cel·lular, avalant la hipòtesi que la T1D és una malaltia multisistèmica i que, entre el conjunt de cèl·lules afectades per l’atac autoimmunitari, s’hi podrien trobar també les cèl·lules dels DRG. Aquestes presenten un conjunt d’alteracions en l’expressió de diverses proteïnes que podrien generar una resposta autoimmunitària contra autoantígens tant del Sistema Nerviós Perifèric com de les cèl·lules β. Algunes d’aquestes alteracions es van veure també en leucòcits de sang perifèrica, esdevenint possibles biomarcadors de susceptibilitat a desenvolupar T1D. Tot i així, caldria fer més estudis per tal de comprendre el paper d’aquesta neurodegeneració en el desenvolupament de la T1D així com per determinar quin o quins gens podrien ser bons biomarcadors per a detectar pacients susceptibles a desenvolupar T1D. Paral·lelament als estudis de les cèl·lules dels DRG, en el transcurs de l’estudi del paper de la periferina com a autoantigen en la T1D, es va veure que un dels pèptids derivats d’aquesta molècula (DIF-P) estimulava la producció de citocines proinflamatòries per part dels monòcits i induïa la mort de diversos tipus cel·lulars. A més a més, aquestes propietats funcionals es trobaven alterades quan es modificava el pèptid amb una cua de 3 lisines (DIF-P3K) o de 8 arginines (DIF-P8R), probablement degut a que aquestes cues d’aminoàcids els converteixen en pèptids penetrants cel·lulars (CPPs) que permeten la seva millor internalització. Donades les propietats citotòxiques i immunoestimuladores de DIFP, DIF-P3K i DIF-P8R, es va decidir fer un salt als estudis in vivo per tal d’estudiar el seu potencial com a agents immunterapèutics contra el càncer. Els diversos estudis in vivo realitzats fins al moment demostren l’activitat antitumoral dels pèptids DIF en els models de melanoma i mastocitoma, indicant el seu ús potencial en el tractament de càncer humà, ja sigui com a agents citostàtics i/o immunoterapèutics, i d'aquesta manera passar a formar part de l'arsenal terapèutic d'aquesta malaltia. La función del sistema inmunitario es eliminar cualquier agente infeccioso o célula dañada, propocionando una protección a largo plazo contra estos. Además, dispone de diferentes mecanismos de selección y tolerancia para controlar a los linfocitos autorreactivos. Defectos en la regulación de estos mecanismos pueden dar lugar a la aparición de enfermedades autoinmunes como la Diabetes Tipo 1 (T1D), que se caracteriza por la destrucción selectiva de las células β pancreáticas. A pesar de que éstas son la principal diana del ataque autoinmunitario, no son la única. Alteraciones en las neuronas sensoriales aferentes que inervan el páncreas y que tienen sus cuerpos celulares en los ganglios dorsales raquídeos (DRG), se han relacionado con el desarrollo de la T1D. En el presente trabajo, se realizó un análisis de la expresión de ARNm en células de los DRG que demuestra la presencia de alteraciones funcionales en este tipo celular, avalando la hipótesis de que la T1D es una enfermedad multisistémica y que, entre el conjunto de células afectadas por el ataque autoinmunitario, se podrían encontrar también las células de los DRG. Estas presentan un conjunto de alteraciones en la expresión de varias proteínas que podrían generar una respuesta autoinmune contra autoantígenos tanto del Sistema Nervioso Periférico como de las células β. Algunas de estas alteraciones se observaron también en leucocitos de sangre periférica, convirtiéndose en posibles biomarcadores de susceptibilidad a desarrollar T1D. Sin embargo, habría que hacer más estudios para comprender el papel de esta neurodegeneración en el desarrollo de la T1D así como para determinar qué genes podrían ser buenos biomarcadores para detectar pacientes susceptibles a desarrollar T1D. Paralelamente a los estudios de las células de los DRG, en el transcurso del estudio del papel de la periferina como autoantígeno en la T1D, se vió que uno de los péptidos derivados de esta molécula (DIF-P) estimulaba la producción de citoquinas proinflamatorias por parte de los monocitos e inducía la muerte de distintos tipos celulares. Además, estas propiedades funcionales estaban alteradas cuando se modificaba el péptido con una cola de 3 lisinas (DIF-P3K) o de 8 argininas (DIF-P8R), probablemente debido a que estas colas de aminoácidos los convertían en péptidos penetrantes celulares (CPPs) y permitían su mejor internalización. Dadas las propiedades citotóxicas y inmunoestimuladoras de DIF-P, DIF-P3K y DIF-P8R, se decidió dar un salto a los estudios in vivo para estudiar su potencial como agentes immunterapéuticos contra el cáncer. Los diferentes estudios in vivo realizados hasta el momento demuestran la actividad antitumoral de los péptidos DIF en los modelos de melanoma y mastocitoma, indicando su uso potencial en el tratamiento de cáncer humano, ya sea como agentes citostáticos y/o inmunoterapéuticos, y de este modo pasar a formar parte del arsenal terapéutico de esta enfermedad. The main function of the immune system is to eliminate any infectious agents or damaged cells, providing long-term protection against them. Moreover, it has different selection and tolerance mechanisms in order to control self-reactive lymphocytes. Defects in the regulation of these mechanisms can lead to the onset of autoimmune diseases such as Type 1 Diabetes (T1D), which is characterized by the selective destruction of pancreatic β cells. Although these cells are the main target of the autoimmune attack, they are not the only one. Alterations in the afferent sensory neurons innervating the pancreas and having their cell bodies in the Dorsal Root Ganglia (DRG) have been linked to T1D development. In the present study, we performed an analysis of mRNA expression in DRG that demonstrates the presence of functional alterations in this cell type, supporting the hypothesis that T1D is a multisystemic disease and that DRG cells can be found among the set of cells affected by the autoimmune attack. These cells present a set of alterations in the expression of various proteins that could generate an autoimmune response against autoantigens of both the Peripheral Nervous System and β cells. Some of these alterations were also found in peripheral blood leukocytes, suggesting their possible role as biomarkers of susceptibility to develope T1D. However, further studies are needed to better understand the role of this neurodegeneration in the development of T1D as well as to determine which genes could be good biomarkers for detecting patients susceptible to develope T1D. In parallel with the DRG cells studies, in the course of the study of the role of peripherin as an autoantigen in T1D, it was seen that one of the peptides derived from this molecule (DIF-P) stimulated the production of proinflammatory cytokines by monocytes as well as inducing the death of various cell types. In addition, these functional properties were altered when the peptide was modified with a 3-lysine (DIF-P3K) or 8-arginine (DIF-P8R) tail, probably because these amino acid tails turn them into Cell Penetrating Peptides (CPPs) allowing for better internalization. Given the cytotoxic and immunostimulatory properties of DIF-P, DIF-P3K, and DIF-P8R, it was decided to make a leap into in vivo studies to study their potential as immunotherapeutic agents against cancer. The different in vivo studies performed so far demonstrate the antitumor activity of DIF peptides in the models of melanoma and mastocytoma, indicating their potential use in the treatment of human cancer, either as cytostatic and/or immunotherapeutic agents, and this way become part of the therapeutic arsenal of this disease.

O câncer de pele é a neoplasia de maior incidência no Brasil. Essa doença apresenta diferentes linhagens: câncer de pele não melanoma (CPNM) e o tipo melanoma (MC) sendo esses os tipos mais comuns. O CPNM é o mais frequente e trata-se de um tumor de crescimento lento, localmente invasivo e de bom prognóstico se tratado de forma adequada e oportuna, todavia a demora no diagnóstico pode levar a ulcerações e deformidades físicas graves. Esse estudo constitui uma revisão integrativa da literatura, com foco sobre o tema a ser estudado; avaliação dos dados aplicando critérios de inclusão e exclusão; análise dos dados extraindo das fontes primárias as características da amostra e método. A exposição aos raios ultravioletas pode causar alterações no DNA dos melancólicos resultando no risco de carcinogênese em nevos melanócitos na infância. O período da infância e a adolescência são considerados períodos críticos de vulnerabilidade aos efeitos da exposição solar. Esse comportamento pode levar ao desenvolvimento do câncer não melanoma ou do melanoma maligno na vida adulta. Foi constatado que o índice de câncer de pele é maior em pacientes com idade superior a 60 anos do que em jovens, pois apresentam um número maior de lesões. Porém é importante abordar o assunto sobre o desenvolvimento da neoplasia ainda na infância, e as medidas adequadas de fotoproteção

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia O melanoma cutâneo é a forma mais alarmante de cancro de pele, sendo um tumor agressivo e amplamente resistente aos tratamentos. Nas últimas décadas, a sua incidência aumentou nas populações Caucasianas. A resistência e a toxicidade atribuídas aos fármacos quimioterapêuticos convencionais continuam a ser os principais desafios no tratamento do melanoma cutâneo. A excisão cirúrgica continua a ser a opção terapêutica de primeira linha, contudo novas estratégias tecnológicas inovadoras, como a nanotecnologia, têm sido estudadas no sentido de oferecer alternativas terapêuticas cujo objetivo é reduzir a morbidade e a mortalidade do melanoma cutâneo. Os cientistas esperam avanços médicos com a aplicação de nanosistemas no diagnóstico e tratamento do melanoma cutâneo. A nanotecnologia representa uma mudança de paradigma, com o potencial de melhorar a administração de fármacos, minimizar a sua toxicidade e atenuar a resistência aos tratamentos. Diversos estudos demonstraram que uma gama diversificada de nanosistemas pode ser utilizada para contornar as limitações atuais das terapias disponíveis para o melanoma cutâneo. Nestas circunstâncias, há uma necessidade urgente de reformular fármacos de interesse usando a nanotecnologia como uma abordagem alternativa promissora.Para aplicar a nanotecnologia no campo biomédico, é crucial entender as propriedades físico-químicas dos nanosistemas, a sua interação com organismos biológicos e seus subprodutos.A primeira parte desta revisão contempla um resumo da fisiopatologia do melanoma cutâneo e das terapias disponíveis. A segunda parte apresenta uma revisão abrangente das diferentes abordagens nanoterapêuticas até agora investigadas para o tratamento do melanoma cutâneo. Cutaneous melanoma (CM) is the most alarming form of skin cancer, being an aggressive and multidrug-resistant tumor. Over the last decades, the incidence rate of CM has increased in Caucasians. The multidrug resistance and the toxicity attributed to conventional systemic chemotherapeutic agents remain the major challenges in CM treatment. The surgical excision continues to be the first-line therapeutic option, nevertheless fresh innovative technological strategies, such as nanotechnology are being explored in order to offer therapeutic alternatives aiming the reduction of CM morbidity and mortality.Scientists are expecting medical advances with the application of nanosystems in CM diagnosis and treatment. Nanotechnology represents a paradigm shift with the potential to improve drug delivery, minimize drug toxicity and mitigate drug resistance. Several studies have demonstrated that a diverse array of nanosystems can be used to circumvent the current limitations of CM available treatments. Under these circumstances, there is an urgent need to reformulate drugs of interest using nanotechnology as an alternative promising approach. To apply nanotechnology in the biomedical field, it is crucial to understand the physicochemical properties of the nanosystems, their interaction with biological organisms and their by-products.The first part of this review provides a summary of CM pathophysiology and available therapies. The second part presents a comprehensive review of the different nanotherapeutic approaches hitherto investigated against CM.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2016. Entre os tipos de câncer de pele, o melanoma é responsável por 4% dos casos. É o mais agressivo, por possuir um alto potencial metastático. Como proposta para um tratamento mais efeciente e que cause menos danos estéticos, foi utilizada a Terapia Fotodinâmica (TFD) como um sistema que proporcionasse uma futura utilização por via tópica. No presente trabalho as micelas de Pluronic® F127 contendo 1, 5 e 10 μg/mL do fotossensibilizante alumínio-cloro-ftalocianina (NP F127/AlClPc), as micelas foram utilizadas para investigar os efeitos da TFD em células de melanoma murino. NP F127/AlClPc foram avaliadas quanto a sua estabilidade e caracterização fotofísica e fotoquímica O diâmetro hidrodinâmico (DH) médio de NP F127/AlClPc com 1 μg/mL de ALCLPc foi de 22 nm ; 42,03 nm para 5 μg/mL e 152,9 nm para 10 μg/mL a ~25 °C. O índice de polidispersão foi 0,43 para 1 μg/mL; 0,68 para 5 μg/mL; 0,37 para 10 μg/mL, e o potencial zeta (PZ) de -2,71mV para 1 μg/mL; -0,11mV para 5 μg/mL e -0,58 mV para 10 μg/mL, mostrando que as micelas são polidispersas. NP F127/AlClPc apresentou máxima absorbância a 670 nm e fluorescencia a 680 nm.Duas linhagens celulares foram utilizadas: B16F10 (melanoma murino) e B16F10FF (melanoma murino modificadas com FireFly Luciferase). Somente a irradiação com a luz LED ou a exposição das células a diferentes concentrações de NP F127/AlClPc não causaram toxicidade em ambas as linhagens celulares. Quando aplicada a TFD com fluência de 85,1 J/cm2. Os resultados de citotoxicidade da NP F127/AlClPc, com vários tempos de incubação, mostrou uma maior eficácia em células B16F10 do que em células B16F10FF. A concentração de 1 μg/mL; 5 μg/mL;10 μg/mL mostraram-se mais eficaz no tempo de incubação de 20 e 25 minutos para as células B16F10. Pelo mesmo tempo de exposição de 25 minutos, as células B16F10FF mostraram-se mais resistentes ao tratamento. A citotoxicidade sem irradiação e com irradiação do LED mostrou que as micelas não causaram toxicidade em ambas as linhagens celulares. As células expostas à NP F127/AlClPc nas concentração de 1 μg/mL; 5 μg/mL; 10 μg/mL por 15, 20 e 25 minutos e irradiadas com a fluência de 85,1 J/cm2, mostraram que células B16F10 tratadas com a NP F127/AlClPc 10 μg/mL apresentaram viabilidade de 25%, enquanto as células B16F10FF sob as mesmas condições apresentaram viabilidade de 64%. A citotoxicidade nas células B16F10FF foi de 7% para o tempo de incubação de 20 minutos e de 3 a 4% nos tempos de 15 e 25 minutos, quando estas células sofream duas incubações (24-48 horas) e duas aplicações de TFD (24-48 horas). Pode-se concluir então que, a NP F127/AlClPc apresentou características fotofísicas e fotoquímicas favoráveis para o seu uso da TFD. Melanoma accounts for 4% of cases among skin cancer types. But it is the most aggressive with a high metastatic potential. Photodynamic therapy (PDT) was used as an alternative efficient and less damage inducing treatment in comparison to chemotherapy for topical application. In the present work Pluronic® F127 micelles containing 1, 5 and 10 μg /mL of the photosensitizer aluminum-chlorophthalotocyanine (F127/AlClPc). The micelles were used to investigate the effects of PDT on murine melanoma cells. Their stability, photophysical characteristics and photochemistry was evaluated. The hydrodynamic diameter for the micelles carrying 1μg/mL, 5μg/mL and 10μg/mL was 22nm, 42.04nm and 152.9nm respectively. The poly dispersity index for the micelles with 1mg/mL, 5mg/mL and 10mg/mL were 0.43, 0.68 and 0.37 respectively. The zeta potential for the micelles with 1μg/mL, 5μg/mL and 10μg/mL F127/AlClPc were -2.7mV,-0.11mV and -0.58mV. The micelles showed maximum absorbance at 670nm and fluorescence at 680nm. Two cell lines were evaluated B16F10 (murine melanoma) and B16F10FF (murine melanoma modified with firefly luciferase). The irradiation of LED with light or with different concentration of F127 / AlClPc did not cause toxicity to both cell lines when the PDT fluent was 85.1 J / cm2. The cytotoxity results of the micelles F127/AlClPc at various incubation times was more prominent with B16F10 than B16F10FF. The concentration of 1μg/mL, 5μg/mL and 10 μg/mL were more effective against B16F10 cells when incubated for 20 minutes and 25 minutes. However, for B16F10FF cells they were resistant to treatment after 25 minutes of incubation. The cytotoxicity with either irradiation or without showed that the micelles did not cause toxicity to both cells. Upon exposure to 1μg/mL, 5μg/mL and 10 μg/mL for 15, 20 and 25 minutes and irradiation of fluency 85.1 J / cm2 B16F10 presented a viability of 25% while B16F10FF had 64%. After incubation of 15, 20 and 25 minutes the cytotoxicity of B16F10FF cells was 3%, 7% and 4% respectively when the cells were incubated (24-48 hours) and PDT was applied twice (24-48 hours). It can be concluded that the micelles with F127 / AlClPc presented photophysical and photochemical characteristics favorable for use in photodynamic therapy.

Trabalho Final do Mestrado Integrado em Medicina apresentado à Faculdade de Medicina Introdução: O melanoma cutâneo tem tido incidência e mortalidade global crescentes, estando relacionado com alguns fatores de risco, dos quais a exposição intermitente a radiação ultravioleta com queimaduras ocasionais é preponderante. Sabe-se que a excisão cirúrgica é o tratamento preferencial e que se associa a prognóstico favorável a longo prazo, quando aplicado à doença em fase inicial. A taxa de sobrevivência vai diminuindo à medida que se aumenta o estádio da doença (98% aos 5 anos no estádio I e 90% no estádio II), mas em doentes com envolvimento regional (estádio III) existe um risco significativo de recorrência após tratamento cirúrgico adequado, com uma proporção importante dos doentes a evoluir para metastização distante (estádio IV). Neste contexto, tem-se procurado instituir diversas terapêuticas adjuvantes, cujo objetivo é a redução do risco de recorrência e o aumento da sobrevivência em doentes que, apesar de terem resposta completa após tratamento cirúrgico adequado, têm elevado risco de recidiva e de morte por melanoma.Materiais e Métodos: Para a execução desta monografia foram consultados essencialmente estudos prospetivos, assim como os protocolos de alguns estudos ainda em desenvolvimento, com recurso às plataformas PubMed, Embase e ClinicalTrials.gov. Após apreciação criteriosa das referências inicialmente selecionadas, elaborou-se a presente revisão da literatura.Resultados: Vários fármacos estão atualmente a ser investigados no panorama da terapêutica adjuvante do melanoma cutâneo ressecado com alto risco de recorrência. O interferão foi até há pouco tempo o único fármaco aprovado quer pela Food and Drug Administration quer pela Agência Europeia do Medicamento como terapia adjuvante. O ipilimumab, foi apenas aprovado pela primeira entidade, enquanto o nivolumab e a combinação dabrafenib/trametinib foram recentemente aprovados por ambas as agências. O interferão, com administração recomendada de altas doses e ciclos curtos, está associado aelevada toxicidade. O interferão peguilado, aprovado em 2011, embora sem vantagens significativas em termos de eficácia, apresentou bons resultados nos tumores ulcerados. O ipilimumab apresenta resultados significativamente melhores em termos de sobrevivência global, mas apresenta altas taxas de toxicidade, principalmente com doses elevadas (10mg/kg). O nivolumab apresenta maior eficácia quando comparado com o ipilimumab e com uma taxa significativamente mais reduzida de toxicidade (14,4% vs. 46,9%). Se associado com uma vacina multipeptídica também apresenta reduzida toxicidade (12% vs. 40-60%). O pembrolizumab, tem eficácia significativamente superior quando comparado com o ipilimumab e com menos efeitos adversos (14,7% vs. 54%). A associação de dabrafenib com trametinib apresenta melhores taxas de sobrevivência livre de recorrência e sobrevivência global em melanomas com mutação BRAF, independentemente da ulceração do tumor e do estádio da doença, tendo, no entanto, mais efeitos adversos que o grupo de controlo (36% vs. 10%). O vemurafenib necessita de estudos mais conclusivos, embora os resultados preliminares atribuam melhoria estatisticamente não significativa a este fármaco. Outras terapêuticas adjuvantes como quimioterapia, bioquimioterapia, bevacizumab ou imunoterapia com vacinasnão tiveram até à data resultados vantajosos, pelo que não ocupam um papel relevante no panorama da terapêutica adjuvante.Conclusão: Neste momento o pembrolizumab e o nivolumab surgem como agentes efetivos, assim como a combinação de dabrafenib com trametinib como uma opção adicional para os melanomas com mutação BRAF. Nos países onde o acesso a estes fármacos é difícil, o interferão assume-se como uma alternativa válida, apenas limitado aos doentes em estádioIII com melanoma primário ulcerado. Atualmente, a duração mais eficaz de terapia adjuvante em doentes com melanoma é desconhecida, mas nenhuma evidência demonstrou que tratamentos mais longos estejam relacionados com maior benefício adicional. No futuro, as decisões terapêuticas devem ter em conta a otimização da seleção de doentes através debiomarcadores preditivos e prognósticos e o manuseamento dos efeitos adversos, particularmente efeitos adversos tóxicos imunes. Os estudos posteriores deverão incluir doentes nos estádios IIC de doença, uma vez que o perfil de risco de recorrência é semelhante aos que estão no estádio IIIB. Será também relevante esclarecer claramente quais os doentesque beneficiam de facto de terapêutica adjuvante. Introduction: Cutaneous melanoma has increased incidence and overall mortality, being related to some risk factors, of which the intermittent exposure to ultraviolet radiation, with occasional burns is preponderant. It is known that surgical excision is the preferential treatment, and that it’s associated with a favorable long-term prognosis when applied to the disease in the initial phase. The survival rate decreases as the stage of the disease increases (98% at 5 years at stage I and 90% at stage II), but in patients with regional involvement (stage III) there is a significant risk of recurrence after treatment with an important proportion of patients progressing to distant metastasis (stage IV). In this context, several adjuvant therapies have been tried to reduce the risk of recurrence and increase survival in patients who, despite having complete response after adequate surgical treatment, have a high risk of recurrence and death due to melanoma.Materials and Methods: Prospective studies, as well as the protocols of some studies that are still under development, were consulted mainly through the PubMed, Embase and ClinicalTrials.gov platforms. After a careful evaluation of the references selected, the present literature review was prepared.Results: Several drugs are currently being investigated in the adjuvant therapy of resected cutaneous melanoma with a high risk of recurrence. Interferon was, until recently, the only drug approved by the Food and Drug Administration and the European Medicines Agency as adjuvant therapy. Ipilimumab was only approved by the first entity, while nivolumab and thecombination of dabrafenib/trametinib were recently approved by both agencies. Interferon, with the recommended high dose and short cycles administration is associated with high toxicity. Pegylated interferon, approved in 2011, although without significant advantages in terms of efficacy, showed good results in ulcerated tumors. Ipilimumab presents significantly betterresults in terms of overall survival, but presents high toxicity rates, especially at high doses (10mg/kg). Nivolumab is more effective when compared to ipilimumab and with a significantly lower rate of toxicity (14.4% vs. 46.9%). If associated with a multi-peptide vaccine also has reduced toxicity (12% vs. 40-60%). Pembrolizumab, has a significantly higher efficacy whencompared to ipilimumab and with fewer adverse effects (14.7% vs. 54%). The combination of dabrafenib with trametinib has improved survival rates free of recurrence and overall survival in melanomas with BRAF mutation, regardless of tumor ulceration and disease stage, but with more adverse effects than the control group (36% vs. 10%). Vemurafenib requires moreconclusive studies, although preliminary results attribute not statistically significant improvement for this drug. Other adjuvant therapies such as chemotherapy, biochemotherapy, bevacizumab or immunotherapy with vaccines have not yielded advantageous results and therefore do not play a major role in the adjuvant therapy landscape.Conclusion: At this time pembrolizumab and nivolumab appear as effective agents, as well as the combination of dabrafenib and trametinib as an additional option for melanomas with BRAF mutation. In countries where access to these drugs is difficult interferon is a valid alternative, that should only be limited to patients in the stage III of disease or with ulcerated primary melanoma. Currently, the most effective duration of adjuvant therapy in melanoma patients is unknown, but no evidence has shown that longer treatments are associated with greater additional benefit. In the future, therapeutic decisions should take into consideration the optimization of patient selection through prognostic and predictive biomarkers and the management of adverse effects, particularly immune toxic effects. Further studies should include patients at IIC stages of disease, since the risk profile for recurrence is similar to those at stage IIIB. It will also be relevant to clarify which patients actually benefit from adjuvant therapy.

Tese de mestrado, Biologia Molecular e Genética, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019 Submitted by Teresa Boa (tdboa@fc.ul.pt) on 2019-05-21T10:15:33Z No. of bitstreams: 1 ulfc125396_tm_Catarina_Campos.pdf: 1176601 bytes, checksum: e26b19eef7a91ead0841a72e26f93771 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-21T10:15:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc125396_tm_Catarina_Campos.pdf: 1176601 bytes, checksum: e26b19eef7a91ead0841a72e26f93771 (MD5) Previous issue date: 2019

ResumenEl melanoma es una neoplasia cutánea común que ha alcanzado gran importancia en las últimas décadas debido al aumento en su incidencia y a su comportamiento agresivo, con metástasis ganglionares y a distancia frecuente. La biopsia, en caso de sospecharse melanoma, debe ser escisional, con el objetivo de obtener información histológica completa y analizar factores de mal pronóstico, como ulceración, número de mitosis y el Breslow, que influyen en la estadificación preoperatoria del paciente y en la decisión de realizar biopsia de ganglio centinela o no. La escisión local amplia es el manejo indicado para el melanoma con márgenes periféricos de piel normal ya establecidos de acuerdo al Breslow y a la localización del tumor. La linfadenectomía terapéutica es el tratamiento recomendado de los pacientes con melanoma que tienen ganglios linfáticos clínica o radiológicamente positivos.En este artículo se realiza una revisión del tratamiento quirúrgico del melanoma, la toma adecuada de biopsia de lesiones sospechosas, los factores histológicos adversos, las indicaciones de biopsia del ganglio centinela y de linfadenectomía radical. Además se revisan situaciones especiales en las cuales el manejo del melanoma difiere por su localización (acral plantar, subungueal, lentigo maligno) o diagnóstico durante el embarazo.AbstractMelanoma is a common cutaneous tumour. It is of great importance due to its increasing incidence and aggressive behaviour, with metastasis to lymph nodes and internal organs. When suspecting melanoma, excisional biopsy should be performed to obtain complete histological information in order to determine the adverse factors such as ulceration, mitosis rate, and Breslow depth, which influence preoperative staging and provide data for sentinel lymph biopsy decision making. The indicated management for melanoma is wide local excision, observing recommended and well-established excision margins, depending on Breslow depth and anatomical location of the tumour. Therapeutic lymphadenectomy is recommended for patients with clinically or radiologically positive lymph nodes.This article reviews surgical treatment of melanoma, adverse histological factors, sentinel lymph node biopsy, and radical lymphadenectomy.Details are presented on special situations in which management of melanoma is different due to the anatomical location (plantar, subungual, lentigo maligna), or pregnancy.

Melanoma is a common cutaneous tumour. It is of great importance due to its increasing incidence and aggressive behaviour, with metastasis to lymph nodes and internal organs. When suspecting melanoma, excisional biopsy should be performed to obtain complete histological information in order to determine the adverse factors such as ulceration, mitosis rate, and Breslow depth, which influence preoperative staging and provide data for sentinel lymph biopsy decision making. The indicated management for melanoma is wide local excision, observing recommended and well-established excision margins, depending on Breslow depth and anatomical location of the tumour. Therapeutic lymphadenectomy is recommended for patients with clinically or radiologically positive lymph nodes.This article reviews surgical treatment of melanoma, adverse histological factors, sentinel lymph node biopsy, and radical lymphadenectomy.Details are presented on special situations in which management of melanoma is different due to the anatomical location (plantar, subungual, lentigo maligna), or pregnancy.

El siguiente trabajo se desarrolló en el contexto del ensayo clínico de Fase II CASVAC-0401 cuyos objetivos principales fueron la evaluación de la eficacia clínica y seguridad del tratamiento con la vacuna de células de melanoma irradiadas CSF-470 y adyuvantes BCG (Bacillus Calmette-Guerin) y GM-CSF (Granulocyte-Macrophage colony-stimulating factor), en comparación con el tratamiento con dosis medias de IFN-α2b, en pacientes con melanoma cutáneo estadio IIB-IIC-III, luego de la cirugía. Con un total de 30 pacientes con un seguimiento promedio de 41 meses y un máximo de 102, aquellos tratados con CSF-470 tuvieron una mayor tasa de sobrevida libre de metástasis a distancia y mejor calidad de vida que pacientes tratados con IFN-α2b. Además, el inmunomonitoreo de muestras de sangre periférica obtenidas a los largo de los 2 años de tratamiento demostró que CSF-470 produjo un aumento de células Natural Killer y estimuló la respuesta inmune adaptativa tanto celular como humoral, contra las células tumorales presentes en la vacuna y contra células tumorales autólogas. Para entender los primeros efectos inmunes de la vacunación en el sitio de inyección, desarrollamos un sistema in vitro simplificado utilizando muestras de sangre de donantes sanos. El reclutamiento de leucocitos, mayoritariamente del sistema inmune innato; la liberación de citoquinas pro-inflamatorias estimuladas por BCG; y una incorporación eficiente de antígenos tumorales por monocitos, fueron los primeros eventos observados luego de la interacción de la vacuna con las células inmunes. Dichos eventos podrían generar un contexto favorable para el procesamiento y presentación antigénica, a pesar de los factores inmunosupresores liberados por las células irradiadas que componen CSF-470. En conclusión, la vacuna CSF-470 y adyuvantes BCG y GM-CSF estimulan la respuesta inmunológica antitumoral, y demostró su eficacia clínica en el tratamiento adyuvante de melanoma cutáneo. The following work was developed in the context of the Phase II clinical trial CASVAC-0401 where the main objectives were the evaluation of the clinical efficacy and safety of treatment with irradiated CSF-470 melanoma cell vaccine and adjuvants BCG (Bacillus Calmette-Guerin) and GM-CSF (Granulocyte-Macrophage colony-stimulating factor), compared to treatment with medium doses of IFN-α2b, in post-surgery patients with cutaneous melanoma stage IIB-IIC-III. With a total of 30 patients, with an average follow-up of 41 months and a maximum of 102, those treated with CSF-470 had a higher distant metastases free survival rate and better quality of life than patients treated with IFN-α2b. Besides, the immunomonitoring of peripheral blood samples obtained during the 2 year treatment showed that CSF-470 produced an increase in Natural Killer cells and stimulated both cellular and humoral adaptive immune responses against the tumor cells present in the vaccine as well as against autologous tumor cells. In order to understand the earliest immune effects of vaccination occurring at the injection site, we developed a simplified in vitro system using blood samples from healthy donors. The first events observed after the interaction of the vaccine with immune cells were the recruitment of leukocytes, mostly from the innate immune system; the release of pro-inflammatory cytokines stimulated by BCG; and an efficient incorporation of tumor antigens by monocytes. These events could generate a favorable context for antigenic processing and presentation, despite the immunosuppressive factors released by the irradiated tumor cells making up the CSF-470 vaccine. In conclusion, the CSF-470 vaccine with adjuvants BCG and GM-CSF stimulate an antitumor immune response, and demonstrates clinical efficacy and safety in the adjuvant treatment of cutaneous melanoma. Fil: Pampena, María Betina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

The medical records of 87 dogs treated with surgery for cutaneous malignant melanoma (CMM) of the haired skin were retrospectively reviewed for overall survival time (OST), progression-free survival time (PFS), and prognostic factors. The post-surgery median PFS and median OST were 1282 days and 1363 days, respectively. The post-surgery metastatic rate was 21.8% with a local recurrence rate of 8%. Increasing mitotic index (MI) was predictive of a significantly decreased OST and PFS on multivariable analysis [hazard ratio (HR): 1.05, 95% confidence interval (CI): 1.02 to 1.07 and HR: 1.04, 95% CI: 1.02 to 1.06, respectively]. Increasing age was likewise predictive of a significantly decreased OST and PFS on multivariable analysis (HR: 1.39, 95% CI: 1.17 to 1.65 and HR: 1.33, 95% CI: 1.14 to 1.54, respectively). These results confirm clinical impressions that long survival times are likely in dogs diagnosed with malignant melanoma of the haired skin when treated with surgery alone.

Melanoma cutâneo é um tipo de câncer de pele sendo considerado agressivo devido sua evolução rápida, alta predisposição para metástase e a baixa eficácia dos atuais tratamentos em estágios avançados. O mau prognóstico resulta principalmente da resistência intrínseca aos quimioterápicos com a capacidade de conferir resistência a múltiplas drogas (MDR). Dentre os diversos mecanismos relacionados ao fenótipo de MDR, o melhor caracterizado envolve a expressão da superfamília de transportadores do tipo ABC, dependente de ATP, identificados como facilitadores do efluxo de drogas. Nesse contexto, torna-se importante a busca de modelos que possibilitam compreender o comportamento da célula e do microambiente tumoral. Os modelos de cultura tridimensionais têm sido propostos por mimetizar o microambiente tumoral através da interação célula-célula e célula-matriz extracelular. Diante disso, este estudo analisou o perfil de expressão dos transportadores ABCB1, ABCB5 e ABCB8 nas células de melanoma cutâneo humano em modelo de cultura tridimensional através da formação de esferóides. Células de melanoma cutâneo das linhagens A-375 e SKMEL-37 foram cultivadas em monocamada e posteriormente foram utilizadas para a formação dos esferóides utilizando 3 métodos diferentes: 1) cultura em placa com a superfície revestida com agarose; 2) cultura em gotas suspensas; 3) cultura em placas com superfície não aderente. A análise da expressão dos genes ABCB1, ABCB5 e ABCB8 foi realizada através de RT-PCR e a visualização dos amplicons foi feita por eletroforese em gel de agarose. Reações de RT-PCR em tempo real foram realizadas para a quantificação da expressão desses genes utilizando o método CT. A análise dos dados foi realizada através de One Way ANOVA, seguida de pós-teste de Tukey (p≤0.05). Nossos resultados demonstraram que o modelo de cultura celular tridimensional em placas com a superfície não aderente foi a técnica mais eficaz, simples de executar e de alto rendimento para a formação dos esferóides. Através da RT-PCR observamos que o gene ABCB5 não foi expresso nas linhagens celulares estudadas e este dado foi confirmado na RT-PCR em tempo real. Os genes ABCB1 e ABCB8 foram expressos tanto nos esferóides formados pelas células A-375 quanto SKMEL-37. Nessas duas linhagens celulares observamos que há um aumento significativo da expressão dos genes ABCB1 e ABCB8 ao término de 07 dias de incubação em relação ao controle. Estes achados nos mostram que o modelo de cultura tridimensional através da formação dos esferóides proporcionou a análise da expressão dos transportadores ABCB1, ABCB5 e ABCB8, sendo estes associados a atividade de resistência a drogas em melanoma cutâneo humano. Cutaneous melanoma is a type of skin cancer being considered aggressive due to its rapid evolution, high predisposition to metastasis and the low effectiveness of current treatments in advanced stages. Poor prognosis results mainly from the intrinsic resistance to chemotherapy with the ability to confer resistance to multiple drugs (MDR). Among the several mechanisms related to the MDR phenotype, the best characterized involves expression of the superfamily of ATPdependent ABC transporters, identified as facilitators of drug efflux. In this context, it becomes important to search for models that make it possible to understand the behavior of the cell and the tumor microenvironment. Three-dimensional culture models have been proposed by mimicking the tumor microenvironment through cell-cell and extracellular matrix-cell interaction. Therefore, this study analyzed the expression profile of the ABCB1, ABCB5 and ABCB8 transporters in human cutaneous melanoma cells in a three-dimensional culture model through the formation of spheroids. Cutaneous melanoma cells from the A-375 and SKMEL-37 lineage were cultured in a monolayer and later were used for spheroid formation using 3 different methods: 1) agarose-coated plate culture; 2) culture in hanging drop; 3) culture in plate with non-adherent surface. Expression analysis of the ABCB1, ABCB5 and ABCB8 genes was performed by RT-PCR and visualization of the amplicons was done by agarose gel electrophoresis. Real-time RT-PCR reactions were performed for the quantification of the expression of these genes using the CT method. Data analysis was performed through One Way ANOVA, followed by Tukey post-test (p≤0.05). Our results demonstrated that the three-dimensional cell culture model in plate with the non-adherent surface was the most efficient, simple to perform and high efficiency technique for spheroid formation. Through RT-PCR we observed that the ABCB5 gene was not expressed in the cell lines studied and this data was confirmed in real time RT-PCR. The ABCB1 and ABCB8 genes were expressed on the spheroids formed by cells A-375 and SKMEL-37. In these two cell lines we observed that there is a significant increase in the expression of the ABCB1 and ABCB8 genes at time 07 in relation to the control. These findings show that the three-dimensional culture model through spheroid formation provided expression analysis of the ABCB1, ABCB5 and ABCB8 transporters, which are associated with drug resistance activity in human cutaneous melanoma. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Introdução: Embora não seja a neoplasia da pele mais prevalente, o melanoma cutâneo é a mais letal, sendo responsável por cerca de 75% dos óbitos causados por câncer da pele. Sua incidência vem aumentando em todo o mundo, chegando a ocupar a 5ª posição nos Estados Unidos. No Brasil, as características epidemiológicas e histológicas das lesões restringem-se às relatadas em pequenas séries de casos, mesmo em face do aumento da importância da neoplasia. Objetivo: Descrever os aspectos clínicos e histopatológicos de melanomas cutâneos diagnosticados em pacientes atendidos no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais, segundo as recomendações da American Joint Committee on Cancer (AJCC) de 2017. Métodos: Foram selecionados casos de melanoma cutâneo diagnosticados no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais, entre 1995 e 2017. Dos casos selecionados, foram avaliadas variáveis clínicas (idade ao diagnóstico, localização da lesão e gênero dos pacientes) e histológicas (subtipo histológico, espessura, nível de invasão, ulceração, regressão, microssatelitose, invasão vascular, neurotropismo, infiltradolinfocitário intratumoral, margens cirúrgicas e índice mitótico). Lâminas de 40 casos estudados foram escaneadas e distribuídas a três patologistas com mais de 15 anos de experiência em patologia cirúrgica para avaliação da concordância interobservadores quanto aos seguintes parâmetros: subtipo histológico, espessura, nível de invasão, ulceração, regressão, microssatelitose, invasão vascular, neurotropismo e infiltrado linfocitário intratumoral. Para avaliar o nível de concordância entre eles, foi utilizado o teste de Kappa. Resultados: Foram avaliados 223 casos de melanomas cutâneos. A idade dos pacientes variou entre 18 e 88 anos, com média de 60 anos. Mais da metade dos diagnósticos ocorreu em pessoas acima de 59 anos (120 casos, 53,8%). A distribuição das lesões nos dois gêneros não teve diferença estatística: 122 (54,7%) em mulheres e 101 (45,3%) em homens. A localização predominante das lesões foi a região da cabeça e pescoço (95 casos, 42,6%), seguida do tronco (54 casos, 24,2%) e extremidades (72 casos, 32,3%). Em dois casos (0,9%) a localização não foi especificada. O subtipo histológico predominante foi o extensivo superficial (130casos,58,3%), seguido pelo lentigo maligno / melanoma lentigo maligno (55 casos, 24,7%), lentiginoso acral (20 casos, 9,0%) e nodular (18 casos, 8,1%). Os níveis de concordância interobservadores segundo o teste de Kappa foram moderado, bom ou excelente, exceto para o parâmetro infiltrado linfocitário intratumoral, que foi ruim. Conclusão: Melanoma cutâneo predominou na faixa etária mais avançada (média = 60 anos). Não houve diferença significativa entre os gêneros dos pacientes. A localização mais prevalente foi a da região da cabeça e pescoço. O subtipo histológico mais comum, entre melanomas in situ e invasores, foi o extensivo superficial, seguido do lentigo maligno / melanoma lentigo maligno. O nível de concordância interobservadores foi bom, ótimo ou excelente para a maioria dos parâmetros histológicos. O diagnóstico histopatológico de melanomas pode ser realizado com segurança e reprodutibilidade por patologistas não especializados, dentro das diretrizes recomendadas pela AJCC. Introduction: Although not being the most prevalent skin neoplasm, cutaneous melanomais the most lethal, accounting for about 75% of skin cancer deaths. Its incidence has been increasing worldwide, coming to the 5th position in the United States. In Brazil, the epidemiological and histological characteristics of the lesions are restricted to those reported in small series of cases, even in view of the increased importance of the neoplasia. Objective: To describe the clinical and histopathological aspects of cutaneous melanomas diagnosed in patients attended at Hospital das Clínicas, Federal University of Minas Gerais. Methods: Were selected cases of cutaneous melanoma diagnosed at the Hospital das Clínicas of the Federal University of Minas Gerais between 1995 and 2017. These cases were evaluated for clinical data (age at diagnosis, lesion location and gender of patients) and histological variables (histological subtype, thickness, invasion level, ulceration, regression, microsatellitosis, vascular invasion, neurotropism, tumor-infiltrating lymphocytes, surgical margins and mitotic index). Slides from 40 of these cases were scanned and sent to three pathologists with more than 15 years of experience in surgical pathology to assess interobserver agreement for the following parameters: histological subtype, thickness, invasion level, ulceration, regression, microsatellite, vascular invasion, neurotropism and tumor-infiltrating lymphocytes. To evaluate the level of agreement, the Kappa test wasused. Results: Were selected 223 cases of cutaneous melanoma,in situ and invasive. Thepatients' ages ranged from 18 to 88 years, with an average of 60 years. More thanhalf of the diagnoses occurred in people over 59 years-old (120 cases, 53.8%). The gender distribution was not statistically different: 122 (54.7%) in women and 101 (45.3%) in men. The predominant location was the head and neck region (95 cases, 42.6%), followed by the trunk (54 cases, 24.2%) and extremities (72 cases, 32.3%). Intwocases (0.9%) the location was not specified. The predominant histological subtype was superficial spreading (130cases,58.3%),followed by lentigo maligna/lentigomalignamelanoma(55cases,24.7%),acrallentiginous(20cases, 9.0%) and nodular (18 cases, 8.1%). The interobserver agreement levels according to the Kappa test were good or very good, except for the parametertumor-infiltratinglymphocytes, which was fair or poor. Conclusion: Cutaneous melanoma predominated in the older age group (average = 60 year). There was no significant difference between the patients' gender. The most prevalent location was the head and neck region. The most common histological subtype, including in situ and invasive melanomas, was superficial spreading, followed by lentigo maligna / lentigo maligna melanoma. The interobserver agreement level was good or very good for the most histological parameters. The histopathological diagnosis of melanomas can be performed safely and reproductively by non-specialist pathologists.

ResumenAntecedentesDesde la introducción de la biopsia selectiva del ganglio centinela, su utilización en pacientes con melanoma cutáneo y ganglios clínicamente negativos permanece controvertido. Hemos evaluado nuestra experiencia en biopsia selectiva del ganglio centinela en pacientes con melanoma.Material y métodosEstudio retrospectivo observacional, en el que hemos estudiado una muestra de 69 pacientes diagnosticados de melanoma cutáneo primario sin evidencia clínica de afectación metastásica, a los que se realizó biopsia selectiva del ganglio centinela desde octubre de 2005 hasta diciembre de 2013. El ganglio centinela fue identificado mediante una linfogammagrafía preoperatoria y posterior detección intraoperatoria con sonda gammadetectora.ResultadosLa tasa de identificación del ganglio centinela fue del 98.5%. El ganglio centinela fue positivo en 23 pacientes (33.8%). Las complicaciones postoperatorias después de la biopsia selectiva del ganglio centinela fueron observadas en el 4.4%, frente al 38% de los pacientes sometidos a linfadenectomía.ConclusiónLa biopsia selectiva del ganglio centinela en pacientes con melanoma proporciona valiosa información sobre las vías de diseminación linfática del tumor, y también permite una aproximación a la estadificación regional del mismo, evitando los efectos secundarios de la linfadenectomía. No obstante, serían necesarios estudios de mayor tamaño muestral y tiempo de seguimiento para confirmar la validez de la técnica de la biopsia selectiva del ganglio centinela en pacientes con melanoma, y especialmente de la linfadenectomía en casos de ganglio centinela positivo.AbstractBackgroundSince the introduction of sentinel lymph node biopsy, its use as a standard of care for patients with clinically node-negative cutaneous melanoma remains controversial. Our experience of sentinel lymph node biopsy for melanoma is presented and evaluated.Material and methodsA cohort study was conducted on 69 patients with a primary cutaneous melanoma and with no clinical evidence of metastasis, who had sentinel lymph node biopsy from October-2005 to December-2013. Sentinel lymph node biopsy was identified using preoperative lymphoscintigraphy and subsequent intraoperative detection with gamma probe.ResultsThe sentinel lymph node biopsy identification rate was 98.5%. The sentinel lymph node biopsy was positive for metastases in 23 patients (33.8%). Postoperative complications after sentinel lymph node biopsy were observed in 4.4% compared to 38% of complications in patients who had complete lymphadenectomy.ConclusionThe sentinel lymph node biopsy in melanoma offers useful information about the lymphatic dissemination of melanoma and allows an approximation to the regional staging, sparing the secondary effects of lymphadenectomy. More studies with larger number of patients and long term follow-up will be necessary to confirm the validity of sentinel lymph node biopsy in melanoma patients, and especially of lymphadenectomy in patients with positive sentinel lymph node biopsy.

Background Since the introduction of sentinel lymph node biopsy, its use as a standard of care for patients with clinically node-negative cutaneous melanoma remains controversial. Our experience of sentinel lymph node biopsy for melanoma is presented and evaluated. Material and methods A cohort study was conducted on 69 patients with a primary cutaneous melanoma and with no clinical evidence of metastasis, who had sentinel lymph node biopsy from October-2005 to December-2013. Sentinel lymph node biopsy was identified using preoperative lymphoscintigraphy and subsequent intraoperative detection with gamma probe. Results The sentinel lymph node biopsy identification rate was 98.5%. The sentinel lymph node biopsy was positive for metastases in 23 patients (33.8%). Postoperative complications after sentinel lymph node biopsy were observed in 4.4% compared to 38% of complications in patients who had complete lymphadenectomy. Conclusion The sentinel lymph node biopsy in melanoma offers useful information about the lymphatic dissemination of melanoma and allows an approximation to the regional staging, sparing the secondary effects of lymphadenectomy. More studies with larger number of patients and long term follow-up will be necessary to confirm the validity of sentinel lymph node biopsy in melanoma patients, and especially of lymphadenectomy in patients with positive sentinel lymph node biopsy.

ResumenAntecedentesLa mortalidad del melanoma cutáneo no ha disminuido en los últimos 50 años. Las únicas medidas que permiten reducirla son la prevención primaria y el diagnóstico oportuno; la evaluación dermatoscópica es fundamental para lograrlo. Permite identificar características del melanoma que pasarían desapercibidas al ojo desnudo.El objetivo es reportar los hallazgos dermatoscópicos más frecuentes en pacientes con diagnóstico de melanoma in situ e invasivo.Material y métodosEstudio observacional, retrospectivo en el que se realizó dermatoscopia de contacto utilizando dermatoscopio LED DermliteMR, y cámara fotográfica DermliteMR. Se evaluó asimetría en 2 ejes, asociación de colores, falta de pigmento, puntos irregulares, red atípica, pseudópodos, velo azul, ulceración y anillo rosa perilesional, y se comparó el diagnóstico histológico con los hallazgos dermatoscópicos.ResultadosFueron 65 pacientes con melanoma cutáneo: 10 in situ y 55 invasivos. La media de Breslow en invasivos fue 3mm. La mayoría de los pacientes (35) tuvieron localización en extremidades. El hallazgo dermatoscópico más frecuente fue asimetría en 2 ejes, seguida de asociación de 2 o más colores; en melanoma in situ el hallazgo más habitual fue la asimetría en 2 ejes seguida de los puntos atípicos; en melanoma invasivo la asimetría en 2 ejes, la asociación de 2 colores o más y los pseudópodos fueron los hallazgos más frecuentes.ConclusiónLa asimetría en 2 ejes es el hallazgo dermatoscópico más frecuente en melanoma ya sea in situ o invasivo; la presencia de 2 colores o más en una lesión pigmentada debe hacer sospechar de un melanoma invasivo.AbstractBackgroundThe mortality of cutaneous melanoma has not declined over the past 50 years. The only interventions that can reduce mortality are primary prevention and early diagnosis, and the dermoscopic evaluation is essential to achieve this. Dermoscopy identifies characteristics of melanoma that would go unnoticed to the naked eye.The aim of this paper is to report the most frequent dermoscopic findings in patients diagnosed with in situ and invasive melanoma.Material and methodsAn observational and retrospective study of contact dermoscopy was performed using LED DermliteTM and camera DermliteTM dermoscope. The findings evaluated were: asymmetry in two axes, association of colours, lack of pigment, irregular points, atypical network, pseudopods, blue veil, ulceration, and peri-lesional pink ring. These dermoscopic findings were compared with the histological diagnosis.ResultsThe study included 65 patients with cutaneous melanoma; 10 in situ, and 55 invasive. The mean Breslow in invasive melanoma was 3 mm. Most patients (35) had localization in extremities. In all patients, the most frequent dermoscopic finding was asymmetry in two axes, followed by association of two or more colours; in melanoma in situ, asymmetry was the most frequent, followed by atypical-irregular points. In invasive melanoma asymmetry in two axes, the association of two or more colours, and pseudopods, were the most frequent findings.ConclusionAsymmetry in two axes is the most common dermoscopic finding in in situ and invasive melanoma. The presence of two or more colours in a pigmented lesion should be suspected in an invasive melanoma.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O melanoma cutâneo é um problema de saúde pública mundial, por ser um tumor sólido altamente metastático. Compostos sintéticos têm sido desenvolvidos no intuito de combater atividades das células tumorais, como migração, invasão, adesão e proliferação. Dentre eles, compostos derivados do ácido cinâmico e isobenzofuranonas têm apresentado importante atividade antimetastática. Por isso, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimetastática in vitro de dois grupos de compostos, 26 compostos derivados do ácido cinâmico e 25 isobenzofuranonas, frente ao comportamento metastático de células de melanoma cutâneo murino B16-F10. Inicialmente, determinou-se a concentração não citotóxica de derivados destes dois grupos químicos frente à linhagem B16-F10. Como a concentração de 100 μmol L −1 foi aquela considerada não citotóxica, todos os ensaios subsequentes foram realizados utilizando concentrações inferiores ou iguais a esta. Posteriormente, os compostos derivados do ácido cinâmico e as isobenzofuranonas foram avaliados quanto ao efeito antimigratório sobre células B16-F10. Os compostos 9a e 1f foram mais efetivos nas concentrações de 100 μmol L −1 e 50 μmol L −1 . Tanto o composto 9a, um derivado do ácido cinâmico com porção 1,2,3-triazólica contendo um grupo fenilo, quanto o composto 1f, uma isobenzofuranona funcionalizada na posição C3 contendo hidroxilas nas posições C-2' e C-6' do anel aromático, apresentaram atividade antimetastática e antiproliferativa significativa contra células B16-F10. No caso do composto 9a, seu efeito biológico foi atribuído à sua interação com o sítio ativo das metaloproteinases -9 e -2 pelo estudo de docking molecular. Já para o composto 1f, sugerimos que seu efeito inibidor é devido à sua interação com proteínas PKC. Os dois compostos derivados apresentam uma característica em comum, que é a presença de estruturas químicas heterocíclicas na sua composição. Em conclusão, nossos resultados mostraram que derivados do ácido cinâmico podem inibir o comportamento metastático de células B16-F10 in vitro, possivelmente por interferir na atividade de metaloproteinases de matriz. Adicionalmente, nossos resultados mostraram pela primeira vez que isobenzofuranonas sintéticas podem inibir a invasividade de células B16-F10 in vitro. Portanto, os compostos 9a e 1f apresentam potencial para o uso no desenvolvimento de novos candidatos para o tratamento do melanoma cutâneo. Cutaneous melanoma is a worldwide public health problem because it is a highly metastatic solid tumor. Synthetic compounds have been developed in order to inhibit activities of tumor cells, such as migration, invasion, adhesion and proliferation. Among them, compounds derived from cinnamic acid and isobenzofuranones have shown important antimetastatic activity. Therefore, the objective of this study was to evaluate the in vitro antimetastatic activity of two groups of compounds, 26 compounds derived from the cinnamic acid and 25 isobenzofuranones, against the metastatic behavior of murine cutaneous melanoma cells B16- F10. Initially, the non-cytotoxic concentration of the derivatives was determined against the B16-F10 cells. As the concentration of 100 μmol L −1 was non-cytotoxic, all subsequent assays were performed using concentrations below or equal to this. Subsequently, the compounds derived from cinnamic acid and isobenzofuranone were evaluated for the anti-migratory activity on B16-F10 cells. Compounds 9a and 1f were more effective at 100 μmol L −1 and 50 μmol L −1 concentrations. Both compound 9a, a 1,2,3-triazolic-cinnamic acid derivative containing a phenyl group, and compound 1f, a isobenzofuran derivative functionalized at C-3 position, showed significant antimetastatic and antiproliferative activities against B16-F10 cells. In the case of compound 9a, its biological effect was attributed to its interaction with the active site of metalloproteinases -9 and -2 by the molecular docking study. For compound 1f, we suggest that its inhibitory effect is due to its interaction with PKC proteins. Both derivatives have one feature in common, which is the presence of heterocyclic chemical structures in their composition. In conclusion, our results showed that cinnamic acid derivatives can inhibit the metastatic behavior of B16-F10 cells in vitro, possibly by interfering with the activity of matrix metalloproteinases. In addition, our results showed for the first time that synthetic isobenzofuranone derivatives can inhibit the invasiveness of B16- F10 cells in vitro. Therefore, compounds 9a and 1f have potential structures for the development of novel candidates for the treatment of cutaneous melanoma.

RESUMEN Introducción: es sabido que el pronóstico del melanoma cutáneo depende, entre otros factores, de la existencia de diseminación linfática a ganglios. La biopsia del ganglio centinela busca identificar metástasis ganglionares subclínicas. Objetivo: el presente estudio tuvo por objetivo analizar la asociación entre la presencia de ganglio centinela positivo, identificado mediante rastreo con radioisótopo 99mTc-coloide de Renio, y el espesor de Breslow hallado en la lesión primaria a nivel cutáneo. Metodología: se analizaron 52 pacientes. Se realizó la búsqueda del ganglio centinela por el método de rastreo con radioisótopo 99mTc-coloide de Renio y posterior biopsia del mismo, en pacientes tratados en el Instituto Nacional de Cancerología de México, entre enero de 2015 a agosto de 2016, con diagnóstico de melanoma cutáneo y espesor de Breslow mayor o igual a 1mm o con menor a 1mm y otros criterios de riesgo como la ulceración. Aquellos con biopsia positiva fueron sometidos a linfadenectomía. Además, se recogieron las siguientes variables: sexo, edad, localización, tipo de melanoma, espesor de Breslow y ulceración. Resultados: la edad media de la muestra fue 57 ± 15 años. El 63,5% de los pacientes fue del sexo masculino. El tipo histológico más frecuente fue el melanoma de extensión superficial (69,2%). Se detectó positividad del ganglio centinela en 46,2% y 28,8% presentó Breslow >4,0 mm. Se encontró relación entre la presencia de ganglio centinela positivo y espesor de Breslow (p=0,007). Conclusiones: a medida que aumenta el espesor de Breslow, lo hace también el encuentro de metástasis en ganglio centinela. Se recomienda realizar estudios de casos y controles para evaluar el factor predictivo que puede llegar a tener el encontrar ganglio centinela positivo. ABSTRACT Introduction: It is known that the prognosis of cutaneous melanoma depends, among other factors, on the existence of lymphatic spread to lymph nodes. Sentinel node biopsy seeks to identify subclinical lymph node metastases. Objective: The present study aimed to analyze the association between the presence of positive sentinel lymph node, identified by Rhenium 99mTc-colloid radioisotope tracing, and the Breslow´s depth found in the primary lesion at the cutaneous level. Methodology: 52 patients were analyzed. The sentinel lymph node was searched by the rhenium 99mTc-colloid radioisotope and subsequent biopsy of it in patients treated at the Instituto Nacional de Cancerología of Mexico, between January 2015 and August 2016, with a diagnosis of cutaneous melanoma and Breslow's depth greater-than or equal to 1mm or less-than 1mm and other risk criteria such as ulceration. Those patients with positive biopsy underwent lymphadenectomy. In addition, the following variables were collected: sex, age, location of the lesion, type of melanoma, Breslow's depth, and ulceration. Results: Mean age of the sample was 57±15 years. 63.5% of the patients were male. The most frequent histological type was superficial spreading melanoma (69.2%). 46.2% had positive sentinel lymph node. 28.8% presented Breslow >4.0 mm. A relationship was found between the presence of positive sentinel lymph node and Breslow's depth (p=0.007). Conclusions: As Breslow's depths increases, so does the metastasis encounter in sentinel lymphs nodes. It is recommended to carry out case-control studies to evaluate the predictive factor that may result in finding a positive sentinel lymph node.

El melanoma cutáneo constituye solo el 4% de todos los tumores malignos de la piel, sin embargo ocasiona el 80% de las muertes causadas por cáncer de piel lo que determina que se considere un problema de salud de alto impacto. (1) Es una enfermedad de proporciones epidémicas en países donde predomina la población caucásica y aunque su incidencia en países de población afroamericana o hispánica es baja, su comportamiento agresivo determina el conocimiento de sus características epidemiológicas con el fin de establecer medidas encaminadas a mejorar la sobrevida.(2) Los estudios sobre características sociodemográficas que influencian el pronóstico, así como las características histopatológicas han sido llevados a cabo principalmente en población blanca(3) o en inmigrantes en un país europeo(4), estableciéndose que el principal factor pronóstico está definido por la detección temprana la cual está directamente relacionada con el estadio al momento del diagnóstico (TNM de la American Joint Committee on Cancer - AJCC) cuyos nuevos criterios se aplican a partir el 2010.(5) Son pocos los estudios poblacionales desarrollados en Colombia sobre la sobrevida y los factores pronósticos asociados en los pacientes con Melanoma maligno cutáneo. A nivel local se cuenta con el Registro Poblacional de Cáncer de Bucaramanga y su área Metropolitana (RPC-AMB), donde en el 2015 se consolida y analiza la información disponible en melanoma, con un estudio analítico retrospectivo con base poblacional que determino la supervivencia a 5 años de los pacientes diagnosticados de melanoma cutáneo primario identificados en el RPC-AMB entre los años 2000-2009 así como el análisis de algunos factores pronósticos histológicos.(6) Este estudio pretende continuar el análisis de la información de los siguientes 5 años y se enfocará en la incidencia, las características clínica y la prevalencia de los factores pronósticos histopatológicos reportados en los informes de los pacientes diagnosticados de melanoma cutáneo primario identificados en el RPC-AMB. 1. RESUMEN DEL PROYECTO 2. JUSTIFICACIÓN Y DESCRIPCIÓN DEL PROYECTO 3. MARCO TEÓRICO Y ESTADO DEL ARTE 3.1. EPIDEMIOLOGIA 3.1.1. Incidencia en Colombia 3.1.2. Incidencia local 3.2. FACTORES DE RIESGO PARA MELANOMA 3.2.1 FACTORES DEL INDIVIDUO 3.2.1.1. Antecedentes personales y familiares 3.2.1.2. Inmunosupresión 3.2.1.3. Nevos 3.2.1.4. Otros antecedentes 3.2.2. FACTORES GENÉTICOS 3.2.3. FACTORES AMBIENTALES 3.2.3.1. Radiación ultravioleta 3.2.3.2. Ocupacionales 3.3. CLASIFICACIÓN CLÍNICA 3.3.1. Melanoma de extensión superficial 3.3.2. Lentigo maligno y lentigo maligno melanoma 3.3.3. Melanoma nodular 3.3.4. Melanoma lentiginoso acral 3.4. CLASIFICACIÓN HISTOPATOLÓGICA 3.4.1. Tipos Histológicos 3.5. CARACTERÍSTICAS POR UBICACIÓN Y DE LA HISTOLOGÍA EN LA SUPERVIVENCIA 3.6. DIAGNÓSTICO DEL MELANOMA 3.6.1. MÉTODOS DE EVALUACIÓN CLÍNICA 3.6.1.1. Sistema ABCDE 3.6.1.2. Sistema de 7 puntos o Glasgow 3.6.1.3. Signo del patito feo 3.6.2. MÉTODOS DE EVALUACIÓN TÉCNICA 3.6.2.1. Dermatoscopia 3.6.2.2. Fotografía de todo el cuerpo (Full-body photography) 3.6.2.3. Luz de Wood 3.6.2.4. Espectrofotometría 3.6.2.5. Análisis multiespectral digital (MDSLA) 3.6.2.6. Termografía infrarroja 3.6.2.7. Microscopía con focal láser 3.6.2.8. Tomografía de coherencia óptica 3.6.2.9. Ultrasonografía 3.6.3. BIOPSIA 3.6.3.1. Importancia de la biopsia 3.6.3.2. Componentes del reporte hispatológico. 3.7. EVALUACIÓN DE METÁSTASIS 3.8. ESTADIFICACIÓN Y PRONÓSTICO DEL MELANOMA 3.8.1. Clasificación AJCC 2009 3.8.2. Estadificación y clasificación TNM 3.9. FACTORES PRONÓSTICOS 3.9.1. Índice de Breslow 3.9.2. Ulceración 3.9.3. Índice mitótico 3.9.4. Niveles de Clark 3.9.5. Subtipo Histológico 3.9.6. Fase de Crecimiento 3.9.7. Infiltrado Inflamatorio 3.9.8. Regresión 3.9.9. Invasión angiolinfática 3.9.10. Neurotropismo 3.9.11. Microsatelitosis, Satelitosis y Metástasis en Transito 3.9.12. Metástasis 3.10. CORRELACIÓN CLINICOPATÓLOGICA 4. OBJETIVOS 4.1. Objetivo general 4.1.1. Objetivo especifico 5. METODOLOGÍA 5.1. Tipo de estudio 5.2. Población 5.3. Tipo de muestreo 5.4. Criterios de inclusión 5.5. Criterios de exclusión 5.6. Fuentes de información 5.4. Definición de variables 5.5. Recolección de la información 5.6. Procesamiento y análisis de los datos 5.7. Consideraciones éticas 6. RESULTADOS ESPERADOS 6.1. Resultados con la generación de un nuevo conocimiento 6.2. Conducentes al fortalecimiento de la capacidad científica institucional 6.3. Dirigidos a la apropiación social del conocimiento 7. IMPACTOS ESPERADOS 8. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES 9. PRESUPUESTO 9.1. Presupuesto global 9.2. Presupuesto desglosado 9.2.1. Personal 9.2.2. Proceso de la muestra 9.2.3. Publicación y análisis de datos 10. RESULTADOS 10.1. Análisis poblacional 10.2. Análisis de datos 10.2.1. Análisis univariado 10.2.1.1. Descripción de los datos sociodemográficos 10.2.1.2. Descripción datos del reporte de patología 10.2.2. Análisis bivariado 11. DISCUSIÓN 12. CONCLUSIONES 13. BIBLIOGRAFÍA 14. ANEXOS 1. Formato de recolección de datos 2. Consideraciones del registro con relación a la normatividad y los aspectos éticos Especialización Cutaneous melanoma is just only the 4% of all malignant tumors of the skin, nevertheless causes 80% of skin cancer deaths, making it a high-impact health problem. (1) It is a disease of epidemic proportions in caucasian population countries and although its incidence in African American or Hispanic population is low, the aggressive behavior requires the knowledge of the epidemiological characteristics in order to establish measures to improve survival. (2) Sociodemographic and histopathological characteristics studies and their influences in prognosis have been carried out mainly in the white population (3) or in immigrants in a European country (4), had established that the main prognostic factor is defined by early detection which is directly related to the stage at the time of diagnosis (TNM-American Joint Committee on Cancer - AJCC), whose new criteria apply as of 2010. (5) There are few population studies in Colombia on survival and associated prognostic factors in patients with cutaneous melanoma. At local level, the Population Registry of Cancer from Bucaramanga and Metropolitan Area (RPC-AMB) started in 2015 a population-based retrospective analytical study that consolidated and the information available on melanoma with a 5-year survival analysis of patients diagnosed with primary cutaneous melanoma identified in the RPC-AMB between 2000-2009 as well as the analysis of some histological prognostic factors.(6) This study purposes is to continue the analysis of information over the next 5 years and will focus on the incidence, clinical characteristics and prevalence of the histopathological prognostic factors reported on the biopsy reports with diagnosed primary cutaneous melanoma identified on the RPC-AMB.

El melanoma es una neoplasia maligna que afecta a los melanocitos que derivan de la cresta neural. Este tumor se caracteriza por un gran potencial invasivo y metastatizante, lo que condiciona las bajas tasas de supervivencia cuando se diagnostica en estadios avanzados. Existe en la literatura científica múltiples modelos experimentales animales que demuestran una posible relación entre la radiación ultravioleta y el desarrollo de melanoma. La incidencia de la variante cutánea de este tumor sigue aumentando en todo el mundo de forma exponencial. Existen registros epidemiológicos internacionales y en diferentes áreas de nuestra geografía nacional que demuestran esta tendencia. Como resultado de esta epidemia, ha habido múltiples intentos para desarrollar modelos experimentales que permitan conocer la etiología y la biología de esta neoplasia. La provincia de Cáceres es una de las regiones que soporta mayores índices de radiación ultravioleta de la península ibérica, por lo que se puede considerar como una muestra representativa de áreas con radiación solar ultravioleta elevada. El presente estudio, analiza de forma pormenorizada los melanomas cutáneos diagnosticados en la provincia de Cáceres durante un periodo de 10 años, comprendido entre los años 2002 y 2011, ambos inclusive. Además, especifica la influencia de la intensidad de la radiación ultravioleta sobre la caracterización del melanoma cutáneo., Melanoma is a neoplasia of melanocytes. This tumor has a great invasive and metastatic potential. So, it has a low survival rates when it is diagnosed in advanced stages. There are multiple experimental animal models of cutaneous melanoma, showing a possible link between ultraviolet radiation and the development of melanoma. The incidence of cutaneous melanoma continues growing worldwide. There are international epidemiological studies confirming this trend. As a result of this epidemic, there have been many attempts to develop experimental models reproducing the biology of this neoplasm. Caceres region receives one of the highest levels of ultraviolet radiation from Spain, so it can be considered a representative sample of areas with high solar ultraviolet radiation. This study analyzes the rates of cutaneous melanomas diagnosed in Caceres for a period of 10 years, between 2002 and 2011. It also specifies the influence of the intensity of ultraviolet radiation on the type of cutaneous melanoma.

Llevamos años inmersos en un periodo de crisis económica que afecta directa e indirectamente tanto a la salud de la población como a la sostenibilidad de los sistemas sanitarios. En este contexto, el aprovechamiento de los recursos sanitarios cobra especial relevancia, siendo de mucha utilidad para este objetivo la aplicación de la medicina basada en la evidencia, que mejora la práctica clínica, y las evaluaciones económicas, que permiten gestionar los recursos en base a las evidencias clínicas. Además, a la par que convivimos con esta situación económica, la incidencia de tumores está en constante incremento, lo que conlleva un coste importante, asociado en gran medida al constante desarrollo de métodos diagnósticos y terapias. El tema que se aborda en este trabajo de tesis doctoral es el de la biopsia selectiva de ganglio centinela en melanoma cutáneo, una técnica ampliamente extendida en el manejo del melanoma cutáneo y cuya efectividad y costes no han sido evaluados a pesar de los resultados controvertidos de los ensayos clínicos publicados. Se plantean como objetivos el análisis cuantitativo de la precisión diagnóstica y la efectividad de la BSGC en melanoma cutáneo de todos los espesores de Breslow, además de la evaluación de los costes que supone un paciente diagnosticado de melanoma cutáneo en sus diferentes estadios al sistema público de salud, comparando distintas estrategias de manejo clínico. Igualmente se evalúa la aportación de otras técnicas diagnósticas como la ecografía prequirúrgica y el SPECT a la BSGC. Como metodología se ha realizado una revisión sistemática siguiendo los criterios de las guías aceptadas para cada tipo de artículo. En los casos en que fue posible, se elaboraron metanálisis de diferentes variables: supervivencia, precisión diagnóstica de la técnica y de técnicas complementarias. Se estimaron sus valores ponderados, los intervalos de confianza, estudiándose asimismo su heterogeneidad. Tras los análisis, se establecieron niveles de recomendación dependiendo del grado de evidencia científica referido en la bibliografía. Posteriormente se evaluaron los costes y la efectividad en términos de salud, para lo que se construyeron árboles de decisión que comparaban diferentes estrategias de manejo de los pacientes diagnosticados de melanoma cutáneo en distintos horizontes temporales. Tras la revisión sistemática y el matanálisis, observamos que se han publicado innumerables trabajos pero que únicamente un reducido número presenta un alto nivel de evidencia científica, considerándose necesaria la realización de estudios prospectivos que permitan obtener grados altos de recomendación. Se comprueba que la BSGC no presenta diferencias significativas en la supervivencia global en melanoma cutáneo de espesores intermedio y grueso con respecto a la estrategia de la observación tras la exéresis de la lesión primaria. No obstante, las diferencias en las supervivencia libre de enfermedad son significativas. En los melanomas de espesor fino no es posible establecer conclusiones en cuanto a supervivencia, aunque la tendencia es similar a la descrita para los otros espesores. La ecografía prequirúrgica y el SPECT pueden complementar a la BSGC en el diagnóstico de metástasis ganglionares en circunstancias concretas. En el análisis coste-efectividad, la BSGC no muestra mejoría en los resultados de salud en términos de AVG y AVAC en los pacientes con melanoma cutáneo, a excepción de un leve beneficio en el melanoma cutáneo de espesor intermedio de Breslow. Por otro lado, los elevados costes del diagnóstico de melanoma cutáneo en estado avanzado evidencian la necesidad de promocionar la prevención primaria y los programas de detección precoz. Podemos concluir que la BSGC en melanoma cutáneo no es coste-efectiva con respecto a la escisión seguida de observación independientemente del espesor de Breslow y del horizonte temporal. Creemos que la elaboración de análisis coste-efectividad en un contexto de gestión basada en la evidencia científica puede aportar importantes beneficios tanto para los pacientes como para la población en su conjunto. Programa Oficial de Doctorado en Ciencias de la Salud (RD 1393/2007) Osasun Zientzietako Doktoretza Programa Ofiziala (ED 1393/2007)

El melanoma maligno es una neoplasia originada en los melanocitos de la piel y otras localizaciones. No existe información en nuestro país acerca de su incidencia y prevalecencia, sí se sabe cuáles son los factores de riesgo más importantes. El melanoma puede originarse de novo o a partir de lesiones melanocíticas previas. La noción de que un nevo melanocítico pueda servir como lesión precursora es sustentada por evidencias clínicas e histológicas. Realizamos en el Hospital Privado de Córdoba un estudio observacional, retrospectivo y analítico. El objetivo de este trabajo fue conocer cuál es la frecuencia de asociación de melanomas malignos que se desarrollan sobre nevos previos. Fueron analizados un total de 134 melanomas. En 32 pacientes (24%), los melanomas estuvieron histológicamente asociados con nevos, con espesores de Breslow mayores de 1 mm el porcentaje de asociación fue de 16.3%, y con Breslow menores de 1 mm, 38.1%. Al evaluar los melanomas en relación a la clasificación de Breslow y Clark, se objetivó que el grupo de melanomas asociados a nevos presentó un espesor de Breslow y niveles de Clark bajos y en el análisis estadístico fueron predictores significativos en la probabilidad de hallar esta asociación (p < 0.027). Este estudio demuestra que sólo el espesor del tumor es un factor predictivo independiente en la asociación melanoma-nevo, el resto de las variables estudiadas no arrojaron resultados significativos desde el punto de vista estadístico. Los pacientes deben ser educados para el control de nuevas lesiones pigmentadas así como para la modificación de nevos preexistentes.The malignant melanoma is a neoplasia originated from the melanocytes located in the skin and other locations. Even though there is not information regarding its incidence and prevalence in our country, its most important risk factors are known. The melanoma can originate de novo or from previous melanocytic lesions. The concept that a melanocytic nevus can serve as a precursor lesion is supported by clinical and histological evidence. An observational, retrospective and analytical study was carried out in the Hospital Privado de Córdoba. The objective was to determine which is the frequency of association of malignant melanomas that develop on previous nevus. A total of 134 melanomas were analyzed. In 32 cases (24%), the melanomas were histologically associated with nevus, in individuals with Breslow's depth bigger than 1 mm the percentage of association was 16.3% while in those exhibiting Breslow smaller than 1 mm the percentage of association was 38.1%. Having evaluated the melanomas in relation to the Breslow and Clark classification, we observed that the nevus associated melanoma group showed less Breslow thickness and low Clark levels, which, by statistical analysis were shown to be significant predictors of the probabilty of finding this association (p < 0.027). This study demonstrates that the tumor thickness by itself is an independent predictive factor of the association melanoma-nevus. However, the rest of the variables studied did not throw significant results from the statistical point of view. In conclusion, patients must be educated for the control of new pigmented injuries as well as for the modification of preexisting nevi.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The Cutaneous Melanoma (CM) is considered responsible for most deaths related to skin cancer. The frequency of new cases and incidence is increasing, especially among young people. In Brazil the highest rates are in the South because individual tissue composition and the population habits: the majority of Caucasians exposed to intermittent solar radiation without sun protection. Risk factors for the development of CM can be both genetic, and environmental, but recent surveys show that factors not yet studied might be favoring an increase in the number of cases of MC in recent decades. Moreover cancer cells change and activate various physiological mechanisms, among them platelets, which besides the function tromboregulation are also involved in tumor progression. In the platelet surface we meet various enzymes, among them enzymes that are part of the purinergic system. Thus, this study evaluated the hydrolysis of nucleoside and nucleotides adenine in MC patients and controls, in order to elucidate how the system is acting purinergic this cancer. Furthermore we selected 23 patients with post-treatment CM and 25 control patients. The average age for the CM group was 48 ± 12.5 years and for the control group was 47 ± 13 years. The percentage of affected women was higher than men: 65%. The majority of the MC group had surgical removal of the tumor among 2013-2014 and the most affected body parts were the lower and upper limbs, trunk and head. Were analyzed the activity of enzymes that hydrolyze nucleotides ATP, ADP and AMP and the nucleoside adenosine through enzymatic enzymes activity E-NTPDase, E-5'-Nucleotidade, Adenosine Deaminase (ADA) in platelets, alkaline phosphatase (ALP) and ADA in serum and the E-NTPDase and E-5'-Nucleotidase expression. The results demonstrated a decrease in hydrolysis of the nucleotides ATP, ADP and AMP in platelet, and an increased adenosine hydrolysis by the ADA in both serum and platelets. The ALP activity was also increased in patients with CM when compared with control patients. For the expression E-NTPDase and E-5'-nucleotidase there was no significant difference between groups. Thus, in our study, was found a decrease extracellular ATP degradation rate, increased ADA activity in platelets and serum, being beneficial for patients with CM. So, concluded this way a protective activity against multiple primary neoplasms, by increasing extracellular ATP in patients who had surgical removal CM. The purinergic signaling would prevent the growth of a new tumor because ATP is not being degraded by promoting the platelet signaling to activate the lymphocyte immune response. O Melanoma Cutâneo (MC) é considerado o responsável pela maioria das mortes relacionadas ao câncer de pele. A frequência de novos casos e a incidência é crescente, especialmente na população jovem. No Brasil as maiores taxas estão na região Sul em razão da composição da pele e os hábitos de sua população: uma maioria de caucasianos expostos à radiação solar intermitente sem fotoproteção. Os fatores de risco para o desenvolvimento do MC tanto podem ser genéticos, quanto ambientais, entretanto pesquisas recentes apontam que fatores ainda não estudados possam estar favorecendo o aumento do número de casos de MC nas últimas décadas. Células cancerígenas alteram e ativam vários mecanismos fisiológicos, dentre eles as plaquetas, que além da função de tromboregulação também estão envolvidas na progressão tumoral. Na superfície das plaquetas encontramos vários tipos de enzimas, entre elas as enzimas que fazem parte do sistema purinérgico. Sendo assim, neste trabalho avaliou-se a hidrólise dos nucleotídeos e do nucleosídeo de adenina em pacientes com MC e pacientes controles, com o objetivo de elucidar como o sistema purinérgico está agindo neste câncer. Para isso, selecionou-se 23 pacientes com MC pós-tratamento e 25 pacientes controles. A média de idade para o grupo MC foi de 48 ± 12.5 anos e para o grupo controle foi de 47 ± 13 anos. A porcentagem de mulheres afetadas pelo cancêr foi maior do que os homens: 65%. A grande maioria do grupo MC teve a remoção cirúrgica do tumor entre 2013-2014 e as partes mais afetadas do corpo foram os membros inferiores, superiores, tronco e cabeça. Foi analisada a atividade das enzimas que hidrolisam os nucleotídeos ATP, ADP e AMP e o nucleosídeo adenosina através da atividade enzimática da E-NTPDase, E-5’-Nucleotidade, Adenosina Desaminase (ADA) em plaquetas, Fosfatase Alcalina (FAL) e ADA em soro e a expressão da E-NTPDase e da E-5’-Nucleotidase. Os resultados encontrados demonstraram uma diminuição na hidrólise dos nucleotídeos ATP, ADP e AMP em plaquetas de pacientes com MC quando comparados ao grupo controle e um aumento da hidrólise da adenosina pela ADA tanto em soro quanto em plaquetas de pacientes com MC. A atividade da FAL também foi aumentada nos pacientes com MC quando comparados aos pacientes controles. Para a expressão da E-NTPDase e E-5’-Nucleotidase não se observou diferença significativa entre os grupos. Conclui-se que ocorre um aumento nos níveis de ATP e uma diminuição nos níveis de adenosina, que pode conferir uma atividade protetora contra nova neoplasia, em virtude principalmente do papel estimulador do sistema imune pelo ATP.